| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第9-13页 |
| 1.1 茶树中涩味相关的酚类化合物 | 第9-10页 |
| 1.2 UDP-糖基转移酶研究进展 | 第10-13页 |
| 1.2.1 UDP-糖基转移酶分类和命名 | 第10-11页 |
| 1.2.2 UDP-糖基转移酶底物多样性和特异性 | 第11-13页 |
| 2 引言 | 第13-14页 |
| 2.1 研究意义 | 第13页 |
| 2.2 研究内容 | 第13-14页 |
| 3 材料方法 | 第14-23页 |
| 3.1 实验材料 | 第14页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第14-16页 |
| 3.2.1 主要药品和试剂 | 第14页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第14-15页 |
| 3.2.3 主要试剂的配方 | 第15-16页 |
| 3.3 实验方法 | 第16-23页 |
| 3.3.1 CsUGTs基因的全长克隆 | 第16-18页 |
| 3.3.2 CsUGT基因的原核表达 | 第18-20页 |
| 3.3.3 融合蛋白的纯化 | 第20页 |
| 3.3.4 SDS-PAGE电泳分析 | 第20-21页 |
| 3.3.5 融合蛋白酶活性的检测和产物鉴定 | 第21页 |
| 3.3.6 融合蛋白酶的酶动力学参数检测 | 第21-22页 |
| 3.3.7 HPLC、UPLC-MS/MS及毛细管电泳检测条件 | 第22-23页 |
| 4 结果与分析 | 第23-36页 |
| 4.1 茶树涩味合成相关UGT基因的筛选 | 第23-24页 |
| 4.1.1 茶树UGGT基因的筛选 | 第23页 |
| 4.1.2 茶树黄酮醇3-O-糖基转移酶基因的筛选 | 第23-24页 |
| 4.2 候选UGT基因的全长cDNA克隆与序列分析 | 第24-25页 |
| 4.2.1 候选UGT基因的5’和3’-RACE克隆 | 第24-25页 |
| 4.2.2 候选UGTs基因的全长序列分析及命名 | 第25页 |
| 4.3 UGT基因的进化树分析 | 第25-26页 |
| 4.4 CsUGT78A14和CsUGT78A15同源建模及底物特异性分析 | 第26-29页 |
| 4.5 三条CsUGT基因的原核表达及蛋白纯化 | 第29页 |
| 4.6 重组CsUGTs(rCsUGTs)的酶学分析 | 第29-36页 |
| 4.6.1 rCsUGT84A22融合蛋白酶活检测 | 第29-30页 |
| 4.6.2 rCsUGT84A22酶反应产物鉴定 | 第30-32页 |
| 4.6.3 rCsUGT84A22酶的底物特异性 | 第32-33页 |
| 4.6.4 重组CsUGT78A14(rCsUGT78A14)和重组CsUGT78A15(rCsUGT78A15)酶活检测及产物鉴定 | 第33-34页 |
| 4.6.5 rCsUGT78A14和rCsUGT78A15酶动力学参数测定 | 第34-36页 |
| 5 讨论 | 第36-40页 |
| 5.1 茶树酚类物质的糖基化修饰 | 第36-37页 |
| 5.2 CsUGT84A22是酯型儿茶素合成的关键基因 | 第37-38页 |
| 5.3 CsUGT78A14和CsUGT78A14是茶树中黄酮醇糖苷生物合成的关键基因 | 第38-40页 |
| 6 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 英文缩写及注释 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 个人简介及成果 | 第47页 |
