| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 植物的免疫反应及其作用机理 | 第12页 |
| 1.2 植物对非生物胁迫的反应 | 第12-13页 |
| 1.2.1 氮素与植物病害的关系 | 第13页 |
| 1.2.2 植物体内的氮与植物抗病性的关系 | 第13页 |
| 1.3 miRNAS在植物应对生物和非生物胁迫中的作用 | 第13-16页 |
| 1.3.1 miRNA的生物合成过程 | 第14页 |
| 1.3.2 miRNA的作用方式及功能 | 第14页 |
| 1.3.3 miRNA在植物抗逆境胁迫中的基因调控功能 | 第14-16页 |
| 1.4 水稻对低氮胁迫和XOO侵染的反应 | 第16-17页 |
| 1.5 水稻中XOO侵染及低氮胁迫应答的miRNAS因子 | 第17页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 1.7 技术路线 | 第18-19页 |
| 第二章 构建白叶枯病菌侵染和低氮胁迫应答的miRNAs的水稻过表达植株 | 第19-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 所用植物与菌株 | 第19-20页 |
| 2.1.2 培养条件 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂和仪器 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-25页 |
| 2.2.1 日本晴水稻培养 | 第20页 |
| 2.2.2 目的miRNA前体的扩增 | 第20-22页 |
| 2.2.3 miRNA过表达双元载体的构建 | 第22-25页 |
| 2.2.4 miRNA过表达转基因水稻植株的产生 | 第25页 |
| 2.2.5 T0代转基因植株的种植 | 第25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-28页 |
| 2.3.1 基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.3.2 pre-miRNA基因的扩增 | 第26页 |
| 2.3.3 miRNA过表达双元载体的构建 | 第26-28页 |
| 2.3.4 miRNA过表达转基因水稻植株的产生 | 第28页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 miRNA过表达转基因水稻的分子检测 | 第30-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 所用植物 | 第30页 |
| 3.1.2 水稻培养液 | 第30页 |
| 3.1.3 主要试剂和仪器 | 第30-31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-33页 |
| 3.2.0 T0代转基因水稻的培养 | 第31页 |
| 3.2.1 转基因水稻植株的检测与筛选 | 第31页 |
| 3.2.2 T1代转基因水稻的培养 | 第31-32页 |
| 3.2.3 总RNA的提取 | 第32页 |
| 3.2.4 miRNA的反转录 | 第32-33页 |
| 3.2.5 转基因水稻中miRNA表达量的检测 | 第33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-37页 |
| 3.3.1 T0代转基因水稻检测与筛选 | 第33-34页 |
| 3.3.2 T0代转基因水稻目的miRNA表达量的测定 | 第34-35页 |
| 3.3.3 T1代转基因水稻的潮霉素抗性检测 | 第35-36页 |
| 3.3.4 T1代转基因水稻目的miRNA表达量的测定 | 第36-37页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 miRNA过表达转基因水稻的表型检测 | 第38-49页 |
| 4.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 4.1.1 供试植物与菌株 | 第38页 |
| 4.1.2 培养条件 | 第38页 |
| 4.1.3 水稻培养液 | 第38页 |
| 4.1.4 主要试剂和仪器 | 第38-39页 |
| 4.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 4.2.1 转基因水稻的培养 | 第39页 |
| 4.2.2 转基因水稻株高的测定 | 第39页 |
| 4.2.3 转基因水稻根长度的测定及根形态的变化 | 第39页 |
| 4.2.4 不同氮素条件下转基因水稻生物量的测定 | 第39页 |
| 4.2.5 细菌病原物接种 | 第39-40页 |
| 4.2.6 转基因水稻的抗病性测定 | 第40页 |
| 4.3 结果与分析 | 第40-46页 |
| 4.3.1 转基因水稻的株高 | 第40-41页 |
| 4.3.2 转基因水稻根长度 | 第41-42页 |
| 4.3.3 转基因水稻根形态变化 | 第42-44页 |
| 4.3.4 转基因水稻生物量变化 | 第44-45页 |
| 4.3.5 转基因水稻抗病性变化 | 第45-46页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第46-49页 |
| 第五章 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59页 |
