摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 引言(综述) | 第11-19页 |
前言 | 第11页 |
1.1 研究现状 | 第11-14页 |
1.2 脂肪酸结合蛋白的功能 | 第14-18页 |
1.2.1 FABP的基本功能 | 第14-15页 |
1.2.2 FABP的免疫相关功能 | 第15-16页 |
1.2.3 FABP作为生物标记物 | 第16-17页 |
1.2.4 FABP调节细胞增殖、生长 | 第17页 |
1.2.5 FABP调节基因转录、信号转导 | 第17-18页 |
1.3 结语 | 第18-19页 |
第二章 FABP3、FABP9和FABP10原核表达及蛋白纯化 | 第19-36页 |
2.1 材料与方法 | 第19-28页 |
2.1.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
2.1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
2.1.4 实验相关引物 | 第20页 |
2.1.5 总RNA提取及反转录 | 第20-21页 |
2.1.6 扩增中华绒螯蟹FABP3、FABP9、FABP10基因的ORF | 第21-23页 |
2.1.7 PMD-19T-FABP载体构建及测序 | 第23-25页 |
2.1.8 中华绒螯蟹FABP3、9、10 基因原核表达载体的构建及鉴定 | 第25-26页 |
2.1.9 诱导pET-15b/FABP重组蛋白表达及表达产物初步分析 | 第26-27页 |
2.1.10 重组蛋白Es-FABP3、Es-FABP9和Es-FABP10的纯化 | 第27-28页 |
2.2 结果 | 第28-34页 |
2.2.1 FABP3、FABP9、FABP10基因OFR扩增 | 第28页 |
2.2.2 重组质粒pMD-19T-FABP的构建及鉴定 | 第28-30页 |
2.2.3 三种重组原核表达载体pET-15b-FABP菌液PCR反应及酶切验证 | 第30-31页 |
2.2.4 三种重组蛋白的表达 | 第31-32页 |
2.2.5 重组蛋白pET-15b/FABP3,pET-15b/FABP9和pET-15b/FABP10的纯化 | 第32-33页 |
2.2.6 重组蛋白pET-15b/FABP3,pET-15b/FABP9和pET-15b/FABP10纯化条件的优化 | 第33-34页 |
2.3 讨论 | 第34-36页 |
第三章 不同脂肪酸作用肝胰腺其FABP3、FABP9、FABP10表达变化 | 第36-45页 |
3.1 材料与方法 | 第36-39页 |
3.1.1 实验材料 | 第36页 |
3.1.2 主要试剂 | 第36页 |
3.1.3 主要仪器 | 第36页 |
3.1.4 中华绒螯蟹肝胰腺组织离体培养 | 第36-38页 |
3.1.5 组织RNA提取及反转录 | 第38页 |
3.1.6 引物设计和Real -Time-PCR反应条件建立 | 第38页 |
3.1.7 RT-PCR测取肝胰腺FABP3,FABP9,FABP10表达量 | 第38-39页 |
3.1.8 荧光定量结果及统计学分析方法 | 第39页 |
3.2 结果 | 第39-43页 |
3.2.1 肝胰腺组织形态观察 | 第39-40页 |
3.2.2 RNA提取 | 第40页 |
3.2.3 不同脂肪酸对肝胰腺组织中FABP3,FABP9和FABP10表达量影响 | 第40-43页 |
3.3 讨论 | 第43-45页 |
第四章 FABP3、FABP9、FABP10与不同脂肪酸亲和力分析 | 第45-50页 |
4.1 材料与方法 | 第45-46页 |
4.1.1 实验材料 | 第45页 |
4.1.2 主要仪器 | 第45页 |
4.1.3 稳态荧光测量的设定 | 第45-46页 |
4.1.4 实验方法 | 第46页 |
4.2 结果 | 第46-48页 |
4.3 讨论 | 第48-50页 |
小结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
攻读硕士期间参与的科研项目及发表的相关论文 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |