中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词 | 第11-12页 |
引言 | 第12-25页 |
1 蛋白质组学及其研究技术的简介 | 第12-14页 |
1.1 蛋白质组学简介 | 第12页 |
1.2 蛋白质组学分离技术简介 | 第12-14页 |
2 禽流感病毒与蛋白质棕榈酰化修饰简介 | 第14-25页 |
2.1 从禽流感到人流感 | 第15-16页 |
2.2 蛋白质的脂类修饰 | 第16-18页 |
2.3 流感病毒蛋白质的简介及其棕榈酰化修饰 | 第18-22页 |
2.4 棕榈酰化蛋白质的分析检测方法 | 第22-25页 |
第一章 流感病毒感染的VERO细胞的棕榈酰化蛋白质组的研究 | 第25-40页 |
1 实验材料 | 第25-26页 |
1.1 仪器与试剂 | 第25-26页 |
2 实验方法 | 第26-28页 |
2.1 病毒感染和蛋白样品制备 | 第26页 |
2.2 利用酰基-生物素置换反应标记和纯化棕榈酰化蛋白 | 第26-27页 |
2.3 SDS-凝胶电泳(PAGE)分析 | 第27页 |
2.4 免疫酶联吸附(ELISA)法对生物素标记的蛋白进行定量分析 | 第27页 |
2.5 利用胰蛋白酶水解蛋白样品 | 第27页 |
2.6 利用 Zip Tip C18 Pipette Tips 微量层析柱处理样品 | 第27-28页 |
2.7 液相色谱-质谱联用分析鉴定蛋白 | 第28页 |
2.8 数据检索 | 第28页 |
3 实验结果 | 第28-38页 |
3.1 SDS-凝胶电泳(PAGE)分析 | 第28-29页 |
3.2 免疫酶联吸附(ELISA)法对生物素标记的蛋白进行定量分析 | 第29页 |
3.3 对质谱鉴定得到的蛋白质进行蛋白质组学分析 | 第29-34页 |
3.4 对筛选得到的15个特异性蛋白质进行生物信息学分析 | 第34-36页 |
3.5 H5N1流感病毒的棕榈酰化蛋白的分析与鉴定 | 第36-38页 |
4 小结 | 第38-40页 |
第二章 流感病毒感染VERO细胞过程中胞浆蛋白的棕榈酰化修饰变化的研究 | 第40-48页 |
1 实验材料 | 第40-41页 |
1.1 仪器与试剂 | 第40-41页 |
2 实验方法 | 第41-42页 |
2.1 病毒感染和蛋白样品制备 | 第41页 |
2.2 利用酰基-生物素置换反应标记和纯化棕榈酰化蛋白 | 第41页 |
2.3 利用胰蛋白酶水解蛋白样品 | 第41-42页 |
2.4 利用ZipTip C18 Pipette Tips微量层析柱处理样品 | 第42页 |
2.5 液相色谱-质谱联用分析鉴定蛋白 | 第42页 |
2.6 数据检索 | 第42页 |
3 实验结果 | 第42-47页 |
3.1 对质谱鉴定得到的蛋白质进行蛋白质组学分析 | 第42-45页 |
3.2 对筛选得到的16个特异性蛋白质进行生物信息学分析 | 第45-47页 |
4 小结 | 第47-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
附录 | 第56-85页 |
作者简介及攻读硕士期间所取得的科研成果 | 第85-86页 |
致谢 | 第86页 |