| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 文献回顾 | 第15-24页 |
| 第一部分 SEMA3A基因修饰脂肪干细胞的获取和验证 | 第24-35页 |
| 1.实验所需材料与仪器 | 第24-26页 |
| 1.1 实验所需主要材料 | 第24-25页 |
| 1.2 实验所需主要仪器 | 第25-26页 |
| 1.3 实验所需动物 | 第26页 |
| 2.试验方法 | 第26-32页 |
| 2.1 实验分组 | 第26页 |
| 2.2 Sema3A重组质粒载体的制作和提取 | 第26-27页 |
| 2.3 Sema3A慢病毒载体的包装 | 第27-28页 |
| 2.4 脂肪干细胞的分离和培养 | 第28-29页 |
| 2.5 Sema3A慢病毒载体感染ASCs | 第29页 |
| 2.6 过表达Sema3A脂肪干细胞的验证 | 第29-31页 |
| 2.7 统计分析 | 第31-32页 |
| 3.试验结果 | 第32-33页 |
| 3.1 原代脂肪干细胞形态和慢病毒载体感染对脂肪干细胞的影响 | 第32页 |
| 3.2 慢病毒载体在脂肪干细胞内的高比例整合 | 第32页 |
| 3.3 脂肪干细胞群体过表达了Sema3A | 第32页 |
| 3.4 Sema3A在脂肪干细胞内蛋白水平的过表达 | 第32-33页 |
| 4.讨论 | 第33-35页 |
| 第二部分 SEMA3A对脂肪干细胞增殖、迁移、成骨和成脂分化的作用 | 第35-44页 |
| 1.实验所需材料与仪器 | 第35-37页 |
| 1.1 实验所需主要材料 | 第35-36页 |
| 1.2 实验所需主要仪器 | 第36-37页 |
| 1.3 实验所需动物 | 第37页 |
| 2.试验方法 | 第37-39页 |
| 2.1 实验分组 | 第37页 |
| 2.2 脂肪干细胞的分离培养和Sema3A慢病毒载体的包装与感染 | 第37页 |
| 2.3 脂肪干细胞增殖和迁移能力检测 | 第37-38页 |
| 2.4 脂肪干细胞的成骨、成脂分化诱导和定量 | 第38页 |
| 2.5 成骨、成脂相关基因表达的q-PCR检测 | 第38-39页 |
| 2.6 统计分析 | 第39页 |
| 3.试验结果 | 第39-43页 |
| 3.1 过表达Sema3A对脂肪干细胞增殖和迁移能力的影响 | 第39-40页 |
| 3.2 过表达Sema3A对脂肪干细胞成骨和成脂分化能力的影响 | 第40-41页 |
| 3.3 过表达Sema3A对脂肪干细胞诱导分化过程中成骨、成脂相关基因表达的影响 | 第41-43页 |
| 4.讨论 | 第43-44页 |
| 第三部分 脂肪干细胞PLGA支架复合体的制作和对大鼠颅骨极限骨缺损的作用 | 第44-52页 |
| 1.实验所需材料与仪器 | 第44-46页 |
| 1.1 实验所需主要材料 | 第44-45页 |
| 1.2 实验所需主要仪器 | 第45页 |
| 1.3 实验所需动物 | 第45-46页 |
| 2.试验方法 | 第46-48页 |
| 2.1 实验分组 | 第46页 |
| 2.2 PLGA支架的制作 | 第46-47页 |
| 2.3 Sema3A修饰的脂肪干细胞与PLGA支架的复合 | 第47页 |
| 2.4 临界骨缺损的制作和脂肪干细胞PLGA支架复合体的植入 | 第47页 |
| 2.5 Micro-CT扫描和分析 | 第47-48页 |
| 2.6 骨组织切片和染色 | 第48页 |
| 2.7 统计分析 | 第48页 |
| 3.试验结果 | 第48-51页 |
| 3.1 脂肪干细胞PLGA支架复合体的形态特征 | 第48-49页 |
| 3.2 Sema3A修饰的脂肪干细胞PLGA支架复合体提升骨缺损愈合 | 第49-51页 |
| 4.讨论 | 第51-52页 |
| 第四部分 SEMA3A调节脂肪干细胞分化的机制研究 | 第52-60页 |
| 1.实验所需材料与仪器 | 第52-54页 |
| 1.1 实验所需材料与仪器 | 第52-53页 |
| 1.2 实验所需主要仪器 | 第53-54页 |
| 1.3 实验所需动物 | 第54页 |
| 2.试验方法 | 第54-56页 |
| 2.1 实验分组 | 第54页 |
| 2.2 脂肪干细胞内 β-catenin的免疫荧光 | 第54页 |
| 2.3 Topflash/Fopflash实验 | 第54-55页 |
| 2.4 Wnt/β-catenin信号通路相关基因的q-PCR表达检测 | 第55-56页 |
| 2.5 统计分析 | 第56页 |
| 3.试验结果 | 第56-58页 |
| 3.1 免疫荧光结果 | 第56页 |
| 3.2 Topflash/Fopflash结果 | 第56-57页 |
| 3.3 两组细胞Wnt/-catenin信号通路相关基因的表达情况 | 第57-58页 |
| 4.讨论 | 第58-60页 |
| 小结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 个人简历和研究成果 | 第67-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
