摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩写词目录 | 第7-10页 |
1 引言 | 第10-17页 |
1.1 研究背景 | 第10页 |
1.2 观赏植物重瓣花的研究进展 | 第10-13页 |
1.2.1 重瓣花的起源方式 | 第11页 |
1.2.2 重瓣花形成的分子机制 | 第11-12页 |
1.2.3 影响重瓣花形成的因素 | 第12-13页 |
1.3 AGAMOUS 基因研究进展 | 第13-15页 |
1.3.1 拟南芥 AGAMOUS 基因 | 第13-14页 |
1.3.2 拟南芥 AGAMOUS 基因与其他花器官发育基因的互作关系 | 第14-15页 |
1.3.3 其他物种 AGAMOUS 基因研究进展 | 第15页 |
1.4 RNA 原位杂交技术简介 | 第15页 |
1.5 研究目的意义 | 第15-17页 |
2 材料与方法 | 第17-32页 |
2.1 试验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第17页 |
2.1.2 菌株及载体 | 第17页 |
2.1.3 主要试剂 | 第17页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第17-18页 |
2.1.5 常用溶液及培养基的配置 | 第18-19页 |
2.2 试验方法 | 第19-32页 |
2.2.1 植物材料培养 | 第19页 |
2.2.2 月季开花观察及花器官数量统计 | 第19页 |
2.2.3 石蜡切片制法 | 第19-20页 |
2.2.4 目的基因的克隆 | 第20-23页 |
2.2.5 RACE 克隆月季 AGAMOUS 基因全长 cDNA | 第23-24页 |
2.2.6 洋葱表皮亚细胞定位 | 第24-26页 |
2.2.7 目的基因转录表达水平检测 | 第26-27页 |
2.2.8 RNA 原位杂交 | 第27-30页 |
2.2.9 病毒诱导的基因沉默(VIGS)载体构建 | 第30-32页 |
3 结果与分析 | 第32-45页 |
3.1 不同温度条件处理下切花月季花朵形态学观察 | 第32-34页 |
3.1.1 不同温度条件处理下切花月季形成畸形花的比例 | 第32-33页 |
3.1.2 不同温度条件处理下切花月季花器官数量统计 | 第33-34页 |
3.2 常温和低温条件下切花月季‘芬得拉’花器官发育进程比较观察 | 第34-37页 |
3.2.1 萼片原基分化期 | 第34页 |
3.2.2 花瓣原基分化期 | 第34页 |
3.2.3 雄蕊原基分化期 | 第34-35页 |
3.2.4 雌蕊原基分化期 | 第35页 |
3.2.5 分化完成期 | 第35-37页 |
3.3 月季 AGAMOUS 基因(RHAG)全长克隆及序列分析 | 第37-40页 |
3.3.1 从月季中分离 RhAG 基因 | 第37-38页 |
3.3.2 RhAG 序列分析 | 第38-40页 |
3.4 RHAG 定位在细胞核内 | 第40-41页 |
3.4.1 亚细胞定位载体构建 | 第40页 |
3.4.2 亚细胞定位 | 第40-41页 |
3.5 不同温度条件下 RHAG 基因在花器官发育各时期的表达量变化 | 第41-42页 |
3.5.1 半定量 RT-PCR 检测 RhAG 基因表达量 | 第41页 |
3.5.2 实时荧光定量 PCR 分析 RhAG 基因表达量 | 第41-42页 |
3.6 RHAG 在切花月季上的表达模式及不同温度条件下的差异 | 第42-44页 |
3.7 月季中沉默 RHAG 基因载体构建 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
4.1 低温与切花月季花瓣过度重瓣化的关系 | 第45页 |
4.2 切花月季 AGAMOUS 基因的结构及序列分析 | 第45-46页 |
4.3 低温引起的切花月季花瓣过度重瓣化与 RHAG 基因的关系 | 第46-47页 |
4.4 病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)沉默 RHAG 基因的载体构建 | 第47-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
附录 | 第54-55页 |
在读期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |