| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 材料与方法 | 第15-26页 |
| 1. 实验相关细胞株 | 第15页 |
| 2. 主要试剂 | 第15-16页 |
| 3. 主要仪器 | 第16-17页 |
| 4. 主要试剂的配制方法 | 第17-21页 |
| 4.1 DMEM高糖培养液的配制 | 第17页 |
| 4.2 细胞冻存液的配制 | 第17页 |
| 4.3 胎牛血清处理 | 第17页 |
| 4.4 磷酸盐缓冲液(PBS)(0.01M,pH值7.2-7.4)的配制 | 第17页 |
| 4.5 0.25%胰酶的配制 | 第17-18页 |
| 4.6 柠檬酸盐缓冲液(0.01M,pH值3.0)的配制 | 第18页 |
| 4.7 4%多聚甲醛配制 | 第18页 |
| 4.8 5mg/ml的MTT溶液配制方法 | 第18页 |
| 4.9 氯喹(CQ)的配制 | 第18页 |
| 4.10 3%浓度的戊二醛配制 | 第18页 |
| 4.11 0.1mg/ml(1%)BSA封闭液 | 第18页 |
| 4.12 TGF-β1抗体的配制 | 第18页 |
| 4.13 0.1%甲基紫溶液的配制 | 第18-19页 |
| 4.14 次强酸的配制 | 第19页 |
| 4.15 MDC溶液的配制 | 第19页 |
| 4.16 Ⅳ型胶原的配制 | 第19页 |
| 4.17 Western blot免疫印迹主要试剂配制 | 第19-21页 |
| 5. 主要实验方法 | 第21-25页 |
| 5.1 细胞培养及分组 | 第21-22页 |
| 5.2 细胞形态观察 | 第22页 |
| 5.3 自噬体形态观察 | 第22页 |
| 5.4 MDC染色免疫荧光观察细胞自噬泡形成 | 第22页 |
| 5.5 MTT法测氯喹浓度对细胞存活率影响 | 第22-23页 |
| 5.6 Transwell小室实验 | 第23页 |
| 5.7 Western Blot(免疫印迹)分析 | 第23-25页 |
| 6. 统计学分析 | 第25-26页 |
| 结果 | 第26-29页 |
| 1. 鉴定胃癌BGC-823细胞稳定转染NM23-H2基因 | 第26页 |
| 2. NM23-H2抑制胃癌BGC-823细胞发生EMT | 第26页 |
| 2.1 检测BGC-NM23H2细胞EMT相关标志物的改变 | 第26页 |
| 2.2 观察BGC-823细胞高表达NM23-H2细胞形态的改变 | 第26页 |
| 3. NM23-H2诱导胃癌BGC-823细胞发生自噬 | 第26-27页 |
| 3.1 检测BGC-NM23H2细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达水平 | 第26页 |
| 3.2 观察BGC-NM23H2细胞自噬囊泡的形成 | 第26-27页 |
| 3.3 观察BGC-NM23H2细胞超微结构 | 第27页 |
| 4. 抑制自噬后BGC-NM23H2细胞EMT的改变 | 第27-28页 |
| 4.1 筛选最适氯喹浓度 | 第27页 |
| 4.2 氯喹作用细胞后自噬相关蛋白LC3Ⅱ表达水平 | 第27页 |
| 4.3 氯喹作用细胞后自噬囊泡的形成 | 第27页 |
| 4.4 抑制自噬后BGC-NM23H2细胞EMT的改变 | 第27-28页 |
| 5. 抑制自噬后胃癌BGC-823细胞侵袭及迁移力的改变 | 第28-29页 |
| 5.1 抑制自噬后胃癌BGC-823细胞侵袭力的改变 | 第28页 |
| 5.2 抑制自噬后胃癌BGC-823细胞迁移力的改变 | 第28-29页 |
| 讨论 | 第29-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-38页 |
| 附图 | 第38-49页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
