摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略语 | 第10-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-30页 |
1. 文昌鱼 | 第16-18页 |
1.1 文昌鱼概述 | 第16-17页 |
1.2 文昌鱼的生殖、胚胎发育和变态 | 第17页 |
1.3 文昌鱼的进化地位和学术地位 | 第17-18页 |
2. 抗菌肽 | 第18-27页 |
2.1 抗菌肽概述 | 第18-19页 |
2.2 抗菌肽的来源 | 第19-21页 |
2.2.1 天然来源抗菌肽 | 第19页 |
2.2.2 微生物源抗菌肽 | 第19页 |
2.2.3 植物源抗菌肽 | 第19-20页 |
2.2.4 动物源抗菌肽 | 第20页 |
2.2.5 人工化学合成抗菌肽 | 第20页 |
2.2.6 基因工程获取抗菌肽 | 第20-21页 |
2.2.7 酶解法获得抗菌肽 | 第21页 |
2.3 抗菌肽重要理化性质 | 第21-23页 |
2.3.1 抗菌肽的长度 | 第21页 |
2.3.2 抗菌肽的静电荷 | 第21页 |
2.3.3 抗菌肽的螺旋度 | 第21-22页 |
2.3.4 抗菌肽的疏水性 | 第22页 |
2.3.5 抗菌肽的两亲性 | 第22页 |
2.3.6 抗菌肽的溶解性 | 第22-23页 |
2.4 抗菌肽的结构特征和作用特点 | 第23-24页 |
2.4.1 抗菌肽的结构特征 | 第23页 |
2.4.2 抗菌肽的作用特点 | 第23-24页 |
2.5 抗菌肽的作用机制 | 第24-27页 |
2.5.1 作用于细胞膜的抗菌肽 | 第24-25页 |
2.5.2 作用于细胞内靶点的抗菌肽 | 第25-27页 |
3. 研究目的和技术路线 | 第27-30页 |
3.1 研究目的 | 第27-28页 |
3.2 技术路线 | 第28-30页 |
第二章 青岛文昌鱼抗菌肽基因Bjamp的克隆及其成熟抗菌肽mBjAMP1的功能研究 | 第30-66页 |
1. 前言 | 第30页 |
2. 材料与方法 | 第30-51页 |
2.1 生物信息学分析确定目标基因 | 第30-31页 |
2.2 实验材料 | 第31-34页 |
2.2.1 文昌鱼 | 第31-32页 |
2.2.2 实验试剂 | 第32页 |
2.2.3 实验仪器 | 第32-33页 |
2.2.4 菌株与质粒 | 第33页 |
2.2.5 DNA测序及引物合成 | 第33-34页 |
2.3 实验方法 | 第34-51页 |
2.3.1 性成熟青岛文昌鱼总RNA提取及总cDNA的获取 | 第34-37页 |
2.3.2 青岛文昌鱼Bjamp1基因ORF的克隆 | 第37-40页 |
2.3.3 文昌鱼Bjamp1基因3’序列的克隆 | 第40-43页 |
2.3.4 青岛文昌鱼Bjamp1基因ORF生物信息学分析 | 第43页 |
2.3.5 Bjamp1表达组织分布研究与LPS/LTA刺激表达情况的研究 | 第43-45页 |
2.3.6 化学合成mBjAMP1及其溶解 | 第45页 |
2.3.7 圆二色性光谱(CD)实验 | 第45页 |
2.3.8 mBjAMP1的抑菌试验 | 第45-46页 |
2.3.9 细胞膜去极化实验 | 第46-47页 |
2.3.10 细胞膜通透性改变实验 | 第47页 |
2.3.11 酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第47-49页 |
2.3.12 透射电镜实验 | 第49页 |
2.3.13 溶血实验 | 第49-50页 |
2.3.14 细胞毒性实验(MTT) | 第50-51页 |
3. 实验结果 | 第51-63页 |
3.1 生物信息学确定目标基因Bjamp1 | 第51-52页 |
3.2 成体文昌鱼总RNA的提取 | 第52页 |
3.3 成体文昌鱼cDNA模板的获得 | 第52页 |
3.4 文昌鱼Bjamp1基因ORF的扩增 | 第52-53页 |
3.5 文昌鱼Bjamp1基因的生物信息学分析 | 第53-55页 |
3.6 Bjamp1表达水平的组织分布及LPS/LTA处理后的表达情况 | 第55页 |
3.7 化学合成mBjAMP1 | 第55页 |
3.8 mBjAMP1的圆二色性光谱(CD)实验 | 第55-57页 |
3.9 mBjAMP1的抑菌试验 | 第57-58页 |
3.10 细胞膜的去极化实验 | 第58-59页 |
3.11 细胞膜透化实验 | 第59-60页 |
3.12 酶联吸附试验(ELISA) | 第60-61页 |
3.13 透射电镜实验 | 第61-62页 |
3.14 溶血实验 | 第62页 |
3.15 细胞毒性实验 | 第62-63页 |
4. 讨论 | 第63-66页 |
总结与展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
个人简历 | 第76-77页 |
发表的学术论文 | 第77页 |