| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第13-27页 |
| 1.1 木薯生物学特性及经济价值 | 第13-14页 |
| 1.1.1 木薯的生物学特性及特征 | 第13页 |
| 1.1.2 木薯的主要用途及经济价值 | 第13-14页 |
| 1.2 木薯淀粉品质改良的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 质体分裂的研究进展 | 第15-21页 |
| 1.3.1 关于质体 | 第15-16页 |
| 1.3.2 质体分裂机制 | 第16-17页 |
| 1.3.3 质体分裂相关蛋白的概述 | 第17-19页 |
| 1.3.3.1 Min蛋白 | 第17-18页 |
| 1.3.3.2 ARC(Accumulation and Replication of Chloroplasts)蛋白 | 第18-19页 |
| 1.3.3.3 PDV(PLASTID DI VISION)蛋白 | 第19页 |
| 1.3.4 质体分裂与淀粉品质改良的相关性 | 第19-21页 |
| 1.4 ftsZ基因的研究进展 | 第21-24页 |
| 1.4.1 ftsZ基因的起源 | 第21-22页 |
| 1.4.2 ftsZ基因的序列分析 | 第22-23页 |
| 1.4.3 FtsZ蛋白及其简介 | 第23-24页 |
| 1.4.4 FtsZ蛋白的功能、与其他相关蛋白的互相作用 | 第24页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 1.6 本研究的研究内容与技术路线 | 第25-27页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第25-26页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第26-27页 |
| 2 实验材料与方法 | 第27-41页 |
| 2.1 实验试剂与材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第27页 |
| 2.1.2 植物实验材料 | 第27页 |
| 2.1.3 载体与菌株 | 第27页 |
| 2.1.4 试剂盒与酶 | 第27-28页 |
| 2.1.5 电渗液、培养基及主要试剂 | 第28页 |
| 2.1.6 木薯ftsZ基因及启动子克隆的特异性引物设计 | 第28-29页 |
| 2.2 试验方法 | 第29-41页 |
| 2.2.1 ftsZ基因的克隆与分析 | 第29-34页 |
| 2.2.1.1 木薯总RNA的提取及反转录 | 第29-30页 |
| 2.2.1.2 木薯基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.1.3 ftsZ全长基因以及启动子的获得 | 第31-32页 |
| 2.2.1.4 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第32-33页 |
| 2.2.1.5 阳性重组质粒的筛选和鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.1.6 ftsZ全长基因的序列分析 | 第34页 |
| 2.2.2 木薯块根淀粉积累过程中ftsZ基因的表达分析 | 第34-36页 |
| 2.2.2.1 木薯块根淀粉体的分离 | 第34页 |
| 2.2.2.2 Q-PCR引物的设计 | 第34-35页 |
| 2.2.2.3 木薯块根木质部与叶的总RNA的提取及反转录 | 第35页 |
| 2.2.2.4 引物的特异性验证 | 第35-36页 |
| 2.2.2.5 荧光定量PCR | 第36页 |
| 2.2.3 ftsZ基因的原核表达 | 第36-37页 |
| 2.2.3.1 原核表达载体的构建及重组质粒的鉴定 | 第36页 |
| 2.2.3.2 原核表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达及其条件优化 | 第36-37页 |
| 2.2.3.3 原核表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)中大肠杆菌的显微观察 | 第37页 |
