| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-22页 |
| 1.1 脂肪酶的概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 脂肪酶的定义 | 第13页 |
| 1.1.2 脂肪酶的来源及种类 | 第13-14页 |
| 1.1.2.1 海洋脂肪酶 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2 碱性脂肪酶 | 第14页 |
| 1.1.2.3 低温脂肪酶 | 第14页 |
| 1.2 脂肪酶的结构特征及催化特性 | 第14-15页 |
| 1.3 提高脂肪酶催化性能的方法和途径 | 第15-18页 |
| 1.3.1 分子酶工程 | 第15-16页 |
| 1.3.2 化学修饰 | 第16页 |
| 1.3.3 介质工程 | 第16页 |
| 1.3.4 脂肪酶的固定化 | 第16-18页 |
| 1.3.4.1 包埋法 | 第16页 |
| 1.3.4.2 吸附法 | 第16-17页 |
| 1.3.4.3 共价结合法 | 第17页 |
| 1.3.4.4 交联法 | 第17-18页 |
| 1.4 脂肪酶的应用 | 第18-21页 |
| 1.4.1 脂肪酶在油脂工业的应用 | 第18-19页 |
| 1.4.2 脂肪酶在生物能源工业的应用 | 第19-20页 |
| 1.4.3 脂肪酶在制药行业的应用 | 第20页 |
| 1.4.4 脂肪酶在皮革工业的应用 | 第20页 |
| 1.4.5 脂肪酶在饲料中的应用 | 第20-21页 |
| 1.5 本课题的研究内容与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 海洋脂肪酶YS2071的固定化及条件优化 | 第22-37页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.1 脂肪酶来源 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 树脂来源 | 第23页 |
| 2.1.4 仪器与设备 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 溶液的配制 | 第23-24页 |
| 2.2.1.1 缓冲溶液的配制 | 第23-24页 |
| 2.2.1.2 酶液的配制 | 第24页 |
| 2.2.1.3 交联剂溶液的配制 | 第24页 |
| 2.2.2 pNP标准曲线的绘制 | 第24页 |
| 2.2.3 蛋白含量测定 | 第24页 |
| 2.2.4 脂肪酶酶活测定方法 | 第24页 |
| 2.2.5 固定化载体的筛选 | 第24-25页 |
| 2.2.6 脂肪酶固定化条件的优化 | 第25-26页 |
| 2.2.6.1 加酶量对固定化脂肪酶酶活力的影响 | 第25页 |
| 2.2.6.2 温度对固定化脂肪酶酶活力的影响 | 第25页 |
| 2.2.6.3 吸附时间对固定化脂肪酶酶活力的影响 | 第25页 |
| 2.2.6.4 pH对固定化脂肪酶酶活力的影响 | 第25页 |
| 2.2.6.5 交联剂浓度对固定化脂肪酶酶活力的影响 | 第25-26页 |
| 2.2.6.6 交联时间对固定化脂肪酶酶活力的影响 | 第26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-36页 |
| 2.3.1 pNP标准曲线的绘制 | 第26-27页 |
| 2.3.2 载体的筛选 | 第27页 |
| 2.3.3 单因素法优化固定化条件 | 第27-31页 |
| 2.3.3.1 加酶量对固定化脂肪酶酶活力的影响 | 第27-28页 |
| 2.3.3.2 温度对固定化脂肪酶酶活力的影响 | 第28-29页 |
| 2.3.3.3 吸附时间对固定化脂肪酶酶活力的影响 | 第29页 |
| 2.3.3.4 pH对固定化脂肪酶酶活力的影响 | 第29-30页 |
| 2.3.3.5 交联剂浓度对固定化脂肪酶酶活力的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.3.6 交联时间对固定化脂肪酶酶活力的影响 | 第31页 |
| 2.3.4 响应面法优化固定化条件 | 第31-36页 |
| 2.3.4.1 Plackett-Burman法筛选主要影响因子 | 第31-32页 |
| 2.3.4.2 响应面法中心组合设计确定固定化最优条件 | 第32-35页 |
| 2.3.4.3 验证试验 | 第35-36页 |
