| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 縮略词表 | 第15-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-25页 |
| 1.1 研究背景 | 第16页 |
| 1.2 文献综述 | 第16-25页 |
| 1.2.1 植物非生物逆境分子机制研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.1.1 转录因子在抗非生物逆境中的研究 | 第16-18页 |
| 1.2.1.2 转录后调控在抗非生物逆境中的研究进展 | 第18页 |
| 1.2.1.3 小分子RNA在抗非生物逆境中的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2.1.4 表观遗传调控在非生物逆境中的研究进展 | 第19页 |
| 1.2.1.5 功能蛋白在非生物逆境中的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.2.5 HyPRP与植物适应非生物逆境的关系 | 第20-21页 |
| 1.2.6 DREB和jmjC与植物适应非生物逆境的关系 | 第21-23页 |
| 1.2.7 DBB与植物抗旱的关系 | 第23页 |
| 1.2.8 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 HYPRP基因的分离、克隆及功能解析 | 第25-51页 |
| 2.1 引言 | 第25-26页 |
| 2.2 材料与方法 | 第26-34页 |
| 2.2.1 植物材料和逆境处理 | 第26页 |
| 2.2.2 研究所用到的菌株和载体 | 第26页 |
| 2.2.3 SlHyPRP的表达分析及载体构建 | 第26-28页 |
| 2.2.4 番茄的遗传转化 | 第28页 |
| 2.2.5 非生物逆境分析 | 第28-29页 |
| 2.2.6 酵母双杂交 | 第29页 |
| 2.2.7 BiFC分析互作蛋白和基因亚细胞定位 | 第29-30页 |
| 2.2.8 SpHyPRP和SlHyPRP在E coli中的表达和氧化处理 | 第30页 |
| 2.2.9 二氧化硫处理和相关生理指标测定 | 第30-31页 |
| 2.2.10 SpZPR1的转录激活及其顺式作用元件分析 | 第31-34页 |
| 2.2.10.1 SpZPR1在酵母中的转录激活分析 | 第31页 |
| 2.2.10.2 SpZPR1的原核表达和EMSA | 第31-34页 |
| 2.3 结果与分析 | 第34-48页 |
| 2.3.1 HyPRP的克隆及原核表达分析 | 第34-35页 |
| 2.3.2 HyPRP受ABA和一系列非生物逆境的负调控表达 | 第35-36页 |
| 2.3.3 超量表达ApHyPRP使番茄植株对高盐和甘露醇胁迫更敏感 | 第36-38页 |
| 2.3.4 抑制表达HyPRP能提高植株抗高盐和氧化的能力 | 第38-40页 |
| 2.3.5 HyPRP与Msr,SO,Fds,ZPR1和UBQ10蛋白互作 | 第40-45页 |
| 2.3.6 抑制表达HyPRP增强植株抵御二氧化硫毒害的能力 | 第45-46页 |
| 2.3.7 HyPRP互作蛋白基因在SO2处理前后的表达差异 | 第46-48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-51页 |
| 第三章 番茄中两个矮化基因DREB和JMJC功能解析 | 第51-84页 |
| 3.1 引言 | 第51-52页 |
| 3.2 植物材料与方法 | 第52-58页 |
| 3.2.1 植物材料和相关植物生长调节剂处理 | 第52页 |
| 3.2.2 目的基因的生物信息学分析 | 第52-53页 |
| 3.2.3 载体构建和遗传转化 | 第53-54页 |
| 3.2.4 RNA提取和相关基因在转基因番茄和野生型的表达分析 | 第54-55页 |
| 3.2.5 目的基因的亚细胞定位和转录激活实验 | 第55页 |
| 3.2.6 酵母单杂交 | 第55页 |