| 2.2.4 ftsZ基因转入拟南芥中的初步的基因功能验证 | 第37-41页 |
| 2.2.4.1 ftsZ基因植物表载体的构建 | 第37-38页 |
| 2.2.4.2 根癌农杆菌(GV3103)感受态细胞的制备及转化 | 第38-39页 |
| 2.2.4.3 拟南芥转化 | 第39-40页 |
| 2.2.4.4 转重组质粒拟南芥的分子鉴定 | 第40-41页 |
| 2.2.4.5 转重组质粒拟南芥的表型观察 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-80页 |
| 3.1 木薯ftsZ基因的克隆及序列分析 | 第41-56页 |
| 3.1.1 木薯总RNA和DNA的提取 | 第41-42页 |
| 3.1.2 MeftsZ1、MeftsZ2、MeftsZ3基因及启动子的克隆 | 第42-43页 |
| 3.1.3 MeftsZ1、MeftsZ2、MeftsZ3基因的序列分析 | 第43-54页 |
| 3.1.3.1 核苷酸序列分析 | 第43-46页 |
| 3.1.3.2 木薯MeftsZ1、MeftsZ2、MeftsZ3基因结构分析 | 第46-47页 |
| 3.1.3.3 ftsZ基因启动子的序列分析 | 第47-54页 |
| 3.1.4 木薯ftsZ基因的进化分析 | 第54-56页 |
| 3.1.4.1 氨基酸序列分析 | 第54-55页 |
| 3.1.4.2 ftsZ基因的进化树 | 第55-56页 |
| 3.2 木薯ftsZ基因的原核表达 | 第56-62页 |
| 3.2.1 原核表达载体的构建与重组质粒的鉴定 | 第56-58页 |
| 3.2.2 MeftsZ1-GFP、MeftsZ2-GFP、MeftsZ3-GFP表达条件的优化及重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第58-60页 |
| 3.2.2.1 MeftsZ1-GFP表达条件的优化 | 第58-59页 |
| 3.2.2.2 MeftsZ1-GFP、MeftsZ2-GFP、MeftsZ3-GFP重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第59-60页 |
| 3.2.3 菌体观察结果 | 第60-61页 |
| 3.2.4 MeftsZ1、MeftsZ2、MeftsZ3基因在大肠杆菌中的表达对宿主细胞生长数量的影响 | 第61-62页 |
| 3.3 木薯ftsZ基因在拟南芥中的功能鉴定 | 第62-67页 |
| 3.3.1 植物过量表达载体的构建 | 第62-64页 |
| 3.3.2 拟南芥的转化及抗性筛选 | 第64-65页 |
| 3.3.3 转pVKH-35S-ftsZ载体拟南芥表型的观察 | 第65-67页 |
| 3.4 木薯块根淀粉积累过程中ftsZ基因的表达分析 | 第67-77页 |
| 3.4.1 PCR特异性引物的检测以及内参基因的选择 | 第67-68页 |
| 3.4.2 MeftsZ1、MeftsZ2、MeftsZ3基因在木薯叶片和块根木质部表达分析 | 第68-69页 |
| 3.4.3 MeftsZ1基因在不同品种木薯叶片的表达分析 | 第69-70页 |
| 3.4.4 MeftsZ1基因在木薯块根木质部中的表达量分析 | 第70-72页 |
| 3.4.5 MeftsZ2基因在木薯叶中的表达量分析 | 第72-73页 |
| 3.4.6 MeftsZ2基因在木薯块根木质部中的表达量分析 | 第73-74页 |
| 3.4.7 MeftsZ3基因在木薯叶中的表达量分析 | 第74-76页 |
| 3.4.8 MeftsZ3基因在木薯块根木质部中的表达量分析 | 第76-77页 |
| 3.5 木薯块根淀粉的粒度分布 | 第77-80页 |
| 3.5.1 不同品种木薯淀粉粒的体积分布 | 第78页 |
| 3.5.2 不同块根发育时期木薯淀粉的体积分布 | 第78-80页 |
| 4 讨论 | 第80-82页 |
| 4.1 关于木薯ftsZ基因序列的讨论 | 第80页 |
| 4.2 关于木薯ftsZ基因原核表达的讨论 | 第80-81页 |
| 4.3 关于木薯ftsZ基因在拟南芥中表达的讨论 | 第81页 |
| 4.4 关于木薯ftsZ基因表达量的分析 | 第81-82页 |
| 5 结论 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
