| 缩写表 | 第3-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-36页 |
| 1 植物盐胁迫的研究进展 | 第14-25页 |
| 1.1 盐胁迫对植物的影响 | 第14-16页 |
| 1.1.1 膜系统及体内酶类的损伤 | 第14-15页 |
| 1.1.2 渗透胁迫 | 第15页 |
| 1.1.3 氧化伤害 | 第15页 |
| 1.1.4 离子胁迫 | 第15-16页 |
| 1.1.5 代谢失常 | 第16页 |
| 1.2 植物对盐胁迫的适应性 | 第16-20页 |
| 1.2.1 抗氧化作用 | 第16-17页 |
| 1.2.2 离子平衡调节 | 第17-19页 |
| 1.2.2.1 盐胁迫下植物细胞对K~+和Na~+的选择性吸收 | 第17-18页 |
| 1.2.2.2 Na~+的排出和区域化 | 第18-19页 |
| 1.2.3 渗透调节 | 第19-20页 |
| 1.2.3.1 甜菜碱 | 第19页 |
| 1.2.3.2 脯氨酸 | 第19-20页 |
| 1.3 植物耐盐调控的信号转导机制 | 第20-24页 |
| 1.3.1 与离子平衡相关的SOS信号途径 | 第21-22页 |
| 1.3.2 促有丝分裂活化蛋白激酶（MAPK）信号途径 | 第22-23页 |
| 1.3.3 ABA及转录因子信号途径 | 第23-24页 |
| 1.4 展望 | 第24-25页 |
| 2 植物细胞外多肽及其信号转导机制的研究进展 | 第25-32页 |
| 2.1 系统素（SYSTEMIN） | 第25-26页 |
| 2.2 PSK（PHYTOSULFOKINE） | 第26-27页 |
| 2.3 SCR | 第27-28页 |
| 2.4 CLV3 | 第28-29页 |
| 2.5 其他细胞外多肽信号分子 | 第29-30页 |
| 2.5.1 细胞外钙调素 | 第29页 |
| 2.5.2 早期结瘤蛋白40（ENOD40） | 第29-30页 |
| 2.5.3 快速碱化因子（rapid alkalinization factor，RALF） | 第30页 |
| 2.6 逆境相关的质外体蛋白质组研究进展 | 第30-32页 |
| 3 植物类受体激酶 | 第32-36页 |
| 3.1 富含亮氨酸的类受体激酶（LRR-RLKS） | 第33-34页 |
| 3.2 富含半胱氨酸的类受体激酶（CRR-RLKS） | 第34-35页 |
| 3.3 细胞壁连接的类受体激酶（WAK) | 第35-36页 |
| 第二部分 研究论文 | 第36-102页 |
| 前言 | 第36-38页 |
| 1 水稻类受体激酶（OSAPRLK1）的分子特性分析及亚细胞和组织定位 | 第38-58页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第38-39页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第38页 |
| 1.1.2 菌株和载体 | 第38页 |
| 1.1.3 实验试剂及工具酶 | 第38-39页 |
| 1.1.4 培养基 | 第39页 |
| 1.2 实验方法 | 第39-43页 |
| 1.2.1 水稻幼苗的培养 | 第39页 |
| 1.2.2 RNA的提取及完整性、纯度、含量的测定 | 第39页 |
| 1.2.3 RT-PCR扩增相关目的基因 | 第39页 |
| 1.2.4 目的片段的回收、连接 | 第39-40页 |
| 1.2.5 CaCl_2法细菌感受态细胞的制备及细菌转化 | 第40页 |
| 1.2.6 细菌质粒DNA的小量提取（碱裂解法）及酶切鉴定 | 第40-41页 |
| 1.2.7 引物合成及DNA序列测定 | 第41页 |
| 1.2.8 基因枪法瞬时表达洋葱表皮 | 第41页 |
| 1.2.9 农杆菌感受态细胞的制备 | 第41页 |
| 1.2.10 农杆菌的转化及鉴定 | 第41-42页 |
| 1.2.11 水稻愈伤组织培养和遗传转化 | 第42页 |
| 1.2.12 激光共聚焦及荧光倒置显微镜观察 | 第42-43页 |
| 1.2.13 转基因植株Gus染色 | 第43页 |
| 1.3 实验结果 | 第43-54页 |
| 1.3.1 水稻类受体激酶（OsAPRLK1）的分子特性分析 | 第43-47页 |
| 1.3.1.1 蛋白序列及结构分析 | 第43-45页 |
| 1.3.1.2 同源性分析 | 第45-46页 |
| 1.3.1.3 蛋白修饰分析 | 第46-47页 |
| 1.3.2 水稻质外体类受体激酶（OsAPRLK1）的亚细胞定位 | 第47-50页 |
| 1.3.2.1 RT-PCR克隆OsAPRLK1 全长及表达载体构建 | 第47-49页 |
| 1.3.2.2 OsAPRLK1 在转基因水稻中的恒定表达 | 第49-50页 |
| 1.3.2.3 OsAPRLK1 在洋葱表皮细胞中的瞬时表达 | 第50页 |
| 1.3.3 OsAPRLK1 的组织表达定位 | 第50-54页 |