| 3.2.7 扫描电镜观察叶片厚度和气孔观察 | 第55-56页 |
| 3.2.8 植物内源GA含量的测定 | 第56页 |
| 3.2.9 DNA的亚硫酸氢盐修饰和测序 | 第56-58页 |
| 3.2.10 RNA-seq分析 | 第58页 |
| 3.3 结果与分析 | 第58-80页 |
| 3.3.1 S1DREB基因通过调控GA合成相关基因而导致番茄矮化 | 第58-69页 |
| 3.3.1.1 番茄S1DREB是一个典型的转录因子 | 第58-62页 |
| 3.3.1.2 S1DREB的组织表达谱及对各种激素的响应分析 | 第62-63页 |
| 3.3.1.3 超量表达S1DREB导致番茄植株矮化从而增加抗旱性 | 第63-65页 |
| 3.3.1.4 超量表S1DREB导致赤霉素合成关键基因的表达下降 | 第65-68页 |
| 3.3.1.5 S1DREB的超量表达降低了植株内源GAs的含量 | 第68页 |
| 3.3.1.6 S1DREB与S1CPS上游启动子部位的DRE/CRT顺式元件特异结合 | 第68-69页 |
| 3.3.2 抑制jmjC基因表达导致番茄植株的不敏感矮化 | 第69-72页 |
| 3.3.2.1 SljmjC全长cDNA克隆及序列分析 | 第69-70页 |
| 3.3.2.2 在各种逆境下SpjmjC表达模式分析 | 第70页 |
| 3.3.2.3 SpjmjC在酵母中具有转录激活活性 | 第70-71页 |
| 3.3.2.4 抑制SljmjC表达导致番茄的严重矮化 | 第71-72页 |
| 3.3.3 SljmjC矮化植株的RNA-seq转录组分析 | 第72-76页 |
| 3.3.3.1 RNA-seq测序总量和质量评估 | 第72-73页 |
| 3.3.3.2 RNA-seq差异表达基因的分析 | 第73-75页 |
| 3.3.3.3 qPCR验证RNA-seq测序结果 | 第75-76页 |
| 3.2.4 SljmjC抑制系外源喷施GA下表型不能恢复 | 第76页 |
| 3.2.5 SljmjC抑制系相对野生型而言积累较多的内源GAs | 第76-77页 |
| 3.2.6 抑制SljmjC表达影响DNA甲基化,导致植株GA不敏感矮化 | 第77-80页 |
| 3.2.6.1 SljmjC的抑制表达导致两个类DELLA蛋白的上调表达 | 第77-78页 |
| 3.2.6.2 超量表达基因370导致番茄的矮化 | 第78-79页 |
| 3.2.6.3 抑制SljmjC的表达导致370编码区的甲基化程度降低 | 第79-80页 |
| 3.4 讨论 | 第80-84页 |
| 3.4.1 S1DREB和SljmjC通过分别导致GA敏感和不敏感的矮化 | 第80-83页 |
| 3.4.2 矮化是植物对不利环境的一种适应性状 | 第83-84页 |
| 第四章 抑制DBB基因表达增强番茄的抗旱性 | 第84-99页 |
| 4.1 引言 | 第84-85页 |
| 4.2 材料与方法 | 第85-87页 |
| 4.2.1 植物材料和处理 | 第85页 |
| 4.2.2 基因克隆和载体构建 | 第85-86页 |
| 4.2.3 干旱处理和相关生理指标的测定 | 第86页 |
| 4.2.4 S1DBB和SpDBB基因序列分析和在酵母中转录激活实验 | 第86-87页 |
| 4.2.5 RNA-seq分析 | 第87页 |
| 4.3 结果与分析 | 第87-98页 |
| 4.3.1 SpDBB基因结构及其同源性比较 | 第87-89页 |
| 4.3.2 SpDBB组织表达和在各种逆境下的表达 | 第89-90页 |
| 4.3.3 SpDBB的亚细胞定位和转录激活分析 | 第90-92页 |
| 4.3.4 抑制S1DBB表达显著提高番茄抗旱性,超表达使其更加敏感 | 第92-95页 |
| 4.3.5 RNA-seq结果分析 | 第95-98页 |
| 4.3.5.1 RNA-seq测序总量和质量评估 | 第95页 |
| 4.3.5.2 RNA-seq差异表达基因的分析 | 第95-98页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-118页 |
| 附录 | 第118-129页 |
| 致谢 | 第129页 |
