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两种旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂对巨噬细胞免疫功能的影响

摘要第8-10页
英文摘要第10-11页
1 引言第12-25页
    1.1 旋毛虫第12-13页
        1.1.1 旋毛虫的发现及生活史第12页
        1.1.2 旋毛虫的抗原第12-13页
    1.2 丝氨酸蛋白酶抑制剂概况第13-17页
        1.2.1 丝氨酸蛋白酶抑制剂的结构第14-15页
        1.2.2 丝氨酸蛋白酶抑制剂的功能第15页
        1.2.3 丝氨酸蛋白酶抑制剂的分类第15-17页
    1.3 寄生虫丝氨酸蛋白酶抑制剂的作用及研究现状第17-21页
        1.3.1 线虫第17-20页
        1.3.2 吸虫第20页
        1.3.3 绦虫第20页
        1.3.4 其他虫源第20-21页
    1.4 巨噬细胞在寄生虫感染过程中的作用第21-23页
        1.4.1 巨噬细胞种类多样性及其生物学特征第21-22页
        1.4.2 巨噬细胞在蠕虫寄生过程中的作用第22-23页
    1.5 研究的目的意义第23-25页
2 材料与方法第25-39页
    2.1 材料第25-28页
        2.1.1 主要菌株、细胞株第25页
        2.1.2 主要工具酶与试剂第25页
        2.1.3 主要试剂的配置第25-27页
        2.1.4 主要仪器设备第27-28页
        2.1.5 主要应用软件第28页
    2.2 方法第28-39页
        2.2.1 蛋白的诱导表达及其纯化第28-29页
        2.2.2 小鼠巨噬细胞的复苏与培养第29-30页
        2.2.3 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10、TGF-β和Gapdh荧光定量方法的建立第30-35页
        2.2.4 两种重组蛋白对J774A.1 小鼠巨噬细胞增值活力的影响第35页
        2.2.5 重组蛋白处理细胞和实验分组第35-36页
        2.2.6 SYBR Green I实时荧光定量PCR测定对炎性细胞因子mRNA表达的影响第36页
        2.2.7 ELISA测定重组蛋白对巨噬细胞炎性细胞因子分泌情况的影响第36页
        2.2.8 Western blot检测重组蛋白对巨噬细胞JAK2/STAT3磷酸化水平的影响第36-38页
        2.2.9 实验数据分析和统计第38-39页
3 结果第39-56页
    3.1 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12、TGF-β和Gapdh荧光定量方法的建立第39-45页
        3.1.1 标准品质粒的构建第39-40页
        3.1.2 荧光定量PCR方法的建立第40-45页
    3.2 TsAd SPI重组蛋白的表达及纯化第45页
    3.3 TsAd SPI重组蛋白对J774A.1 小鼠巨噬细胞增值活力的影响第45-46页
    3.4 实时荧光定量PCR检测结果第46-48页
        3.4.1 总RNA提取及反转录结果第46页
        3.4.2 TsAd SPI对促炎性细胞因子mRNA表达水平的作用第46-47页
        3.4.3 TsAd SPI对抗炎性细胞因子mRNA表达水平的作用第47-48页
    3.5 ELISA分析TsAd SPI作用的细胞上清中细胞因子的表达水平第48-49页
    3.6 Western blot检测TsAd SPI对JAK2/STAT3信号通路的影响第49-50页
    3.7 TsKa SPI重组蛋白的表达及纯化第50-51页
    3.8 TsKa SPI重组蛋白对J774A.1 小鼠巨噬细胞增值活力的影响第51-52页
    3.9 实时荧光定量PCR检测结果第52-53页
        3.9.1 总RNA提取及反转录结果第52页
        3.9.2 TsKa SPI对促炎性细胞因子mRNA表达水平的作用第52-53页
        3.9.3 TsKa SPI对抗炎性细胞因子mRNA表达水平的作用第53页
    3.10 ELISA分析TsKa SPI作用的细胞上清中细胞因子的表达水平第53-54页
    3.11 Western blot检测TsKa SPI对JAK2/STAT3信号通路的影响第54-56页
4 讨论第56-59页
    4.1 TsAd SPI和TsKa SPI对巨噬细胞炎性细胞因子的调控作用第56-57页
    4.2 TsAd SPI和TsKa SPI刺激JAK2/STAT3信号通路的影响第57页
    4.3 本实验的创新之处第57-59页
5 结论第59-60页
致谢第60-61页
参考文献第61-67页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第67页

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