| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1. 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 嗜盐菌 | 第11-15页 |
| 1.1.1 极端微生物 | 第11-12页 |
| 1.1.2 嗜盐菌的分类 | 第12-13页 |
| 1.1.3 嗜盐菌的嗜盐机制 | 第13-14页 |
| 1.1.4 嗜盐菌的应用前景 | 第14-15页 |
| 1.2 中度嗜盐菌 | 第15-23页 |
| 1.2.1 盐单胞菌科系统进化与种群多样性 | 第15-16页 |
| 1.2.2 主要的相容性溶质 | 第16-18页 |
| 1.2.3 四氢嘧啶的生物合成与代谢途径 | 第18-20页 |
| 1.2.4 四氢嘧啶合成基因簇ectABC的克隆鉴定 | 第20页 |
| 1.2.5 四氢嘧啶的工业化生产 | 第20-22页 |
| 1.2.6 四氢嘧啶的实际应用 | 第22-23页 |
| 1.3 青海湖地理特征 | 第23页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第25-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第25页 |
| 2.1.2 主要试剂与酶 | 第25页 |
| 2.1.3 引物 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第26页 |
| 2.1.5 培养基的配置 | 第26页 |
| 2.1.6 常用缓冲液的配置 | 第26-28页 |
| 2.1.7 常用生物信息学分析软件 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-37页 |
| 2.2.1 菌株分离和形态特征观察 | 第28-29页 |
| 2.2.2 生长特性研究 | 第29页 |
| 2.2.3 生理生化特性研究 | 第29页 |
| 2.2.4 基因组DNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.5 16S rDNA的PCR扩增 | 第29-30页 |
| 2.2.6 构建系统发育树 | 第30页 |
| 2.2.7 四氢嘧啶的提取与检测 | 第30页 |
| 2.2.8 二氨基丁酸转氨酶基因的PCR扩增 | 第30-31页 |
| 2.2.9 染色体步移法扩增ectB基因的侧翼序列 | 第31-34页 |
| 2.2.10 四氢嘧啶合成基因簇全序列分析 | 第34页 |
| 2.2.11 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34页 |
| 2.2.12 重组基因的连接 | 第34-35页 |
| 2.2.13 重组质粒的转化 | 第35页 |
| 2.2.14 重组质粒的酶切鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2.15 ectB基因的诱导表达与SDS-PAGE分析 | 第36-37页 |
| 3. 结果与分析 | 第37-55页 |
| 3.1 嗜盐菌QHL1的形态和生理生化鉴定 | 第37-39页 |
| 3.2 嗜盐菌QHL1的16S rDNA分子鉴定 | 第39-41页 |
| 3.3 嗜盐菌QHL1胞内四氢嘧啶的色谱检测 | 第41-43页 |
| 3.4 二氨基丁酸转氨酶基因ectB的克隆表达 | 第43-47页 |
| 3.4.1 ectB基因的克隆 | 第43-46页 |
| 3.4.2 重组EctB蛋白的原核表达及SDS-PAGE分析 | 第46-47页 |
| 3.5 染色体步移法扩增ectB基因的侧翼序列与ectABC全序列分析 | 第47-55页 |
| 3.5.1 染色体步移法扩增ectB基因的上下游序列 | 第47-49页 |
| 3.5.2 四氢嘧啶合成基因簇ectABC全序列分析 | 第49-55页 |
| 4. 讨论 | 第55-58页 |
| 5. 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第65页 |
| 衷心感谢以下基金资助 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
