| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 毛竹的概况 | 第10-11页 |
| 1.1.1 毛竹的分布 | 第10页 |
| 1.1.2 生物学特性 | 第10页 |
| 1.1.3 应用价值 | 第10-11页 |
| 1.2 植物启动子研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.1 植物启动子结构 | 第11页 |
| 1.2.2 植物启动子分类 | 第11-12页 |
| 1.2.2.1 组成型启动子 | 第12页 |
| 1.2.2.2 组织特异型启动子 | 第12页 |
| 1.2.2.3 诱导型启动子 | 第12页 |
| 1.3 克隆启动子的方法 | 第12-14页 |
| 1.4 启动子的功能分析方法 | 第14-15页 |
| 1.4.1 生物信息学分析法 | 第14页 |
| 1.4.2 实验分析法 | 第14-15页 |
| 1.5 植物MYB转录因子研究现状 | 第15-18页 |
| 1.5.1 MYB转录因子的结构特点 | 第15-16页 |
| 1.5.2 MYB转录因子功能 | 第16-18页 |
| 1.5.2.1 调控植物细胞的发育 | 第16-17页 |
| 1.5.2.2 调控植物初生及次生代谢 | 第17页 |
| 1.5.2.3 调控对植物生物和非生物胁迫的应答 | 第17页 |
| 1.5.2.4 调控植物细胞的命运 | 第17-18页 |
| 1.6 立题依据与意义 | 第18-19页 |
| 1.7 技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 毛竹MYB基因启动子的克隆及分析 | 第20-29页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.4 培养基与溶液配制 | 第20页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.6 引物设计 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1 毛竹DNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.2 启动子PCR扩增 | 第22页 |
| 2.2.3 目的片段的回收 | 第22-23页 |
| 2.2.4 大肠杆菌DH5α感受态细胞制备 | 第23页 |
| 2.2.5 目的片段的连接与转化 | 第23-24页 |
| 2.2.6 阳性克隆的筛选及测序鉴定 | 第24页 |
| 2.2.7 启动子序列的生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-28页 |
| 2.3.1 毛竹基因组DNA提取 | 第24-25页 |
| 2.3.2 毛竹MYB启动子的PCR扩增 | 第25页 |
| 2.3.3 PeMYBpro启动子序列的生物信息学分析 | 第25-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 第三章 pCAMBIA1301-PeMYBpro表达载体构建及活性验证 | 第29-39页 |
| 3.1 试验材料 | 第29-31页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 3.1.2 菌株与质粒 | 第29页 |
| 3.1.3 化学试剂和酶制剂 | 第29页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第29页 |
| 3.1.5 主要培养基与溶液配制 | 第29-31页 |
| 3.1.6 引物的设计与合成 | 第31页 |
| 3.2 试验方法 | 第31-35页 |
| 3.2.1 PeMYBpro目的片段的获得 | 第31-32页 |
| 3.2.2 中间重组质粒pMD19-Tsimple/PeMYBpro载体的构建 | 第32页 |
| 3.2.3 重组质粒DNA提取 | 第32-33页 |
| 3.2.4 pCAMBIA1301-PeMYBpro植物双元表达载体的构建 | 第33页 |
| 3.2.5 pCAMBIA1301-PeMYBpro植物表达载体的酶切及测序鉴定 | 第33-34页 |
| 3.2.6 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第34页 |
| 3.2.7 pCAMBIA1301-PeMYBpro转化根癌农杆菌GV3101及检测 | 第34页 |
| 3.2.8 洋葱表皮瞬时表达 | 第34-35页 |
| 3.2.9 GUS活性检测 | 第35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-38页 |
| 3.3.1 中间重组质粒pMD19-Tsimple/PeMYBpro菌液PCR电泳检测 | 第35-36页 |
| 3.3.2 中间重组质粒pMD19-Tsimple/PeMYBpro酶切结果 | 第36页 |
| 3.3.3 植物双元表达载体pCAMBIA1301-PeMYBpro验证结果 | 第36-37页 |
| 3.3.4 毛竹PeMYBpro启动子在逆境胁迫下的瞬时表达分析 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 启动子5'端缺失表达载体的构建及瞬时表达分析 | 第39-50页 |
| 4.1 试验材料 | 第39-40页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第39页 |
| 4.1.2 菌株与载体 | 第39页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第39页 |
| 4.1.4 主要试剂 | 第39页 |
| 4.1.5 主要溶液的配制 | 第39-40页 |
| 4.1.6 引物的设计与合成 | 第40页 |
| 4.2 试验方法 | 第40-43页 |
| 4.2.1 PeMYBpro启动子5'端渐变缺失载体构建 | 第40-41页 |
| 4.2.2 毛竹PeMYBpro启动子5'端序列缺失片段的扩增 | 第41页 |
| 4.2.3 5'端缺失植物表达载体构建 | 第41页 |
| 4.2.4 5'端缺失载体转化根癌农杆菌GV3101及检测 | 第41-42页 |
| 4.2.5 农杆菌侵染洋葱表皮 | 第42页 |
| 4.2.6 GUS活性检测 | 第42页 |
| 4.2.7 GUS荧光定量测定 | 第42-43页 |
| 4.3 结果与分析 | 第43-48页 |
| 4.3.1 PeMYBpro启动子的5'端序列缺失片段的获得 | 第43-44页 |
| 4.3.2 PeMYBpro的5'端序列缺失表达载体的验证结果 | 第44-45页 |
| 4.3.3 PeMYBpro的5'端序列缺失表达载体在洋葱表皮中的GUS活性分析 | 第45-46页 |
| 4.3.4 5'端序列缺失表达载体在洋葱表皮瞬时表达的GUS定量分析 | 第46-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 序列 | 第58-59页 |
| 个人简介 | 第59页 |
| 在校期间科研情况 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
