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灰霉菌隐花色素基因(Bccry)及突变体的筛选与表型分析

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
综述 真菌隐花色素研究进展第12-19页
    1 光解酶隐花色素蛋白家族的特性第12-15页
        1.1 隐花色素的结构与特性第12-13页
        1.2 植物隐花色素研究现状第13-15页
    2 真菌的DASH型隐花色素第15-17页
        2.1 DASH型隐花色素的研究第15页
        2.2 真菌隐花色素研究现状第15-17页
    3 本论文研究的目的和意义第17-19页
1. 引言第19-20页
2 材料和方法第20-31页
    2.1 材料第20页
        2.1.1 真菌菌株第20页
        2.1.2 反接种用植物材料第20页
        2.1.3 照射光源第20页
    2.2 方法第20-31页
        2.2.1 完全培养基CM配方第20-21页
        2.2.2 土豆葡萄糖琼脂培养基PDA配方第21页
        2.2.3 灰霉菌基因组DNA提取方法第21页
        2.2.4 灰霉菌RNA提取方法与反转录cDNA第21-22页
        2.2.5 同源重组片段的获得第22页
        2.2.6 聚乙二醇(PEG)介导的原生质体转化法第22-24页
        2.2.7 转化子DNA和RNA水平的鉴定第24-25页
        2.2.8 Southern bolt分析突变体第25-27页
        2.2.9 生长速率测量及菌落形态观察第27页
        2.2.10 菌落生物量分析第27-28页
        2.2.11 菌丝结构与孢子梗形态观察第28页
        2.2.12 孢子产量测量第28页
        2.2.13 孢子萌发率和芽管伸长速率的测量第28页
        2.2.14 反接种实验第28-29页
        2.2.15 孢子侵染结构观察第29页
        2.2.16 相关致病酶类检测方法第29-30页
        2.2.17 DAB染色法对过氧化物ROS进行染色第30页
        2.2.18 紫外耐受性分析实验第30-31页
3 结果与分析第31-58页
    3.1 灰霉菌隐花色素Bccry基因生物信息学与光照响应分析第31-34页
        3.1.1 Bccry基因生物信息学分析第31-32页
        3.1.2 光照时间和光照强度对Bccry表达的影响第32-34页
    3.2 灰霉菌隐花色素Bccry基因敲除及△Bccry突变体的筛选鉴定第34-37页
        3.2.1 同源重组法敲除Bccry基因策略第34-35页
        3.2.2 △Bccry突变体的筛选与鉴定第35-37页
    3.3 灰霉菌隠花色素突变体△Bccry生长发育表型分析第37-49页
        3.3.1 △Bccry突变体菌落形态分析第37-39页
        3.3.2 △Bccry突变体孢子形成比较第39页
        3.3.3 △Bccry突变体菌落生长速率比较第39-41页
        3.3.4 不同光照条件下△Bccry菌落形态比较第41-43页
        3.3.5 不同光照条件下△Bccry菌落生长速率比较第43-45页
        3.3.6 不同光照条件下△Bccry孢子形成比较第45-47页
        3.3.7 不同光照条件下△Bccry孢子萌发与发芽管长度的比较第47-49页
    3.4 灰霉菌隐花色素突变体△Bccry致病性分析第49-55页
        3.4.1 △Bccry突变体在不同果蔬上的致病性第49-51页
        3.4.2 △Bccry突变体在不同光处理下致病性差异第51-52页
        3.4.3 △Bccry侵染结构的变化第52-53页
        3.4.4 △Bccry产生分泌酶类的能力第53页
        3.4.5 △Bccry产生活性氧的能力第53-55页
    3.5 灰霉菌隐花色素突变体△Bccry对紫外光耐受性分析第55-58页
        3.5.1 紫外光对△Bccry菌落生长速率的影响第55页
        3.5.2 紫外光对△Bccry孢子萌发的影响第55-58页
4. 讨论第58-62页
    4.1 灰霉菌隐花色素基因Bccry对光照响应分析第58-59页
    4.2 灰霉菌隐花色素基因Bccry对生长发育的调节作用第59-61页
    4.3 灰霉菌隐花色素基因Bccry对致病性的调节作用第61-62页
结论与展望第62-63页
参考文献第63-69页
致谢第69页

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