| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第15-28页 |
| 1.1 铅 | 第15-16页 |
| 1.1.1 铅的理化性质 | 第15页 |
| 1.1.2 铅污染状况 | 第15页 |
| 1.1.3 铅肾脏毒性研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2 细胞自噬 | 第16-23页 |
| 1.2.1 细胞自噬研究的发展历史 | 第17页 |
| 1.2.2 细胞自噬相关基因 | 第17-18页 |
| 1.2.3 自噬小体数量的检测 | 第18-21页 |
| 1.2.4 自噬流的检测 | 第21-23页 |
| 1.3 溶酶体与细胞凋亡 | 第23-26页 |
| 1.3.1 溶酶体与溶酶体膜通透化 | 第23-24页 |
| 1.3.2 溶酶体膜通透化的检测 | 第24-25页 |
| 1.3.3 溶酶体膜通透化与细胞凋亡 | 第25-26页 |
| 1.4 自噬抑制与细胞凋亡 | 第26-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.2 主要试剂 | 第28-29页 |
| 2.3 主要仪器 | 第29-30页 |
| 2.4 相关实验试剂的配制 | 第30-33页 |
| 2.4.1 磷酸盐缓冲液的配方 | 第30页 |
| 2.4.2 DMEM-F12细胞培养基的配制与除菌 | 第30页 |
| 2.4.3 血清灭活 | 第30页 |
| 2.4.4 硝酸铅的配制 | 第30-31页 |
| 2.4.5 3-MA的配制 | 第31页 |
| 2.4.6 CQ的配制 | 第31页 |
| 2.4.7 TG的配制 | 第31页 |
| 2.4.8 AO的配制 | 第31页 |
| 2.4.9 LTR的配制 | 第31页 |
| 2.4.10 DQ-BSA-Green的配制 | 第31页 |
| 2.4.11 CA 074 的配制 | 第31-32页 |
| 2.4.12 Pep A的配制 | 第32页 |
| 2.4.13 10×Western Blot蛋白质电泳缓冲液的配制 | 第32页 |
| 2.4.14 10×Western Blot蛋白质转膜缓冲液的配制 | 第32页 |
| 2.4.15 10×TBS溶液的配制 | 第32页 |
| 2.4.16 1×TBST工作液的配制 | 第32页 |
| 2.4.17 30 %丙烯酰胺的配制 | 第32页 |
| 2.4.18 10%SDS的配制 | 第32-33页 |
| 2.4.19 10%过硫酸铵(APS)的配制 | 第33页 |
| 2.4.20 Western Blot 5 %脱脂奶粉封闭液的配制 | 第33页 |
| 2.4.21 鼠尾胶原制备 | 第33页 |
| 2.5 试验方法 | 第33-42页 |
| 2.5.1 SD大鼠肾小管上皮细胞原代培养及传代培养 | 第33页 |
| 2.5.2 实验分组 | 第33-34页 |
| 2.5.3 Western Blot样品制备、电泳及显影 | 第34-37页 |
| 2.5.4 GFP-LC3和RFP-GFP-LC3质粒的瞬时转染 | 第37-38页 |
| 2.5.5 共聚焦技术检测自噬小体与溶酶体的融合 | 第38-39页 |
| 2.5.6 免疫荧光检测CTSB和CTSD亚细胞定位情况 | 第39页 |
| 2.5.7 吖啶橙（AO）染色 | 第39页 |
| 2.5.8 Lyso-Tracker Red染色 | 第39-40页 |
| 2.5.9 检测溶酶体降解能力 | 第40页 |
| 2.5.10 检测细胞凋亡 | 第40-41页 |
| 2.5.11 统计学分析 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-60页 |
| 3.1 铅暴露对自噬标志蛋白LC3-II表达的影响 | 第42-44页 |
| 3.2 铅对大鼠肾小管上皮细胞自噬流的影响 | 第44-47页 |
| 3.3 铅对自噬小体与溶酶体融合的影响 | 第47-48页 |
| 3.4 铅暴露对溶酶体pH的影响 | 第48-50页 |
| 3.5 铅对3种溶酶体V-ATPases表达水平的影响 | 第50-52页 |
| 3.6 铅对溶酶体降解功能的影响 | 第52-53页 |
| 3.7 铅对溶酶体膜通透化的影响 | 第53-55页 |
| 3.8 铅所致组织蛋白酶B释放对细胞凋亡的影响 | 第55-57页 |
| 3.9 铅所致组织蛋白酶D释放对细胞凋亡的影响 | 第57-60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| 4.1 铅抑制大鼠肾小管上皮细胞自噬流 | 第60页 |
| 4.2 铅促进大鼠肾小管上皮细胞自噬小体与溶酶体融合 | 第60-61页 |
| 4.3 铅损伤大鼠肾小管上皮细胞溶酶体功能 | 第61页 |
| 4.4 铅可引起大鼠肾小管上皮细胞溶酶体膜通透化 | 第61-62页 |
| 4.5 铅所致大鼠肾小管上皮细胞溶酶体膜通透化诱发细胞凋亡 | 第62-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 在读硕士期间取得的主要学术成就 | 第76页 |