| 2.4 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 固定化脂肪酶YS2071酶学性能研究 | 第37-46页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第37-38页 |
| 3.1.1 溶液配制 | 第37页 |
| 3.1.2 固定酶的准备 | 第37页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.4 仪器与设备 | 第38页 |
| 3.2 试验方法 | 第38-39页 |
| 3.2.1 固定化酶与游离酶的最适作用温度 | 第38-39页 |
| 3.2.2 固定化酶与游离酶的热稳定性 | 第39页 |
| 3.2.3 固定化酶与游离酶的最适作用pH | 第39页 |
| 3.2.4 固定化酶与游离酶的pH稳定性 | 第39页 |
| 3.2.5 金属离子的影响 | 第39页 |
| 3.2.6 有机溶剂的影响 | 第39页 |
| 3.2.7 重复使用性 | 第39页 |
| 3.2.8 储存稳定性 | 第39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-45页 |
| 3.3.1 固定化酶和游离酶的最适作用温度 | 第39-40页 |
| 3.3.2 固定化酶和游离酶的热稳定性 | 第40-41页 |
| 3.3.3 固定化酶和游离酶的最适作用pH | 第41页 |
| 3.3.4 固定化酶和游离酶的pH稳定性 | 第41-42页 |
| 3.3.5 金属离子的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.6 有机溶剂的影响 | 第43页 |
| 3.3.7 重复使用性 | 第43-44页 |
| 3.3.8 储存稳定性 | 第44-45页 |
| 3.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 固定化酶YS2071催化合成生物柴油 | 第46-56页 |
| 4.1 仪器与材料 | 第46-47页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第46页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第46-47页 |
| 4.1.3 仪器与设备 | 第47页 |
| 4.2 试验方法 | 第47-49页 |
| 4.2.1 薄层色谱法定性分析 | 第47页 |
| 4.2.2 高效液相定量分析 | 第47-48页 |
| 4.2.2.1 液相色谱条件 | 第47-48页 |
| 4.2.2.2 乙酯转化率 | 第48页 |
| 4.2.2.3 标准品的定量分析 | 第48页 |
| 4.2.2.4 甘油酯标准曲线的绘制 | 第48页 |
| 4.2.3 生物柴油转化条件优化 | 第48-49页 |
| 4.2.3.1 加酶量对乙酯转化率的影响 | 第48页 |
| 4.2.3.2 含水量对乙酯转化率的影响 | 第48页 |
| 4.2.3.3 醇油比对乙酯转化率的影响 | 第48页 |
| 4.2.3.4 温度对乙酯转化率的影响 | 第48页 |
| 4.2.3.5 反应时间对乙酯转化率的影响 | 第48-49页 |
| 4.3 结果与分析 | 第49-55页 |
| 4.3.1 薄层色谱法定性分析产物 | 第49页 |
| 4.3.2 高效液相定量分析产物 | 第49-50页 |
| 4.3.2.1 流动相的确定 | 第49-50页 |
| 4.3.2.2 甘油酯标准曲线的绘制 | 第50页 |
| 4.3.3 生物柴油转化条件优化 | 第50-53页 |
| 4.3.3.1 加酶量对乙酯转化率的影响 | 第50-51页 |
| 4.3.3.2 含水量对乙酯转化率的影响 | 第51页 |
| 4.3.3.3 醇油比对乙酯转化率的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.3.4 温度对乙酯转化率的影响 | 第52-53页 |
| 4.3.3.5 时间对乙酯转化率的影响 | 第53页 |
| 4.3.4 正交试验确定最优条件 | 第53-54页 |
| 4.3.5 验证试验 | 第54-55页 |
| 4.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第五章 结论与展望 | 第56-58页 |
| 5.1 结论 | 第56-57页 |
| 5.2 展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
