| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 符号说明 | 第19-21页 |
| 第一章 绪论 | 第21-35页 |
| 1.1 肝脏生理学特征 | 第21-22页 |
| 1.2 肝脏的天然免疫优势 | 第22-26页 |
| 1.2.1 NK细胞 | 第23-24页 |
| 1.2.2 NKT细胞 | 第24-25页 |
| 1.2.3 γδT细胞 | 第25-26页 |
| 1.3 肝脏免疫耐受 | 第26-35页 |
| 1.3.1 肝脏中含有多种抗原递呈细胞 | 第27-33页 |
| 1.3.2 HBV免疫耐受 | 第33-35页 |
| 第二章 材料和方法 | 第35-63页 |
| 2.1 实验动物 | 第35页 |
| 2.2 实验试剂 | 第35-39页 |
| 2.2.1 质粒及分子生物学相关试剂 | 第35-36页 |
| 2.2.2 动物实验相关试剂 | 第36页 |
| 2.2.3 小鼠细胞分离、纯化相关试剂 | 第36-37页 |
| 2.2.4 细胞培养及刺激、阻断相关试剂 | 第37-38页 |
| 2.2.6 免疫组化及H&E染色相关试剂 | 第38页 |
| 2.2.7 丙氨酸氨基转移酶ALT检测试剂盒 | 第38-39页 |
| 2.2.8 乙型肝炎病毒相关检测试剂盒 | 第39页 |
| 2.2.9 细胞因子检测试剂盒 | 第39页 |
| 2.2.10 腺病毒AdHBV1.3包装相关试剂 | 第39页 |
| 2.3 实验器材 | 第39-41页 |
| 2.4 实验方法 | 第41-63页 |
| 2.4.1 中抽质粒 | 第41-42页 |
| 2.4.2 包装腺病毒AdHBV1.3 | 第42-46页 |
| 2.4.3 高压注射pAAV/HBV1.2质粒构建HBV持续携带小鼠模型和HBV清除小鼠模型 | 第46页 |
| 2.4.4 AdHBV1.3腺病毒构建HBV持续携带小鼠模型 | 第46页 |
| 2.4.5 HBV表面抗原免疫小鼠 | 第46页 |
| 2.4.6 放射免疫法检测HBV表面抗原、e抗原、表面抗体 | 第46-47页 |
| 2.4.8 定量PCR法检测HBV DNA | 第47-48页 |
| 2.4.9 小鼠多种脏器淋巴细胞的分离 | 第48-49页 |
| 2.4.10 灌流法分离小鼠肝脏实质细胞和非实质细胞 | 第49-50页 |
| 2.4.11 流式细胞术 | 第50-51页 |
| 2.4.12 MACS纯化细胞 | 第51-52页 |
| 2.4.13 枯否细胞/CD8~+T细胞共培养实验 | 第52页 |
| 2.4.14 细胞转输实验 | 第52-53页 |
| 2.4.15 骨髓来源巨噬细胞的诱导和刺激培养 | 第53-54页 |
| 2.4.16 枯否细胞的清除 | 第54页 |
| 2.4.17 ELISA检测细胞因子 | 第54-55页 |
| 2.4.18 石蜡切片 | 第55页 |
| 2.4.19 H&E染色 | 第55-56页 |
| 2.4.20 免疫组化检测HBV核心抗原 | 第56-57页 |
| 2.4.21 冰冻切片 | 第57页 |
| 2.4.22 免疫荧光 | 第57-58页 |
| 2.4.23 RNA提取、RT-PCR | 第58-60页 |
| 2.4.24 鉴定小鼠 | 第60页 |
| 2.4.25 丙氨酸氨基转移酶(ALT)的测定 | 第60-62页 |
| 2.4.26 细胞培养相关操作 | 第62页 |
| 2.4.27 统计学分析 | 第62-63页 |
| 第三章 TLR2参与HBV免疫耐受的研究 | 第63-81页 |
| 3.1 引言 | 第63-64页 |
| 3.2 实验结果 | 第64-78页 |
| 3.2.1 HBV持续携带小鼠模型的建立 | 第64-66页 |
| 3.2.2 NK细胞不参与HBV持续携带的形成 | 第66-67页 |
| 3.2.3 TLR2缺陷促进HBV清除 | 第67-68页 |
| 3.2.4 TLR2缺陷不影响HBV-carrier小鼠的体液免疫应答 | 第68-69页 |
| 3.2.5 TLR2缺陷不影响正常小鼠CD8~+T细胞的功能 | 第69页 |
| 3.2.6 H-BV-carrier小鼠中肝脏CD8~+T细胞呈耗竭状态 | 第69-70页 |
| 3.2.7 TLR2~(-/-)鼠中抗HBV CD8~+T细胞功能增强 | 第70-71页 |
| 3.2.8 TLR2缺陷不影响HBV-carrier小鼠调节性T细胞的比例 | 第71-72页 |
| 3.2.9 枯否细胞通过TLR2依赖的方式诱导CD8~+T细胞的耗竭 | 第72-74页 |
| 3.2.10 HBcAg反应性的枯否细胞通过产生IL-10诱导CD8~+T细胞的耗竭 | 第74-77页 |
| 3.2.11 TLR2缺陷促进AdHBV1.3的清除 | 第77-78页 |
| 3.3 总结与讨论 | 第78-81页 |
| 第四章 HBV清除模型中NK细胞记忆功能的研究 | 第81-91页 |
| 4.1 引言 | 第81-82页 |
| 4.2 实验结果 | 第82-89页 |
| 4.2.1 HBV清除模型的建立 | 第82-83页 |
| 4.2.2 高剂量HBV质粒注射促进NK细胞活化 | 第83-84页 |
| 4.2.3 高剂量HBV质粒注射不影响NK细胞成熟 | 第84-85页 |
| 4.2.4 高剂量HBV质粒注射促进NK细胞增殖 | 第85-86页 |
| 4.2.5 高剂量HBV质粒注射促进NK细胞表达记忆性相关分子 | 第86-87页 |
| 4.2.6 HBV清除小鼠的淋巴细胞具有记忆功能 | 第87页 |
| 4.2.7 HBV清除小鼠的NK细胞不具有保护再次感染的能力 | 第87-89页 |
| 4.3 总结与讨论 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 致谢 | 第101-103页 |
| 攻读博士学位期间的主要研究成果 | 第103页 |
| 学术论文发表情况 | 第103页 |
| 会议论文 | 第103页 |
| 获得奖励 | 第103页 |
