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京海黄鸡腿肌全基因组甲基化和转录组分析研究

中文摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
符号说明第12-13页
第一章 文献综述第13-27页
    1 肉鸡生长及其影响因素第13-19页
        1.1 骨骼肌生长发育规律第13页
        1.2 影响肉鸡及肌纤维生长发育的因素第13-15页
            1.2.1 品种第13-14页
            1.2.2 性别第14页
            1.2.3 年龄第14页
            1.2.4 营养第14页
            1.2.5 环境第14-15页
            1.2.6 遗传因素第15页
        1.3 调控肉鸡生长发育的主效基因第15-19页
            1.3.1 生肌调节因子(MRFs)第15-16页
            1.3.2 胰岛素样生长因子(IGFs)和胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBPs)第16-17页
            1.3.3 肌细胞增强因子-2(MEF2)第17-18页
            1.3.4 肌球蛋白重链MYHC第18页
            1.3.5 肌肉生长抑制素MSTN第18-19页
    2 DNA甲基化研究第19-23页
        2.1 DNA甲基化的作用及调控机制第19-20页
        2.2 DNA甲基化的检测方法第20-22页
            2.2.1 全基因组重亚硫酸盐测序(whole-genome bisulfite sequencing, WGBS)第20-22页
            2.2.2 降低代表性重亚硫酸盐测序(Reduced Representation BisulfiteSequencing,RRBS)第22页
            2.2.3 免疫富集DNA甲基化测序(Methylated DNA Immunoprecipitation Sequencing,MeDIP-seq)第22页
        2.3 DNA甲基化对动物生长发育的影响第22-23页
    3 畜禽转录组学研究进展第23-25页
        3.1 转录组测序(RNA-seq)技术第23-24页
        3.2 RNA-seq技术在畜禽生长发育中的研究进展第24-25页
    4 研究内容及目的意义第25-27页
        4.1 选题背景和研究内容第25-26页
        4.2 研究目的与意义第26-27页
第二章 京海黄鸡不同生长阶段mRNA表达差异第27-56页
    1 前言第27页
    2 材料与方法第27-33页
        2.1 试验群体与样本采集第27-28页
        2.2 主要仪器及试剂第28-29页
            2.2.1 主要仪器与设备第28页
            2.2.2 主要试剂第28-29页
        2.3 试验方法与统计分析第29-33页
            2.3.1 表型数据获取及处理第29页
            2.3.2 总RNA的提取与质量检测第29-30页
            2.3.3 RNA-seq文库构建及测序第30页
            2.3.4 测序数据质量评估及预处理第30-31页
            2.3.5 生物信息学分析第31页
            2.3.6 实时荧光定量PCR验证第31-33页
    3 结果与分析第33-52页
        3.1 京海黄鸡生长曲线拟合第33-34页
        3.2 转录组测序RNA样品质量检测第34-35页
        3.3 RNA-seq测序质量评估与质控第35-40页
            3.3.1 测序错误率分布检测第35-36页
            3.3.2 碱基含量分布检测第36-37页
            3.3.3 测序饱和度和随机性分析第37-39页
            3.3.4 Reads在参考基因组上的分布和基因覆盖度分析第39-40页
        3.4 RNA-seq数据产出及与参考基因组比对分析第40-42页
            3.4.1 RNA-seq数据产出统计第40-41页
            3.4.2 各生长阶段基因表达分析第41-42页
        3.5 不同生长阶段差异表达基因分析第42-51页
            3.5.1 差异表达基因的筛选第42-44页
            3.5.2 差异表达基因功能注释及富集分析第44-51页
        3.6 差异表达基因qRT-PCR技术验证第51-52页
    4 讨论第52-54页
    本章小结第54-56页
第三章 京海黄鸡全基因组DNA甲基化图谱构建第56-71页
    1 前言第56页
    2 材料与方法第56-60页
        2.1 试验样本第56页
        2.2 主要仪器及试验试剂第56-57页
        2.3 试验方法第57-60页
            2.3.1 基因组DNA提取第57-58页
            2.3.2 BS-seq文库构建及测序第58页
            2.3.3 甲基化测序原始数据质量控制第58页
            2.3.4 与参考基因组比对分析第58-59页
            2.3.5 甲基化位点检测及甲基化水平分析第59-60页
    3 结果与分析第60-68页
        3.1 基因组DNA提取结果检测第60页
        3.2 原始数据的质量控制第60-62页
        3.3 甲基化测序数据统计分析第62页
        3.4 甲基化C位点的鉴定及分布特征第62-64页
        3.5 全基因组甲基化水平的分布规律第64-66页
        3.6 染色体甲基化分布特点第66-68页
        3.7 基因组不同功能元件的甲基化水平第68页
    4 讨论第68-70页
    本章小结第70-71页
第四章 不同生长阶段京海黄鸡腿肌甲基化差异第71-100页
    1 前言第71页
    2 材料与方法第71-76页
        2.1 试验样本第71页
        2.2 主要仪器及试验试剂第71-72页
        2.3 试验方法第72-76页
            2.3.1 差异甲基化区域(DMR)的鉴定第72-73页
            2.3.2 差异甲基化基因(DMG)功能富集分析第73页
            2.3.3 重亚硫酸盐测序PCR (BSP)验证第73-76页
    3 结果与分析第76-95页
        3.1 差异甲基化区域检测第76-79页
        3.2 差异甲基化基因鉴定及功能富集分析第79-88页
            3.2.1 差异甲基化基因鉴定第79-80页
            3.2.2 差异甲基化基因功能富集分析第80-86页
            3.2.3 启动子区域差异甲基化基因筛选第86页
            3.2.4 启动子区差异甲基化基因功能富集分析第86-88页
        3.3 差异甲基化区域BSP验证第88-90页
        3.4 差异甲基化与基因表达联合分析第90-93页
        3.5 IGF2BP3和IGF2BP1启动子区甲基化与基因表达的关系第93-95页
    4 讨论第95-98页
    本章小结第98-100页
全文结论第100-102页
创新点第102-103页
研究的不足之处及下一步研究计划第103-104页
参考文献第104-119页
附录第119-126页
致谢第126-127页
攻读学位期间发表学术论文第127-129页

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