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青霉来源的半纤维素酶基因的克隆与表达

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
第一章 引言第14-29页
   ·半纤维素酶概述第14-15页
   ·木聚糖酶的研究进展第15-22页
     ·木聚糖酶研究概述第15-16页
     ·木聚糖酶的来源第16-17页
     ·木聚糖酶的家族第17-18页
     ·木聚酶的多样性与分子结构区域第18页
     ·木聚糖酶的催化机制第18-20页
     ·木聚糖酶的性质第20页
     ·木聚糖酶的应用第20-21页
     ·青霉来源木聚糖酶基因的克隆与表达第21-22页
   ·β-甘露聚酶的研究进展第22-28页
     ·β-甘露聚糖酶研究概述第22-23页
     ·β-甘露聚糖酶的来源第23-24页
     ·β-甘露聚糖酶的家族第24页
     ·β-甘露聚糖酶的结构及作用方式第24-26页
     ·β-甘露聚糖酶的性质第26-27页
     ·β-甘露聚糖酶的应用第27页
     ·真菌来源的β-甘露聚糖酶基因克隆与表达第27-28页
   ·毕赤酵母表达系统第28页
   ·本研究的目的和意义第28-29页
第二章 真菌Penicillium spp.的半纤维素酶基因的克隆第29-52页
   ·实验材料第29-30页
     ·菌株与质粒第29页
     ·培养基第29页
     ·引物合成第29页
     ·工具酶、试剂盒和生化试剂第29页
     ·主要仪器第29-30页
     ·主要溶液的配制第30页
   ·实验方法第30-39页
     ·Penicillium spp.基因组DNA 的提取第30-31页
     ·糖苷水解酶基因同源克隆简并引物的设计第31页
     ·糖苷水解酶部分序列的克隆第31-33页
     ·糖苷水解酶相关基因全长序列的克隆第33-36页
     ·糖苷水解酶完整基因cDNA 序列的克隆第36-38页
     ·糖苷水解酶cDNA 序列的相似性比较与序列分析第38-39页
   ·实验结果第39-49页
     ·糖苷水解酶部分序列的获得第39页
     ·糖苷水解酶完整基因序列的获得第39页
     ·糖苷水解酶cDNA 序列的克隆第39-40页
     ·5 个糖苷水解酶完整基因的序列分析第40-49页
   ·讨论第49-50页
 本章小结第50-52页
第三章 真菌Penicillium sp. C1 木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达及性质研究第52-65页
   ·实验材料第52-53页
     ·菌株与质粒第52页
     ·培养基第52页
     ·引物合成第52页
     ·试剂盒、工具酶和生化试剂第52页
     ·主要仪器第52-53页
     ·主要溶液的配制第53页
   ·实验方法第53-59页
     ·真核表达载体pPIC9-xyn10C1 的构建第53-54页
     ·木聚糖酶基因xyn10C1 在毕赤酵母中的表达第54-56页
     ·木聚糖酶XYN10C1 的纯化及脱糖基化处理第56-57页
     ·木聚糖酶XYN10C1 的酶学性质测定第57-58页
     ·重组酶XYN10C1 对麦芽汁的水解实验第58-59页
   ·结果与分析第59-63页
     ·pPIC9-xyn10C1 重组表达载体的构建第59页
     ·木聚糖酶基因xyn10C1 在毕赤酵母中的表达第59页
     ·木聚糖酶XYN10C1 的纯化第59-60页
     ·木聚糖酶XYN10C1 的酶学性质分析第60-63页
     ·重组酶XYN10C1 水解麦芽汁过滤速率和粘度的测定第63页
   ·讨论第63-64页
 本章小结第64-65页
第四章 真菌Penicillium sp. C1 与C6 的两个β-甘露糖酶基因的表达及性质研究第65-82页
   ·实验材料第65页
     ·菌株和质粒第65页
     ·培养基的配制第65页
     ·引物合成与序列测序第65页
     ·试剂盒、工具酶和生化试剂第65页
     ·主要仪器第65页
     ·主要溶液的配制第65页
   ·实验方法第65-70页
     ·真核表达载体pPIC9-man5C1 与pPIC9-man5C6 的构第65-67页
     ·β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达第67-68页
     ·β-甘露聚糖酶Man5C1 与ManC6 的纯化第68-69页
     ·β-甘露聚糖酶Man5C1 与Man5C6 的酶学性质测第69-70页
     ·Man5C1 模拟人工胃液条件下降解角豆胶的实验第70页
   ·结果与分析第70-78页
     ·真核表达载体pPIC9-man5C1 与pPIC9-man5C6 的构第70-71页
     ·β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的表达第71页
     ·β-甘露聚糖酶的纯化及脱糖基化第71-72页
     ·β-甘露聚糖酶的酶学性质测定第72-77页
     ·Man5C1 模拟人工胃液条件下降解角豆胶的实验第77-78页
   ·讨论第78-79页
 本章小结第79-82页
第五章 全文结论第82-84页
参考文献第84-91页
致谢第91-92页
作者简历第92页

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