符号说明 | 第4-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 前言 | 第10-23页 |
1.1 猪流感病毒概况 | 第10-15页 |
1.2 H1N1亚型猪流感病毒研究进展 | 第15-18页 |
1.3 脂质体疫苗概述 | 第18-21页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-38页 |
2.1 材料 | 第23-25页 |
2.1.1 引物 | 第23页 |
2.1.2 试剂与耗材 | 第23页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第23-24页 |
2.1.4 相关溶液的配制 | 第24-25页 |
2.2 方法 | 第25-38页 |
2.2.1 样品采集 | 第25-26页 |
2.2.2 猪流感病毒的分离 | 第26页 |
2.2.3 猪流感病毒的鉴定 | 第26页 |
2.2.4 基因进化分析 | 第26-27页 |
2.2.5 小鼠致病性试验 | 第27-29页 |
2.2.6 HA1蛋白的表达 | 第29-33页 |
2.2.7 HA1蛋白的纯化及浓度测定 | 第33-34页 |
2.2.8 Western-blot鉴定 | 第34-35页 |
2.2.9 脂质体疫苗制备及其性质考察 | 第35-36页 |
2.2.10 小鼠模型的建立 | 第36-37页 |
2.2.11 数据处理 | 第37-38页 |
3 实验结果 | 第38-55页 |
3.1 SIV分离鉴定结果 | 第38-39页 |
3.2 基因进化分析结果 | 第39-46页 |
3.2.1 同源性分析结果 | 第39页 |
3.2.2 HA片段分析结果 | 第39-40页 |
3.2.3 NA、M片段分析结果 | 第40页 |
3.2.4 NS、NP、PB1、PB2、PA片段分析结果 | 第40-46页 |
3.3 小鼠致病性分析结果 | 第46-47页 |
3.3.1 小鼠的临床症、体重变化和致死率 | 第46页 |
3.3.2 Real-time PCR方法建立结果 | 第46-47页 |
3.3.3 小鼠脏器的病毒载量 | 第47页 |
3.3.4 小鼠肺脏病理变化 | 第47页 |
3.4 HA1蛋白的表达结果 | 第47-50页 |
3.4.1 HA1-PET-28a质粒的构建结果 | 第47-48页 |
3.4.2 HA1蛋白的诱导表达结果 | 第48-49页 |
3.4.3 HA1蛋白纯化结果 | 第49-50页 |
3.4.4 蛋白浓度测定结果 | 第50页 |
3.5 脂质体疫苗的制备结果 | 第50-52页 |
3.5.1 粒径检测结果 | 第50-51页 |
3.5.2 电镜检测结果 | 第51页 |
3.5.3 包封率测定结果 | 第51页 |
3.5.4 疫苗质量检验结果 | 第51-52页 |
3.6 小鼠模型建立结果 | 第52-55页 |
3.6.1 中和抗体检测结果 | 第52页 |
3.6.2 小鼠肺脏病毒含量的测定结果 | 第52-53页 |
3.6.3 小鼠肺脏病理学观察 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
硕士期间已发表文章 | 第67页 |