| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 目录 | 第12-14页 |
| 略语表 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-27页 |
| ·黄瓜花叶病毒概况 | 第15-18页 |
| ·黄瓜花叶病毒的生物学特点 | 第15页 |
| ·黄瓜花叶病毒的病毒结构 | 第15-16页 |
| ·黄瓜花叶病毒的基因组结构及其功能 | 第16-17页 |
| ·黄瓜花叶病毒的变异 | 第17-18页 |
| ·黄瓜花叶病毒26 蛋白研究进展 | 第18-23页 |
| ·亚基因组RNA4A 和26 蛋白的发现 | 第18页 |
| ·2b 蛋白的致病性 | 第18-20页 |
| ·2b 蛋白对病毒在寄主中的移动相关性 | 第20-21页 |
| ·2b 蛋白抑制RNA 沉默的功能研究 | 第21-23页 |
| ·RNA 沉默研究进展 | 第23-25页 |
| ·研究内容与意义 | 第25-27页 |
| ·研究内容 | 第25-26页 |
| ·研究意义 | 第26-27页 |
| 第二章 病毒表达的2b蛋白对系统叶中细胞沉默因子的影响 | 第27-40页 |
| ·材料和方法 | 第28-34页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·酶与试剂 | 第28页 |
| ·体外转录 | 第28-29页 |
| ·重组病毒FRad3526-CMV 与FRad3526Leu -CMV 的侵染性克隆构建 | 第29-30页 |
| ·植物接种 | 第30页 |
| ·病毒粒子提取 | 第30-31页 |
| ·总RNA 提取 | 第31页 |
| ·Northern 杂交 | 第31-32页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第32页 |
| ·荧光定量 PCR | 第32-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-38页 |
| ·质粒的线性化与体外转录结果 | 第34-35页 |
| ·体外转录产物的接种及重组病毒的寄主生物学表型差异 | 第35页 |
| ·FRad35~(2b)-CMV 和FRad35~(2bLeu) -CMV 的子代病毒RNA 积累量的差异 | 第35-36页 |
| ·RT-qPCR 分析接种重组病毒的本生烟16c 系统叶中细胞沉默因子的表达差异 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 26 蛋白的瞬时表达对基因沉默的影响 | 第40-52页 |
| ·材料和方法 | 第40-44页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·农杆菌电转化感受态的制备 | 第40-41页 |
| ·农杆菌的电转化 | 第41页 |
| ·农杆菌的共浸润 | 第41-42页 |
| ·总RNA 提取 | 第42页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第42页 |
| ·荧光定量 PCR | 第42页 |
| ·探针 | 第42页 |
| ·总RNA 电泳 | 第42-43页 |
| ·总RNA 转膜 | 第43页 |
| ·Northern 杂交 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-50页 |
| ·农杆菌中目的基因的鉴定 | 第44页 |
| ·浸润区2b 蛋白的表达对GFP mRNA 的影响 | 第44-48页 |
| ·浸润区2b 蛋白的表达对寄主转录后沉默因子的影响 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 总结和展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录：重要溶液的配制 | 第58-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
