| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 沙门氏菌病原学研究概况 | 第12-13页 |
| 1.1.1 沙门氏菌病原学特征 | 第12页 |
| 1.1.2 沙门氏菌的危害 | 第12页 |
| 1.1.3 沙门氏菌与宿主之间的相互作用 | 第12-13页 |
| 1.2 沙门氏菌鞭毛蛋白免疫学研究概况 | 第13-16页 |
| 1.2.1 鞭毛蛋白的结构与功能 | 第13页 |
| 1.2.2 鞭毛蛋白的致病机制 | 第13-14页 |
| 1.2.3 鞭毛蛋白识别TLR5的机制 | 第14页 |
| 1.2.4 鞭毛蛋白的佐剂作用机制 | 第14-15页 |
| 1.2.5 基于鞭毛蛋白疫苗的优势 | 第15-16页 |
| 1.3 荧光定量PCR技术 | 第16-17页 |
| 1.3.1 荧光定量PCR技术原理 | 第16页 |
| 1.3.2 荧光定量PCR技术种类 | 第16页 |
| 1.3.3 荧光定量PCR技术应用 | 第16-17页 |
| 1.4 细胞因子 | 第17-18页 |
| 1.4.1 细胞因子简介 | 第17页 |
| 1.4.2 细胞因子的应用 | 第17-18页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 第二章 肠炎沙门氏菌鞭毛蛋白的原核表达与纯化 | 第19-32页 |
| 2.1 材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 菌株、载体、多抗、细胞 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第19页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第19-21页 |
| 2.2 方法 | 第21-25页 |
| 2.2.1 肠炎沙门氏菌鞭毛蛋白fliC全长基因的克隆 | 第21-22页 |
| 2.2.2 融合表达载体的构建 | 第22-23页 |
| 2.2.3 重组质粒pET32a-fliC的原核表达 | 第23页 |
| 2.2.4 融合FliC蛋白可溶性分析 | 第23页 |
| 2.2.5 融合FliC蛋白的纯化 | 第23-24页 |
| 2.2.6 293T细胞中hTLR5表达情况鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.7 流式细胞仪分析FliC融合蛋白与人hTLR5之间的相互作用 | 第25页 |
| 2.3 结果 | 第25-30页 |
| 2.3.1 fliC基因的克隆与鉴定 | 第25-27页 |
| 2.3.2 FliC蛋白的诱导表达及可溶性分析 | 第27-28页 |
| 2.3.3 FliC蛋白的纯化结果 | 第28-29页 |
| 2.3.4 293T细胞中hTLR5表达情况鉴定结果 | 第29-30页 |
| 2.3.5 流式细胞仪检测FliC融合蛋白生物活性结果 | 第30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 FliC蛋白对鸡PBMCs分泌细胞因子影响的研究 | 第32-45页 |
| 3.1 材料 | 第32页 |
| 3.1.1 质粒、SPF鸡血 | 第32页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第32页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第32页 |
| 3.2 方法 | 第32-37页 |
| 3.2.1 鸡细胞因子的克隆与鉴定 | 第32-34页 |
| 3.2.2 相对荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第34-35页 |
| 3.2.3 qRT-PCR检测Fli C蛋白对鸡PBMCs分泌细胞因子的影响 | 第35-37页 |
| 3.3 结果 | 第37-43页 |
| 3.3.1 细胞因子阳性质粒的构建与鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3.2 荧光定量PCR标准曲线的确定 | 第38-39页 |
| 3.3.3 FliC鞭毛蛋白对鸡PBMCs分泌细胞因子表达影响 | 第39-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
