摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
符号说明(ABBREVIATIONS) | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-40页 |
1.1 蛋白质组学的研究发展 | 第12-13页 |
1.1.1 蛋白质组学的发展历史 | 第12-13页 |
1.1.2 蛋白质组学的主要应用 | 第13页 |
1.2 蛋白质组学研究技术 | 第13-23页 |
1.2.1 二维凝胶电泳 | 第14-16页 |
1.2.2 质谱技术 | 第16-19页 |
1.2.3 蛋白质组学的研究策略 | 第19-23页 |
1.3 链霉菌的蛋白质组学研究 | 第23-29页 |
1.3.1 链霉菌的基础研究 | 第23-24页 |
1.3.2 链霉菌蛋白质组的研究进展 | 第24-29页 |
1.4 本研究的意义和主要内容 | 第29-40页 |
1.4.1 本研究的意义 | 第29-37页 |
1.4.2 本研究的主要内容 | 第37-40页 |
第二章 实验材料与方法 | 第40-66页 |
2.1 实验材料 | 第40-54页 |
2.1.1 实验菌株 | 第40-41页 |
2.1.2 质粒 | 第41-43页 |
2.1.3 引物 | 第43页 |
2.1.4 培养基 | 第43-44页 |
2.1.5 化学试剂和缓冲液 | 第44-54页 |
2.2 实验方法 | 第54-66页 |
2.2.1 天蓝色链霉菌的培养以及菌种保存 | 第54页 |
2.2.2 天蓝色链霉菌膜蛋白的制备 | 第54-56页 |
2.2.3 BNE和hrCNE电泳 | 第56页 |
2.2.4 第二维电泳 | 第56-57页 |
2.2.5 第二维凝胶染色 | 第57-58页 |
2.2.6 质谱鉴定 | 第58页 |
2.2.7 天蓝色链霉菌总DNA的提取 | 第58页 |
2.2.8 大肠杆菌质粒的快检、提取以及酶切 | 第58-59页 |
2.2.9 聚合酶链式反应(PCR) | 第59页 |
2.2.10 DNA片段的回收以及酶切 | 第59-60页 |
2.2.11 大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第60页 |
2.2.12 外源基因的表达与纯化 | 第60-61页 |
2.2.13 His和GST Pull Down | 第61-62页 |
2.2.14 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第62页 |
2.2.15 凝胶过滤层析(分子筛) | 第62-63页 |
2.2.16 等温滴定量热法(ITC) | 第63页 |
2.2.17 蛋白质杂交 | 第63页 |
2.2.18 生物信息学分析及常用软件 | 第63-66页 |
第三章 天蓝色链霉菌膜蛋白复合物的研究 | 第66-92页 |
3.1 引言 | 第66-67页 |
3.2 结果与分析 | 第67-89页 |
3.2.1 天蓝色链霉菌膜蛋白的制备 | 第67-69页 |
3.2.2 BNE和hrCNE电泳上样量的优化 | 第69-70页 |
3.2.3 2D hrCNE/hrCNE电泳结果 | 第70-77页 |
3.2.4 2D native/SDS-PAGE电泳结果 | 第77-87页 |
3.2.5 天蓝色链霉菌M600和ΔbldA突变株的比较 | 第87-89页 |
3.3 结论 | 第89页 |
3.4 讨论 | 第89-92页 |
第四章 天蓝色链霉菌部分脂蛋白的功能分析 | 第92-108页 |
4.1 引言 | 第92-93页 |
4.2 结果与分析 | 第93-104页 |
4.2.1 重组载体的克隆 | 第93-95页 |
4.2.2 重组蛋白的表达与纯化 | 第95-96页 |
4.2.3 蛋白质相互作用研究 | 第96-97页 |
4.2.4 重组蛋白的基本性质 | 第97-99页 |
4.2.5 蛋白质序列比对 | 第99-101页 |
4.2.6 功能分析 | 第101-104页 |
4.3 结论 | 第104页 |
4.4 讨论 | 第104-108页 |
第五章 放线紫红素生物合成基因簇相关蛋白质的克隆、表达与纯化 | 第108-118页 |
5.1 引言 | 第108-111页 |
5.2 结果与分析 | 第111-117页 |
5.2.1 克隆策略 | 第111-113页 |
5.2.2 融合蛋白的表达与纯化 | 第113-117页 |
5.2.3 重组蛋白的纯化 | 第117页 |
5.2.4 抗体制备 | 第117页 |
5.3 结论 | 第117页 |
5.4 讨论 | 第117-118页 |
第六章 总结和展望 | 第118-120页 |
6.1 工作总结 | 第118-119页 |
6.2 课题展望 | 第119-120页 |
参考文献 | 第120-136页 |
致谢 | 第136-138页 |
攻读学位期间发表或已录用的学术论文 | 第138-140页 |
附录 | 第140-151页 |