| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 单增李斯特菌的生物学特性 | 第12-14页 |
| 1.1.1 单增李斯特菌的形态及培养特性 | 第12-13页 |
| 1.1.2 单增李斯特菌的生化特性 | 第13页 |
| 1.1.3 单增李斯特菌的致病性及相关毒力因子 | 第13-14页 |
| 1.2 单核细胞增生李斯特菌流行病学研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 分布 | 第14-15页 |
| 1.2.2 传播途径 | 第15页 |
| 1.2.3 易感人群和动物及临床表现 | 第15页 |
| 1.2.4 流行情况 | 第15-17页 |
| 1.3 单核细胞增生李斯特菌的检测方法研究现状 | 第17-21页 |
| 1.3.1 传统微生物鉴定检测法 | 第17页 |
| 1.3.2 免疫学检测方法 | 第17-18页 |
| 1.3.3 分子生物学检测法 | 第18-20页 |
| 1.3.4 化学检测方法 | 第20-21页 |
| 1.4 随机扩增多态性DNA技术分析(RAPD) | 第21-22页 |
| 1.4.1 随机扩增多态性DNA技术的基本工作原理 | 第21页 |
| 1.4.2 随机扩增多态性DNA技术的特点 | 第21-22页 |
| 1.4.3 随机扩增多态性DNA技术的应用 | 第22页 |
| 1.5 本研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 2 单增李斯特菌模板DNA样品提取方法的筛选 | 第24-31页 |
| 2.1 材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 菌株 | 第24页 |
| 2.1.2 主要培养基 | 第24页 |
| 2.1.3 主要试剂配制以及试剂来源 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-27页 |
| 2.2.1 单增李斯特菌的培养与DNA提取 | 第26-27页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第27-29页 |
| 2.3.1 单增李斯特菌模板DNA样品提取方法的筛选 | 第27-29页 |
| 2.3.2 单增李斯特菌模板DNA样品的制备 | 第29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-30页 |
| 2.5 小结 | 第30-31页 |
| 3 单增李斯特菌RAPD反应体系条件优化与重复性实验 | 第31-45页 |
| 3.1 材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 菌株 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 3.1.4 主要培养基 | 第31页 |
| 3.1.5 随机引物 | 第31-32页 |
| 3.1.6 单增李斯特菌模板DNA样品准备 | 第32页 |
| 3.2 方法 | 第32-33页 |
| 3.2.1 RAPD-PCR预扩增实验 | 第32-33页 |
| 3.2.2 RAPD-PCR最优扩增条件的确定 | 第33页 |
| 3.2.3 RAPD-PCR重复性实验验证 | 第33页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第33-43页 |
| 3.3.1 特异性引物预筛选 | 第33-34页 |
| 3.3.2 RAPD-PCR扩增条件优化 | 第34-42页 |
| 3.3.3 RAPD-PCR重复性实验验证 | 第42-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 小结 | 第44-45页 |
| 4 单增李斯特菌RAPD-PCR分析方法分型研究 | 第45-59页 |
| 4.1 材料 | 第45-46页 |
| 4.1.1 菌种 | 第45-46页 |
| 4.1.2 主要培养基 | 第46页 |
| 4.2 方法 | 第46-48页 |
| 4.2.1 菌体的培养与DNA提取 | 第46-47页 |
| 4.2.2 RAPD-PCR分型技术研究 | 第47-48页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第48-56页 |
| 4.3.1 李斯特菌属内标准菌株特异性引物的筛选 | 第48-52页 |
| 4.3.2 李斯特菌属外标准菌株特异性引物的筛选 | 第52-54页 |
| 4.3.3 聚类分析 | 第54-56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-57页 |
| 4.5 小结 | 第57-59页 |
| 5 单增李斯特菌RAPD分型技术在农副产品中的应用 | 第59-66页 |
| 5.1 材料 | 第59页 |
| 5.1.1 农产品样品 | 第59页 |
| 5.1.2 检测菌株 | 第59页 |
| 5.1.3 随机引物 | 第59页 |
| 5.1.4 主要仪器 | 第59页 |
| 5.1.5 主要试剂 | 第59页 |
| 5.2 方法 | 第59-60页 |
| 5.2.1 适宜浓度菌悬液的制备 | 第59页 |
| 5.2.2 模板样品DNA的提取 | 第59页 |
| 5.2.3 RAPD-PCR检出限的测定 | 第59-60页 |
| 5.2.4 空白农产品样品的制备 | 第60页 |
| 5.2.5 人工模拟污染样品的制备 | 第60页 |
| 5.2.6 人工污染样品检出限的确定 | 第60页 |
| 5.2.7 RAPD-PCR技术对食物中存在的单增李斯特菌调查研究 | 第60页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第60-64页 |
| 5.3.1 菌液过夜培养后菌体浓度的确定 | 第60页 |
| 5.3.2 RAPD-PCR检出限的确定 | 第60-61页 |
| 5.3.3 人工模拟污染试验检出限确定 | 第61-64页 |
| 5.3.4 食物中单增李斯特菌污染现状的调查研究 | 第64页 |
| 5.4 讨论 | 第64-65页 |
| 5.5 小结 | 第65-66页 |
| 6 结论 | 第66-68页 |
| 6.1 研究总结 | 第66-67页 |
| 6.2 创新点 | 第67页 |
| 6.3 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
