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海洋丝状真菌石油高效降解菌株的筛选及其酯酶基因克隆

摘要第4-6页
abstract第6-7页
第1章 绪论第10-14页
    1.1 海洋微生物多样性的研究第10-11页
    1.2 海洋微生物分离第11页
    1.3 影响微生物降解活性的因素第11-13页
        1.3.1 接触与吸附能力第12页
        1.3.2 盐度影响第12页
        1.3.3 温度的影响第12-13页
        1.3.4 pH的影响第13页
    1.4 本研究的目的意义第13-14页
第2章 材料与方法第14-19页
    2.0 样品来源第14页
    2.1 培养基第14-15页
        2.1.1 10%石油溶液第14页
        2.1.2 石油降解菌筛选培养基 (g/L)第14页
        2.1.3 马铃薯葡萄糖液体培养基(Potato Dextrose Agar,PDA)第14-15页
    2.2 海洋真菌的分离第15页
    2.3 海洋真菌的鉴定第15-16页
        2.3.1 形态学观察第15页
        2.3.2 分子生物学鉴定第15-16页
    2.4 酯酶基因的克隆第16-17页
        2.4.1 总RNA的提取和cDNA第一条链的合成第16页
        2.4.2 酯酶基因片段的克隆第16-17页
    2.5 酯酶基因的原核表达第17-18页
        2.5.1 重组质粒的构建与鉴定第17-18页
        2.5.2 原核表达第18页
        2.5.3 融合蛋白的纯化第18页
    2.6 脂肪酶活性测定第18-19页
        2.6.1 酶液的提取第18页
        2.6.2 酯酶活性的测定第18-19页
第3章 结果与讨论第19-28页
    3.1 石油降解真菌的分离和鉴定第19-24页
        3.1.1 SH58菌株的鉴定第19-20页
        3.1.2 S21菌株的鉴定第20-21页
        3.1.3 SH4菌株鉴定第21-22页
        3.1.4 CC2菌株鉴定第22-24页
    3.2 赤散囊菌酯酶基因的克隆第24-26页
    3.3 赤散囊菌Erlipase基因的原核表达与酶活分析第26-28页
        3.3.1 重组质粒的双酶切鉴定第26页
        3.3.2 SDS-PAGE凝胶电泳分析第26-27页
        3.3.3 融合蛋白的纯化第27页
        3.3.4 重组融合蛋白的酯酶活性第27-28页
第4章 研究结论第28-29页
参考文献第29-33页
作者简介第33-34页
致谢第34页

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