| 1.3.3.1 水稻EST数据库中的组织定位信息 | 第50-51页 |
| 1.3.3.2 半定量RT-PCR检测OsAPRLK1 的组织表达情况 | 第51-52页 |
| 1.3.3.3 Gus染色对OsAPRLK1 进行组织表达定位 | 第52-54页 |
| 1.4 讨论 | 第54-58页 |
| 1.4.1 分子特性分析表明OsAPRLK1 可能为分泌型DUF26 蛋白 | 第54-55页 |
| 1.4.2 亚细胞定位显示OsAPRLK1 是质外体蛋白 | 第55-56页 |
| 1.4.3 OsAPRLK1 在水稻各时期的多种组织中表达 | 第56-58页 |
| 2 水稻体类受体激酶（OSAPRLK1）的功能研究 | 第58-86页 |
| 2.1 实验方法 | 第58-62页 |
| 2.1.1 Real-time定量PCR检测基因转录本的表达 | 第58页 |
| 2.1.2 体外重组蛋白的表达及纯化 | 第58-59页 |
| 2.1.3 SDS-PAGE | 第59页 |
| 2.1.4 抗体的制备 | 第59页 |
| 2.1.5 蛋白免疫印迹（Western Blot） | 第59页 |
| 2.1.6 蛋白定量 | 第59-60页 |
| 2.1.7 转基因水稻纯合体的筛选及逆境胁迫生理试验 | 第60页 |
| 2.1.8 Southern Blot检测转基因植株T-DNA插入情况 | 第60-61页 |
| 2.1.9 种子萌发试验 | 第61页 |
| 2.1.10 原子吸收法测定[Na~+]/[K~+] | 第61页 |
| 2.1.11 叶绿素含量测定 | 第61-62页 |
| 2.1.12 MDA含量测定 | 第62页 |
| 2.1.13 扫描电镜分析叶片气孔变化 | 第62页 |
| 2.2 实验结果 | 第62-82页 |
| 2.2.1 半定量检测盐胁迫下OsAPRLK1 转录水平变化 | 第62-63页 |
| 2.2.2 Real-time PCR检测盐胁迫下转录水平变化 | 第63-64页 |
| 2.2.3 免疫印记验证盐胁迫下OsAPRLK1 蛋白水平变化 | 第64-66页 |
| 2.2.3.1 构建蛋白表达载体、纯化OsAPRLK1 重组蛋白 | 第65-66页 |
| 2.2.3.2 盐胁迫下OsAPRLK1 蛋白水平变化 | 第66页 |
| 2.2.4 构建RNAi及过表达载体 | 第66-70页 |
| 2.2.5 转基因水稻分子鉴定 | 第70-73页 |
| 2.2.6 低浓度盐胁迫下转基因植株表型观察 | 第73-74页 |
| 2.2.7 盐胁迫下转基因株系种子萌发率 | 第74-76页 |
| 2.2.8 高浓度盐处理下转基因株系的存活率 | 第76-77页 |
| 2.2.9 转基因株系体内[Na~+]/[K~+]变化 | 第77页 |
| 2.2.10 转基因株系叶绿素含量变化 | 第77-78页 |
| 2.2.11 转基因株系MDA水平变化 | 第78页 |
| 2.2.12 转基因株系叶片气孔变化 | 第78-80页 |
| 2.2.13 盐反应基因表达情况 | 第80-81页 |
| 2.2.14 转基因愈伤盐胁迫下生长情况 | 第81-82页 |
| 2.3 讨论 | 第82-86页 |
| 2.3.1 OsAPRLK1 是盐诱导蛋白 | 第82页 |
| 2.3.2 OsAPRLK1 在植物盐反应中可能具有负调控作用 | 第82-86页 |
| 3 水稻类受体激酶（OSAPRLK1）相互作用蛋白的筛选 | 第86-102页 |
| 3.1 实验方法 | 第86-88页 |
| 3.1.1 酵母感受态细胞的制备 | 第86页 |
| 3.1.2 LiAc介导的质粒DNA转化酵母细胞 | 第86页 |
| 3.1.3 酵母质粒提取及鉴定 | 第86-87页 |
| 3.1.4 酵母双杂交文库的构建及筛选 | 第87-88页 |
| 3.1.4.1 第一链cDNA的合成 | 第87页 |
| 3.1.4.2 LD-PCR扩增双链cDNA（ds cDNA） | 第87页 |
| 3.1.4.3 CHROMA SPIN+TE-400 Column纯化双链cDNA | 第87-88页 |
| 3.1.4.4 共转化法构建酵母文库及筛选鉴定 | 第88页 |
| 3.2 实验结果 | 第88-98页 |
| 3.2.1 构建诱饵载体和cDNA文库 | 第88-92页 |
| 3.2.2 酵母双杂交文库构建、阳性克隆筛选及鉴定 | 第92-94页 |
| 3.2.3 筛库阳性克隆的验证 | 第94-97页 |
| 3.2.4 USP功能分析初探 | 第97-98页 |
| 3.3 讨论 | 第98-102页 |
| 3.3.1 酵母双杂交筛库系统的基本原理和优缺点 | 第98-99页 |
| 3.3.2 筛库获得阳性克隆的分析 | 第99-102页 |
| 结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-121页 |
| 个人简历 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122页 |
