| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第12-30页 |
| 1.1 细胞色素CYP51研究进展 | 第12-19页 |
| 1.1.1 CYP51研究概况 | 第12页 |
| 1.1.2 CYP51催化功能研究 | 第12-14页 |
| 1.1.3 CYP51序列特性及保守性分析 | 第14-18页 |
| 1.1.4 CYP51晶体结构解析及预测 | 第18-19页 |
| 1.2 真菌耐药性分子机制研究 | 第19-28页 |
| 1.2.1 抗真菌剂研究及作用机理 | 第19-21页 |
| 1.2.2 病原真菌抗药性的产生 | 第21-22页 |
| 1.2.3 CYP51在抗药性中的作用 | 第22-27页 |
| 1.2.4 ABC转运蛋白在抗药性中的作用 | 第27-28页 |
| 1.2.5 其他潜在的抗药性机制 | 第28页 |
| 1.3 选题研究目的、内容及意义 | 第28-30页 |
| 2 实验材料与方法 | 第30-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第30页 |
| 2.1.2 试剂及商品化杀菌剂 | 第30页 |
| 2.1.3 主要仪器和设备 | 第30-31页 |
| 2.1.4 所用培养基 | 第31页 |
| 2.1.5 主要缓冲液配制 | 第31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-37页 |
| 2.2.1 病原真菌分离 | 第31-32页 |
| 2.2.2 菌株敏感性检测 | 第32页 |
| 2.2.3 咪酰胺抗性检测 | 第32-33页 |
| 2.2.4 基因组DNA提取 | 第33页 |
| 2.2.5 RNA提取及RT-PCR | 第33页 |
| 2.2.6 基因启动子序列检测 | 第33-34页 |
| 2.2.7 基因PCR扩增 | 第34-35页 |
| 2.2.8 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第35页 |
| 2.2.9 重组质粒的转化 | 第35-36页 |
| 2.2.10 基因序列分析 | 第36页 |
| 2.2.11 同源模建 | 第36页 |
| 2.2.12 咪酰胺分子对接 | 第36-37页 |
| 3 实验结果与分析 | 第37-49页 |
| 3.1 柑橘青霉菌的分离纯化与抗药性分析 | 第37-39页 |
| 3.1.1 柑橘青霉菌的分离鉴定 | 第37-38页 |
| 3.1.2 指状青霉对咪酰胺的敏感性和EC_(50)分析 | 第38-39页 |
| 3.2 指状青霉抗药性分子机制分析 | 第39-46页 |
| 3.2.1 PdCYP51A/B基因上游序列分析 | 第39-40页 |
| 3.2.2 PdCYP51A/B/C基因序列及系统发育分析 | 第40-44页 |
| 3.2.3 PdCYP51B突变与抗药性关系 | 第44-46页 |
| 3.3 PdCYP51B同源模建与分子对接分析 | 第46-49页 |
| 3.3.1 PdCYP51B同源模建分析 | 第46-47页 |
| 3.3.2 PdCYP51B及突变体与咪酰胺分子对接研究 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
