第一章 文献综述 | 第7-43页 |
第一节 EPO 简介 | 第7-35页 |
第二节 新型促红细胞生成素 | 第35-38页 |
第三节 市场前景 | 第38-43页 |
第二章 长效rhEPO 二聚体融合蛋白的构建、表达及生物活性研究 | 第43-97页 |
第一节 前言 | 第43-49页 |
一、EPO 研究历史与现状 | 第43-46页 |
二、本研究的目的、内容和技术路线 | 第46-49页 |
三、本研究的理论意义和实用价值 | 第49页 |
第二节 材料和方法 | 第49-65页 |
一、材料 | 第49-52页 |
二、方法 | 第52-65页 |
(一) rhEPO 二聚体真核表达载体的构建和鉴定 | 第52-58页 |
(二) rhEPO 二聚体融合蛋白在CHO-dhfr-细胞中的表达 | 第58-59页 |
(三) rhEPO 二聚体融合蛋白的纯化 | 第59-63页 |
(四) rhEPO 二聚体融合蛋白的生物活性检测 | 第63-64页 |
(五) rhEPO 二聚体融合蛋白初步药代动力学检测 | 第64-65页 |
第三节 结果 | 第65-88页 |
一、rhEPO 二聚体真核表达载体的构建及鉴定 | 第65-72页 |
(一) 重组质粒 pGEMTE 及 pBT-1c 的鉴定 | 第65-69页 |
(二) 重组质粒 pBT-2s 及 pBT-3c 的鉴定 | 第69-71页 |
(三) 重组质粒 pBT-2se 及 pBT-3ce 的鉴定 | 第71-72页 |
二、rhEPO 二聚体融合蛋白表达细胞株的形态、表达量的鉴定 | 第72-80页 |
(一) 三种表达载体在COS-7 细胞中的瞬时表达 | 第72-73页 |
(二) CHO-dhfr-细胞的稳定转染及高表达细胞株的筛选 | 第73-80页 |
三、rhEPO 二聚体融合蛋白的纯化 | 第80-85页 |
(一) rhEPO 二聚体融合蛋白的纯化 | 第80-82页 |
(二) 纯化的重组蛋白电泳及蛋白质印迹 | 第82-83页 |
(三) 抗EPO 多克隆抗体的制备结果 | 第83-85页 |
四、rhEPO 二聚体融合蛋白的生物活性测定 | 第85-86页 |
(一) 重组蛋白的体外活性结果 | 第85-86页 |
(二) 重组蛋白的体内活性结果 | 第86页 |
五、rhEPO 二聚体融合蛋白的初步药代动力学结果 | 第86-88页 |
第四节 讨论 | 第88-95页 |
第五节 结论 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-105页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第105-106页 |
个人简历 | 第106-107页 |
中文摘要 | 第107-112页 |
Abstract | 第112页 |
致谢 | 第117页 |