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天蓝色链霉菌膜蛋白复合物及部分脂蛋白功能的研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
符号说明(ABBREVIATIONS)第10-12页
第一章 文献综述第12-40页
    1.1 蛋白质组学的研究发展第12-13页
        1.1.1 蛋白质组学的发展历史第12-13页
        1.1.2 蛋白质组学的主要应用第13页
    1.2 蛋白质组学研究技术第13-23页
        1.2.1 二维凝胶电泳第14-16页
        1.2.2 质谱技术第16-19页
        1.2.3 蛋白质组学的研究策略第19-23页
    1.3 链霉菌的蛋白质组学研究第23-29页
        1.3.1 链霉菌的基础研究第23-24页
        1.3.2 链霉菌蛋白质组的研究进展第24-29页
    1.4 本研究的意义和主要内容第29-40页
        1.4.1 本研究的意义第29-37页
        1.4.2 本研究的主要内容第37-40页
第二章 实验材料与方法第40-66页
    2.1 实验材料第40-54页
        2.1.1 实验菌株第40-41页
        2.1.2 质粒第41-43页
        2.1.3 引物第43页
        2.1.4 培养基第43-44页
        2.1.5 化学试剂和缓冲液第44-54页
    2.2 实验方法第54-66页
        2.2.1 天蓝色链霉菌的培养以及菌种保存第54页
        2.2.2 天蓝色链霉菌膜蛋白的制备第54-56页
        2.2.3 BNE和hrCNE电泳第56页
        2.2.4 第二维电泳第56-57页
        2.2.5 第二维凝胶染色第57-58页
        2.2.6 质谱鉴定第58页
        2.2.7 天蓝色链霉菌总DNA的提取第58页
        2.2.8 大肠杆菌质粒的快检、提取以及酶切第58-59页
        2.2.9 聚合酶链式反应(PCR)第59页
        2.2.10 DNA片段的回收以及酶切第59-60页
        2.2.11 大肠杆菌感受态的制备及转化第60页
        2.2.12 外源基因的表达与纯化第60-61页
        2.2.13 His和GST Pull Down第61-62页
        2.2.14 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第62页
        2.2.15 凝胶过滤层析(分子筛)第62-63页
        2.2.16 等温滴定量热法(ITC)第63页
        2.2.17 蛋白质杂交第63页
        2.2.18 生物信息学分析及常用软件第63-66页
第三章 天蓝色链霉菌膜蛋白复合物的研究第66-92页
    3.1 引言第66-67页
    3.2 结果与分析第67-89页
        3.2.1 天蓝色链霉菌膜蛋白的制备第67-69页
        3.2.2 BNE和hrCNE电泳上样量的优化第69-70页
        3.2.3 2D hrCNE/hrCNE电泳结果第70-77页
        3.2.4 2D native/SDS-PAGE电泳结果第77-87页
        3.2.5 天蓝色链霉菌M600和ΔbldA突变株的比较第87-89页
    3.3 结论第89页
    3.4 讨论第89-92页
第四章 天蓝色链霉菌部分脂蛋白的功能分析第92-108页
    4.1 引言第92-93页
    4.2 结果与分析第93-104页
        4.2.1 重组载体的克隆第93-95页
        4.2.2 重组蛋白的表达与纯化第95-96页
        4.2.3 蛋白质相互作用研究第96-97页
        4.2.4 重组蛋白的基本性质第97-99页
        4.2.5 蛋白质序列比对第99-101页
        4.2.6 功能分析第101-104页
    4.3 结论第104页
    4.4 讨论第104-108页
第五章 放线紫红素生物合成基因簇相关蛋白质的克隆、表达与纯化第108-118页
    5.1 引言第108-111页
    5.2 结果与分析第111-117页
        5.2.1 克隆策略第111-113页
        5.2.2 融合蛋白的表达与纯化第113-117页
        5.2.3 重组蛋白的纯化第117页
        5.2.4 抗体制备第117页
    5.3 结论第117页
    5.4 讨论第117-118页
第六章 总结和展望第118-120页
    6.1 工作总结第118-119页
    6.2 课题展望第119-120页
参考文献第120-136页
致谢第136-138页
攻读学位期间发表或已录用的学术论文第138-140页
附录第140-151页

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