| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 本文缩略词对照表 | 第14-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-25页 |
| 1 尼古丁的性质 | 第15-16页 |
| 2 尼古丁的危害 | 第16-17页 |
| 3 微生物降解尼古丁的研究意义 | 第17页 |
| 4 微生物降解尼古丁的研究进展 | 第17-23页 |
| 4.1 吡啶途径 | 第18-19页 |
| 4.2 吡咯途径 | 第19-20页 |
| 4.3 吡啶途径与吡咯途径的"杂合途径" | 第20-21页 |
| 4.4 脱甲基途径 | 第21-23页 |
| 5 本论文的研究内容 | 第23-25页 |
| 第二章 Agrobacterium tumefaciens S33的基因组重测序与转录组数据再分析 | 第25-39页 |
| 1 实验材料与方法 | 第25-28页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第25-26页 |
| 1.2 实验仪器 | 第26页 |
| 1.3 菌株 | 第26页 |
| 1.4 培养基 | 第26页 |
| 1.5 A.tumefaciens S33的完整基因组重新测序 | 第26-27页 |
| 1.6 转录组数据再分析 | 第27页 |
| 1.7 尼古丁降解关键基因的qRT-PCR实验 | 第27-28页 |
| 2 结果与讨论 | 第28-37页 |
| 2.1 基因组重新测序结果分析 | 第28-31页 |
| 2.2 转录组数据再分析 | 第31-35页 |
| 2.3 qRT-PCR实验 | 第35-37页 |
| 3 本章小结 | 第37-39页 |
| 第三章 6-羟基假氧化尼古丁氧化酶Pno的异源表达与功能鉴定 | 第39-51页 |
| 1 实验材料与方法 | 第39-44页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第39-40页 |
| 1.2 实验仪器 | 第40页 |
| 1.3 菌株和质粒 | 第40-41页 |
| 1.4 培养基及缓冲液 | 第41页 |
| 1.5 Pno蛋白的生物信息学分析 | 第41页 |
| 1.6 pETDuet-pno重组质粒的构建 | 第41-42页 |
| 1.7 Pno的异源表达与纯化 | 第42-43页 |
| 1.8 Pno的酶活测定及底物K_m测定 | 第43页 |
| 1.9 Pno催化产物的质谱鉴定 | 第43-44页 |
| 2 结果与讨论 | 第44-50页 |
| 2.1 Pno蛋白的生物信息学分析 | 第44-45页 |
| 2.2 pETDuet-pno重组质粒的构建 | 第45-46页 |
| 2.3 Pno的异源表达与纯化 | 第46-47页 |
| 2.4 Pno酶活、底物K_m测定及反应产物的鉴定 | 第47-50页 |
| 3 本章小结 | 第50-51页 |
| 第四章 尼古丁脱氢酶NdhAB的定位与纯化 | 第51-63页 |
| 1 实验材料与方法 | 第51-54页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第51-52页 |
| 1.2 实验仪器 | 第52页 |
| 1.3 菌株 | 第52页 |
| 1.4 培养基 | 第52页 |
| 1.5 周质空间组分的提取及酶活测定 | 第52-53页 |
| 1.6 周质空间组分中NdhAB的纯化及酶活测定 | 第53页 |
| 1.7 NdhA的N端氨基酸测定及质谱鉴定 | 第53-54页 |
| 2 结果与讨论 | 第54-61页 |
| 2.1 生物信息学分析 | 第54-57页 |
| 2.2 周质空间组分的提取及酶活测定 | 第57-58页 |
| 2.3 周质空间组分中NdhAB的纯化及酶活测定 | 第58-60页 |
| 2.4 NdhA的N端氨基酸测定及质谱鉴定 | 第60-61页 |
| 3 本章小结 | 第61-63页 |
| 第五章 假天青蛋白Paz的异源表达与功能鉴定 | 第63-81页 |
| 1 实验材料与方法 | 第63-69页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第63-64页 |
| 1.2 实验仪器 | 第64页 |
| 1.3 菌株和质粒 | 第64页 |
| 1.4 培养基及缓冲液 | 第64页 |
| 1.5 Paz蛋白的生物信息学分析 | 第64-65页 |
| 1.6 Paz的异源表达、纯化与N端氨基酸序列测序 | 第65-67页 |
| 1.7 NdhAB的酶活及底物K_m测定 | 第67-68页 |
| 1.8 NdhAB催化产物的质谱鉴定 | 第68-69页 |
| 1.9 NdhAB催化反应产物中氧原子来源的测定 | 第69页 |
| 2 结果与讨论 | 第69-78页 |
| 2.1 Paz蛋白的生物信息学分析 | 第69-71页 |
| 2.2 Paz的异源表达、纯化及N端氨基酸测序 | 第71-73页 |
| 2.3 Paz作为电子受体时NdhAB酶活、底物K_m测定及反应产物的鉴定 | 第73-78页 |
| 3 本章小结 | 第78-81页 |
| 结束语 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 在读期间发表和撰写的论文 | 第92-93页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第93页 |
