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根际铜绿假单胞菌M18中GacA对次级代谢、初级代谢、分泌系统及运动性的全局性调控

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第13-26页
    1.1 铜绿假单胞菌第13页
    1.2 假单胞菌的生防机理第13-14页
    1.3 主要次级代谢物的合成途径第14-18页
        1.3.1 吩嗪及其衍生物第14-16页
        1.3.2 藤黄绿菌素合成途径第16-17页
        1.3.3 铁载体第17-18页
    1.4 假单胞菌株 M18 中 PCA 和 Plt 合成的调控第18-19页
    1.5 双元调控系统 GacS/GacA第19-22页
        1.5.1 双元系统简介第19-21页
        1.5.2 GacS/GacA 双元系统组成第21-22页
    1.6 假单胞菌的分泌系统第22-24页
    1.7 假单胞菌转录组研究第24-25页
        1.7.1 转录组概述第24页
        1.7.2 假单胞菌转录组研究进展第24-25页
    1.8 本课题研究目的、内容与意义第25-26页
        1.8.1 研究目的第25页
        1.8.2 研究内容第25页
        1.8.3 研究意义第25-26页
第二章 材料与方法第26-30页
    2.1 培养基第26-27页
    2.2 菌株培养条件第27页
    2.3 DNA 操作技术第27页
    2.4 PCA, Plt 和 PYO 的定量分析第27页
    2.5 感受态细胞的制备第27-28页
    2.6 β-半乳糖苷酶活性的测定第28页
    2.7 qRT-PCR第28页
    2.8 GacA 表达载体的构建及蛋白表达检测第28-30页
第三章 P.aeruginosa M18 中 gacA 对转录组的全局性影响第30-41页
    引言第30页
    3.1 材料方法第30-33页
        3.1.1 菌株,质粒与引物第30-32页
        3.1.2 数据分析第32页
        3.1.3 荧光定量反转录 PCR第32-33页
        3.1.4 质粒构建第33页
        3.1.5 酶活检测第33页
    3.2 结果与讨论第33-40页
        3.2.1 转录组学验证实验第33-36页
        3.2.2 M18 与 M18gacA 转录组总体比较分析第36-37页
        3.2.3 GacA 特异调控基因的 COG 分类第37-39页
        3.2.4 GacA 对转录调控系统或因子的影响第39-40页
    3.3 本章小结第40-41页
第四章 gacA 对次级代谢的调控研究第41-54页
    引言第41页
    4.1 材料与方法第41-43页
        4.1.1 菌株与质粒第41-42页
        4.1.2 PYO, PCA, Plt 产量测定第42页
        4.1.3 铁载体定性检测第42-43页
        4.1.4 氢氰酸定性检测第43页
        4.1.5 gacA 对 Plt 调控机制研究第43页
    4.2 结果与分析第43-52页
        4.2.1 gacA 对 M18 次级代谢的组学分析第43-46页
        4.2.2 gacA 正调控 Plt 合成第46-47页
        4.2.3 gacA 负调控 PCA 合成第47页
        4.2.4 GacA 互补实验第47-48页
        4.2.5 gacA 正调控铁载体合成第48-49页
        4.2.6 gacA 正调控 HCN 合成第49-50页
        4.2.7 gacA 转录水平正调控 pltL第50-51页
        4.2.8 gacA 转录后水平正调控 pltR第51页
        4.2.9 rsmY 对 pltL 和 pltR 的调控研究第51-52页
    4.3 本章小结第52-54页
第五章 gacA 对初级代谢的调控研究第54-60页
    引言第54页
    5.1 材料与方法第54-55页
        5.1.1 菌株与培养条件第54页
        5.1.2 测定 P 元素利用率第54-55页
        5.1.3 测定 S 元素利用率第55页
        5.1.4 测定 N 元素利用率第55页
    5.2 结果与分析第55-58页
        5.2.1 gacA 对 M18 初级代谢的组学分析第55-57页
        5.2.2 gacA 负调控 P 元素利用第57页
        5.2.3 gacA 正调控 N 元素利用第57页
        5.2.4 gacA 负调控 S 元素利用第57-58页
    5.3 本章小结第58-60页
第六章 gacA 对运动性和分泌系统的调控研究第60-69页
    引言第60-61页
    6.1 材料与方法第61-62页
        6.1.1 菌株,质粒与引物第61页
        6.1.2 质粒构建第61-62页
        6.1.3 运动性检测第62页
    6.2 结果第62-67页
        6.2.1 gacA 对分泌系统的组学分析第62-65页
        6.2.2 gacA 对分泌系统的影响第65-66页
        6.2.3 gacA 对 M18 运动性的影响第66-67页
    6.3 本章小结第67-69页
第七章 结论与展望第69-72页
参考文献第72-79页
附录 转录组学研究结果第79-105页
致谢第105-106页
攻读学位期间(待)发表的学术论文第106页

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