| 摘要 | 第3-7页 |
| abstract | 第7-11页 |
| 中英文缩略词表 | 第16-18页 |
| 前言 | 第18-20页 |
| 第一部分：GLP-1 对AGEs诱导H9C2心肌细胞凋亡的影响及机制研究 | 第20-46页 |
| 第一节：H9C2心肌细胞体外培养和建立细胞损伤模型 | 第20-31页 |
| 材料与方法 | 第20-27页 |
| 1.实验细胞 | 第20页 |
| 2.主要试剂及耗材 | 第20-22页 |
| 3.主要仪器 | 第22页 |
| 4.主要试剂配制 | 第22-25页 |
| 5.心肌细胞培养 | 第25页 |
| 6.细胞损伤模型的建立 | 第25-26页 |
| 7.标本检测方法 | 第26-27页 |
| 7.1 按Cell Counting Kit -8 比色法检测细胞生存率 | 第26页 |
| 7.2 按LDH Cytotoxicity Kit比色法检测细胞乳酸脱氢酶活性 | 第26-27页 |
| 7.3 Hoechst 33258 核染色法检测心肌细胞凋亡 | 第27页 |
| 8. 统计学方法 | 第27页 |
| 结果 | 第27-31页 |
| 1. 细胞形态学观察 | 第27-28页 |
| 2. AGEs处理后对H9C2心肌细胞生成率的影响 | 第28-29页 |
| 3. AGEs处理后对H9C2心肌细胞LDH的影响 | 第29页 |
| 4. AGEs处理后对H9C2心肌细胞凋亡的影响 | 第29-31页 |
| 第二节：GLP-1 对AGEs诱导心肌细胞凋亡的保护作用及机制研究 | 第31-43页 |
| 材料和方法 | 第31-38页 |
| 1.实验细胞 | 第31页 |
| 2.主要试剂及器材 | 第31页 |
| 3.实验分组 | 第31-32页 |
| 4. 标本检测实验方法 | 第32-38页 |
| 4.1 RT-PCR检测凋亡相关基因Bax，Bcl-2 mRNA的表达 | 第32-35页 |
| 4.2 Western blot测定Bax、Bcl- 2 蛋白表达 | 第35-37页 |
| 4.3 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第37-38页 |
| 4.4 其他实验方法 | 第38页 |
| 结果 | 第38-43页 |
| 1. 细胞形态学观察 | 第38-39页 |
| 2. GLP-1 处理提高H9C2细胞生成率 | 第39页 |
| 3. GLP-1 对H9C2心肌细胞LDH含量释放影响 | 第39-40页 |
| 4. GLP-1 抑制AGEs诱导的H9C2心肌细胞凋亡 | 第40-41页 |
| 5. 运用流式细胞仪检测:GLP-1 减少AGEs诱导的H9C2心肌细胞凋亡 | 第41-42页 |
| 6. GLP-1 对Bax、Bcl-2 mRNA基因的表达的影响 | 第42页 |
| 7. Western blotting检测各组凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2 的水平 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 第二部分：GLP-1 对AGEs诱导H9C2心肌细胞自噬的影响及机制研究 | 第46-59页 |
| 第一节：AGEs对H9C2心肌细胞自噬的影响 | 第46-48页 |
| 材料与方法 | 第46-47页 |
| 1.实验细胞 | 第46页 |
| 2.其他实验器材和步骤 | 第46页 |
| 3.细胞分组 | 第46-47页 |
| 结果 | 第47-48页 |
| 1. Western blotting蛋白印记法检测自噬蛋白LC3B、Beclin1的表达 | 第47-48页 |
| 第二节：GLP-1 抑制AGEs诱导的H9C2心肌细胞自噬及机制研究 | 第48-57页 |
| 材料与方法 | 第49-51页 |
| 1.实验细胞 | 第49页 |
| 2.主要试剂、耗材，主要仪器 | 第49页 |
| 3.分组及给药时间及浓度 | 第49页 |
| 4.标本检测方法 | 第49-51页 |
| 4.1 流式细胞仪检测自噬溶酶体水平 | 第49-50页 |
| 4.2 细胞内ROS水平的测定 | 第50页 |
| 4.3 Ad-Merry-GFP-LC3检测细胞自噬流 | 第50-51页 |
| 4.4 RT-PCR检测凋亡相关基因LC3，Beclin1 mRNA的表达 | 第51页 |
| 结果 | 第51-57页 |
| 1. GLP-1 对AGEs诱导H9C2心肌细胞损伤的影响 | 第51-52页 |
| 1.1 各组细胞形态学特征 | 第51-52页 |
| 1.2 各组细胞生存率检测结果 | 第52页 |
| 2. GLP-1 对AGEs诱导H9C2心肌细胞内ROS产物 | 第52-53页 |
| 3. GLP-1 对AGEs诱导的H9C2心肌细胞自噬 | 第53-55页 |
| 3.1 流式细胞术检测细胞内自噬溶酶体的水平 | 第53页 |
| 3.2 RT-PCR检测mRNA LC3，Beclin1基因的表达 | 第53-54页 |
| 3.3 各组自噬相关蛋白表达检测结果 | 第54-55页 |
| 4. Ad-mcherry-GFP-LC3B检测各组自噬流结果 | 第55-57页 |
| 讨论 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第66-67页 |
| 综述 | 第67-75页 |
| 参考文献 | 第72-75页 |
