| 摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第13-18页 |
| 1.1 研究的目的与意义 | 第13页 |
| 1.2 水稻谷氨酰胺合成酶基因研究概况 | 第13-17页 |
| 1.2.1 谷氨酰胺合成酶的结构与种类 | 第13-14页 |
| 1.2.2 谷氨酰胺合成酶的功能 | 第14页 |
| 1.2.3 GS基因分子生物学研究现状 | 第14-15页 |
| 1.2.4 高等植物启动子的研究 | 第15-16页 |
| 1.2.5 植物GS基因启动子的特性 | 第16-17页 |
| 1.3 研究内容 | 第17-18页 |
| 1.3.1 水稻品质性状分析 | 第17页 |
| 1.3.2 灌浆不同时期水稻GS基因表达量及酶活性分析 | 第17页 |
| 1.3.3 水稻GS启动子结构变异分析 | 第17页 |
| 1.3.4 水稻GS启动子结构与转录表达量关系分析 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第18页 |
| 2.2 取样方法 | 第18页 |
| 2.3 品质性状测定方法 | 第18-20页 |
| 2.3.1 籽粒直链淀粉含量测定方法 | 第18-19页 |
| 2.3.2 籽粒总淀粉含量测定方法 | 第19页 |
| 2.3.3 籽粒支链淀粉含量测定方法 | 第19页 |
| 2.3.4 籽粒蛋白质含量测定方法 | 第19-20页 |
| 2.3.5 稻米粘特性（RVA谱）测定方法 | 第20页 |
| 2.4 谷氨酰胺合成酶活性测定方法 | 第20-21页 |
| 2.5 谷氨酰胺合成酶同工型基因表达量测定 | 第21-24页 |
| 2.5.1 试剂 | 第21页 |
| 2.5.2 引物设计 | 第21-22页 |
| 2.5.3 籽粒及叶片RNA提取 | 第22页 |
| 2.5.4 RNA纯化 | 第22-23页 |
| 2.5.5 反转录 | 第23页 |
| 2.5.6 qRT-PCR扩增 | 第23页 |
| 2.5.7 qRT-PCR数据处理 | 第23-24页 |
| 2.6 谷氨酰胺合成酶基因启动子克隆及序列测定 | 第24-29页 |
| 2.6.1 质粒、菌株及试剂 | 第24页 |
| 2.6.2 培养基 | 第24页 |
| 2.6.3 pQB-V3载体图 | 第24-25页 |
| 2.6.4 引物 | 第25页 |
| 2.6.5 基因组DNA提取 | 第25-26页 |
| 2.6.6 启动子PCR扩增 | 第26页 |
| 2.6.7 Eco R V酶切p QB-V3质粒 | 第26-27页 |
| 2.6.8 Os GS扩增产物和p QB-V3条带纯化 | 第27页 |
| 2.6.9 目的片段连入p QB-V3载体 | 第27-28页 |
| 2.6.10 质粒DNA转化大肠杆菌 | 第28页 |
| 2.6.11 重组质粒菌落PCR鉴定 | 第28-29页 |
| 2.6.12 克隆片段的序列分析 | 第29页 |
| 2.7 数据分析 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-48页 |
| 3.1 灌浆不同时期供试材料间籽粒蛋白质含量比较 | 第30页 |
| 3.2 灌浆不同时期供试材料间籽粒淀粉组份含量比较 | 第30-31页 |
| 3.3 供试材料间稻米RVA谱特性和食味值比较 | 第31-32页 |
| 3.4 蛋白质含量与淀粉组份含量和稻米RVA谱特性间相关分析 | 第32-33页 |
| 3.5 灌浆不同时期供试材料间叶片和籽粒谷氨酰胺合成酶活性比较 | 第33-34页 |
| 3.6 灌浆不同时期供试材料间叶片和籽粒OSGS同工型基因表达量比较 | 第34-36页 |
| 3.6.1 RNA提取、检测及反转录 | 第34-35页 |
| 3.6.2 灌浆不同时期供试材料间叶片和籽粒谷氨酰胺合成酶同工型基因表达量比较 | 第35-36页 |
| 3.7 灌浆不同时期籽粒及叶片谷氨酰胺合成酶活性与蛋白质含量间相关分析 | 第36-37页 |
| 3.8 灌浆不同时期谷氨酰胺合成酶同工型基因表达量与籽粒蛋白质含量间相关分析 | 第37-38页 |
| 3.9 灌浆不同时期谷氨酰胺合成酶同工型基因表达量与GS活性间相关分析 | 第38-40页 |
| 3.10 OSGS同工型基因启动子克隆及测序 | 第40-42页 |
| 3.10.1 基因组DNA提取及检测 | 第40页 |
| 3.10.2 OsGS基因启动子克隆及测序 | 第40-41页 |
| 3.10.3 质粒提取 | 第41页 |
| 3.10.4 Eco RV酶切后pQB-V3质粒 | 第41-42页 |
| 3.11 供试材料间OSGS同工型基因启动子序列长度比较 | 第42页 |
| 3.12 供试材料间OSGS同工型基因启动子序列比较 | 第42-44页 |
| 3.13 OSGS同工型基因间启动子结构比较 | 第44-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| 4.1 关于籽粒蛋白质含量与蒸煮食味品质性状关系 | 第48页 |
| 4.2 关于谷氨酰胺合成酶活性与蛋白质含量关系 | 第48-49页 |
| 4.3 关于谷氨酰胺合成酶基因表达量与酶活性和蛋白质含量关系 | 第49-50页 |
| 4.4 关于OSGS同工型基因启动子序列变异与表达量关系 | 第50页 |
| 4.5 关于OSGS同工型基因启动子调控元件与表达量关系 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 | 第60-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第71页 |
