| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-26页 |
| 1.1 肠产毒性大肠杆菌简介 | 第12-14页 |
| 1.1.1 肠产毒性大肠杆菌生物学特性 | 第12页 |
| 1.1.2 肠产毒性大肠杆菌主要致病因子及其致病机理 | 第12页 |
| 1.1.3 肠产毒性大肠杆菌外膜囊泡 | 第12-13页 |
| 1.1.4 大肠杆菌耐药性发展现状及其耐药机制 | 第13页 |
| 1.1.5 仔猪发生肠产毒性大肠杆菌腹泻的症状及经济损失 | 第13页 |
| 1.1.6 生鲜猪肉中ETEC的污染情况 | 第13-14页 |
| 1.2 噬菌体简介 | 第14-18页 |
| 1.2.1 噬菌体分类 | 第14-17页 |
| 1.2.2 噬菌体生物学特性 | 第17页 |
| 1.2.3 噬菌体作为抗菌制剂的优势 | 第17-18页 |
| 1.3 噬菌体控制致病性大肠杆菌的应用 | 第18-24页 |
| 1.3.1 噬菌体防控肠出血性大肠杆菌 | 第18-19页 |
| 1.3.2 噬菌体防控肠产毒性大肠杆菌 | 第19-20页 |
| 1.3.3 噬菌体防控肠致病性大肠杆菌 | 第20页 |
| 1.3.4 噬菌体防控其他种类致病性大肠杆菌 | 第20-21页 |
| 1.3.5 噬菌体治疗金黄色葡萄球菌性疾病 | 第21页 |
| 1.3.6 噬菌体治疗铜绿假单胞菌性疾病 | 第21-22页 |
| 1.3.7 噬菌体防治医疗环境中的鲍曼不动杆菌 | 第22-23页 |
| 1.3.8 噬菌体与抗生素联合抑菌效果 | 第23-24页 |
| 1.4 本论文研究意义 | 第24页 |
| 1.5 本论文的研究思路 | 第24-26页 |
| 2 致病菌的分离纯化及鉴定 | 第26-40页 |
| 2.1 实验用品 | 第26-27页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.1.2 实验试剂与药品 | 第26页 |
| 2.1.3 实验仪器与设备 | 第26页 |
| 2.1.4 培养基的配制 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-31页 |
| 2.2.1 样品采集 | 第27-28页 |
| 2.2.2 细菌的选择性培养 | 第28页 |
| 2.2.3 细菌总DNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.4 多重实时荧光定量PCR检测样品中的致病性大肠杆菌 | 第28-29页 |
| 2.2.5 生理生化指标鉴定 | 第29页 |
| 2.2.6 致病菌分子指标鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.7 ETEC的分离鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.8 ETEC耐药性分析 | 第31页 |
| 2.2.9 ETEC外膜囊泡的分离鉴定 | 第31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-38页 |
| 2.3.1 采样 | 第31-32页 |
| 2.3.2 实时定量PCR检测致病菌 | 第32-33页 |
| 2.3.3 大肠杆菌的分离 | 第33页 |
| 2.3.4 致病菌鉴定结果 | 第33-36页 |
| 2.3.5 ETEC单菌落的分离与纯化 | 第36页 |
| 2.3.6 ETEC耐药性分析 | 第36-37页 |
| 2.3.7 ETEC外膜囊泡的透射电镜图 | 第37-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-39页 |
| 2.5 小结 | 第39-40页 |
| 3 特异裂解性噬菌体的筛选 | 第40-54页 |
| 3.1 实验用品 | 第40-41页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第40页 |
| 3.1.2 实验试剂与药品 | 第40页 |
| 3.1.3 实验仪器与设备 | 第40-41页 |
| 3.1.4 培养基及试剂配制 | 第41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-45页 |
| 3.2.1 噬菌体的分离及纯化 | 第41-43页 |
| 3.2.2 噬菌体颗粒的浓缩 | 第43页 |
| 3.2.3 噬菌体透射电镜观察 | 第43页 |
| 3.2.4 噬菌体宿主谱的测定 | 第43-44页 |
| 3.2.5 噬菌体DNA的提取 | 第44页 |
| 3.2.6 噬菌体核酸酶切 | 第44页 |
| 3.2.7 噬菌体氯仿敏感性实验 | 第44页 |
| 3.2.8 噬菌体酸碱稳定性的测定 | 第44页 |
| 3.2.9 噬菌体温度稳定性的测定 | 第44-45页 |
| 3.2.10 体外抑菌实验 | 第45页 |
| 3.2.11 一步生长曲线 | 第45页 |
| 3.3 实验结果 | 第45-52页 |
| 3.3.1 噬菌体分离结果 | 第45页 |
| 3.3.2 噬菌体纯化结果 | 第45-46页 |
| 3.3.3 噬菌体透射电镜观察结果 | 第46-47页 |
| 3.3.4 噬菌体宿主谱的测定 | 第47页 |
| 3.3.5 噬菌体DNA的提取 | 第47-48页 |
| 3.3.6 噬菌体核酸酶切 | 第48页 |
| 3.3.7 噬菌体对氯仿敏感性测定 | 第48-49页 |
| 3.3.8 噬菌体酸碱稳定性的测定 | 第49页 |
| 3.3.9 噬菌体温度稳定性的测定 | 第49-50页 |
| 3.3.10 体外抑菌实验结果 | 第50-51页 |
| 3.3.11 噬菌体一步生长曲线 | 第51-52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-53页 |
| 3.5 小结 | 第53-54页 |
| 4 噬菌体与其它抗菌剂联合抑菌效果 | 第54-62页 |
| 4.1 引言 | 第54页 |
| 4.2 实验用品 | 第54-55页 |
| 4.2.1 实验样品 | 第54页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第54页 |
| 4.2.3 实验仪器与设备 | 第54-55页 |
| 4.3 实验方法 | 第55页 |
| 4.3.1 ETEC的培养 | 第55页 |
| 4.3.2 SDS对噬菌体裂解作用效果的影响 | 第55页 |
| 4.3.3 胆盐对噬菌体裂解作用效果的影响 | 第55页 |
| 4.3.4 抗生素-噬菌体联合抑菌效果 | 第55页 |
| 4.3.5 数据分析 | 第55页 |
| 4.4 实验结果 | 第55-60页 |
| 4.4.1 SDS对噬菌体裂解作用效果的影响 | 第55-56页 |
| 4.4.2 胆盐对噬菌体裂解作用效果的影响 | 第56-57页 |
| 4.4.3 阿莫西林-噬菌体联合抑菌效果 | 第57-58页 |
| 4.4.4 链霉素-噬菌体联合抑菌效果 | 第58-59页 |
| 4.4.5 庆大霉素-噬菌体联合抑菌效果 | 第59-60页 |
| 4.5 讨论 | 第60-61页 |
| 4.6 小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 附录A E1的 16S rDNA测序结果 | 第70-71页 |
| 一、攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第71页 |
| 二、专利申请情况 | 第71页 |
| 三、会议论文 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
