摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-21页 |
1.1 核酸适配体应用及其研究 | 第8-12页 |
1.1.1 核酸适配体概述 | 第8页 |
1.1.2 核酸适配体的筛选方法 | 第8-10页 |
1.1.3 核酸适配体的优点及应用 | 第10-12页 |
1.2 毛细管电泳应用及其研究 | 第12-16页 |
1.2.1 毛细管电泳概述 | 第12页 |
1.2.2 毛细管电泳分离模式 | 第12-14页 |
1.2.3 毛细管电泳在核酸适配体研究中的应用 | 第14-16页 |
1.3 蛋白酶及其固定化 | 第16-19页 |
1.3.1 胰蛋白酶概述 | 第16-17页 |
1.3.2 酶固定化方法 | 第17-19页 |
1.4 课题研究意义和内容 | 第19-21页 |
第二章 胰蛋白酶与随机核酸文库的相互作用 | 第21-29页 |
2.1 引言 | 第21页 |
2.2 实验部分 | 第21-23页 |
2.2.1 仪器和试剂 | 第21-22页 |
2.2.2 溶液配制 | 第22-23页 |
2.2.3 实验条件 | 第23页 |
2.3 结果与讨论 | 第23-28页 |
2.3.1 胰蛋白酶的毛细管电泳分析方法 | 第23-26页 |
2.3.2 胰蛋白酶与随机核酸文库相互作用的表征 | 第26-28页 |
2.4 小结 | 第28-29页 |
第3章 随机文库扩增条件优化与次级文库制备 | 第29-48页 |
3.1 引言 | 第29页 |
3.2 实验部分 | 第29-33页 |
3.2.1 仪器和试剂 | 第29-30页 |
3.2.2 试剂配制 | 第30-31页 |
3.2.3 实验条件 | 第31-33页 |
3.3 结果与讨论 | 第33-46页 |
3.3.1 引物及随机文库的设计 | 第33-34页 |
3.3.2 SELEX中PCR过程的表征 | 第34-39页 |
3.3.3 SELEX中PCR过程的优化 | 第39-43页 |
3.3.4 次级文库的制备 | 第43-46页 |
3.4 小结 | 第46-48页 |
第四章 胰蛋白酶适配体的筛选 | 第48-62页 |
4.1 引言 | 第48页 |
4.2 实验部分 | 第48-52页 |
4.2.1 仪器和试剂 | 第48-49页 |
4.2.2 溶液配制 | 第49-50页 |
4.2.3 实验条件 | 第50-52页 |
4.3 结果与讨论 | 第52-60页 |
4.3.1 胰蛋白酶aptamer的筛选 | 第52-56页 |
4.3.2 筛选过程中核酸文库与靶标胰蛋白酶之间的亲和力表征 | 第56-57页 |
4.3.3 胰蛋白酶aptamer的测序及结构分析 | 第57-60页 |
4.4 小结 | 第60-62页 |
第五章 基于核酸适配体的胰蛋白酶固定化 | 第62-76页 |
5.1 引言 | 第62页 |
5.2 实验部分 | 第62-68页 |
5.2.1 仪器和试剂 | 第62-63页 |
5.2.2 溶液配制 | 第63-64页 |
5.2.3 实验条件 | 第64-68页 |
5.3 结果与讨论 | 第68-75页 |
5.3.1 戊二醛交联法固定aptamer | 第68-71页 |
5.3.2 原子转移自由基聚合法固定aptamer | 第71-74页 |
5.3.3 胰蛋白酶固载量测定 | 第74-75页 |
5.4 小结 | 第75-76页 |
结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第86-88页 |