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禽流感病毒HA和NA各亚型特异性单因子血清制备

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 引言第14-21页
   ·禽流感的流行历史及现状第14-15页
   ·禽流感的公共卫生意义第15-17页
     ·全球流感大流行第15-16页
     ·人感染禽流感第16-17页
   ·禽流感病毒的生物学第17-18页
     ·血凝素(HA)第17-18页
     ·神经氨酸酶(NA)第18页
   ·禽流感病毒鉴定的试验方法第18-19页
     ·琼脂凝胶扩散试验(AGP)第18页
     ·血凝(HA)-血凝抑制(HI)试验第18-19页
     ·神经氨酸酶抑制(NI)试验第19页
   ·禽流感诊断血清的制备方法第19页
   ·本研究的目的和意义第19-21页
第二章 HA 和NA 序列的选择及序列分析第21-24页
   ·材料第21页
     ·序列第21页
   ·方法第21页
     ·HA 和NA 序列分析第21页
   ·结果第21-23页
     ·序列选择及分析第21-23页
     ·序列合成信息第23页
   ·讨论第23-24页
第三章 各亚型HA 基因和NA 基因真核表达重组质粒的构建及体外表达第24-32页
   ·材料第24-25页
     ·菌种与细胞第24页
     ·质粒第24页
     ·酶及相关试剂第24页
     ·培养液第24-25页
     ·HA 及NA 各亚型阳性血清第25页
     ·二抗第25页
   ·方法第25-26页
     ·HA 基因真核表达重组质粒pCAGG-HA和NA基因真核表达重组质粒pCAGG-NA 构建第25-26页
     ·HA基因重组质粒pCAGG-HA和NA基因重组质粒pCAGG-NA的体外表达第26页
   ·结果第26-30页
     ·真核表达重组质粒的鉴定第26-29页
     ·质粒转染293T细胞的间接免疫荧光结果第29-30页
   ·讨论第30-32页
第四章 各亚型HA 单因子血清制备及效果评价第32-42页
   ·材料和方法第32-34页
     ·病毒第32页
     ·真核表达重组质粒第32-33页
     ·SPF鸡及SPF鸡胚第33页
     ·真核表达重组质粒的大量提取及纯化第33页
     ·SPF鸡的免疫方法第33-34页
     ·1%红细胞悬液的制备第34页
     ·HI抗体测定第34页
     ·各亚型HA 灭活抗原的制备第34页
   ·血清效果评估第34页
   ·结果第34-39页
   ·讨论第39-42页
第五章 各亚型NA单因子血清制备及效果评价第42-48页
   ·材料和方法第42-45页
     ·病毒第42页
     ·真核表达重组质粒第42页
     ·SPF鸡及SPF鸡胚第42页
     ·实验试剂第42-43页
     ·溶液配制第43页
     ·真核表达重组质粒的大量提取及纯化第43页
     ·SPF鸡的免疫方法第43页
     ·N1-N9灭活抗原的制备第43-44页
     ·血清效果评估第44-45页
   ·结果第45-46页
     ·全量法NI试验结果第45页
     ·微量法NI试验结果第45-46页
   ·讨论第46-48页
全文结论第48-49页
参考文献第49-55页
致谢第55-56页
作者简历第56页

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