| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-27页 |
| 1.1 概述 | 第15页 |
| 1.2 家蚕质型多角体病毒 | 第15-21页 |
| 1.2.1 BmCPV的基因组研究 | 第16-18页 |
| 1.2.2 BmCPV的侵染、复制与转录 | 第18-19页 |
| 1.2.3 BmCPV的其他相关研究 | 第19-21页 |
| 1.3 转录组测序及其应用研究 | 第21-23页 |
| 1.3.1 转录组和转录组学 | 第21-22页 |
| 1.3.2 转录组研究方法及测序技术的发展 | 第22页 |
| 1.3.3 转录组测序的应用 | 第22-23页 |
| 1.4 RNA干扰与转基因 | 第23-27页 |
| 1.4.1 RNAi及其应用 | 第23-25页 |
| 1.4.2 转基因与转基因育种 | 第25页 |
| 1.4.3 转基因及RNAi技术在家蚕研究中的应用 | 第25-27页 |
| 第二章 引言 | 第27-29页 |
| 2.1 研究背景与目的意义 | 第27页 |
| 2.2 研究内容 | 第27-28页 |
| 2.3 研究路线 | 第28-29页 |
| 第三章 利用转录组学分析家蚕与BmCPV病毒的互作 | 第29-53页 |
| 3.1 实验材料 | 第29-31页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第29页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第30-31页 |
| 3.1.4 主要溶液配制 | 第31页 |
| 3.2 实验方法与步骤 | 第31-39页 |
| 3.2.1 病毒接种及组织提取 | 第31页 |
| 3.2.2 组织总RNA提取及纯化 | 第31-32页 |
| 3.2.3 cDNA的制备及检测 | 第32-33页 |
| 3.2.4 mRNA纯化和片段化 | 第33-34页 |
| 3.2.5 合成cDNA双链 | 第34-35页 |
| 3.2.6 末端修复 | 第35页 |
| 3.2.7 3’末端加A | 第35-36页 |
| 3.2.8 连接接头 | 第36-37页 |
| 3.2.9 DNA片段的富集 | 第37页 |
| 3.2.10 文库质量检测 | 第37页 |
| 3.2.11 文库标准化和池化 | 第37-38页 |
| 3.2.12 cBot簇生反应及测序 | 第38页 |
| 3.2.13 转录组数据分析 | 第38页 |
| 3.2.14 基因的表达情况分析 | 第38-39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-51页 |
| 3.3.1 RNA提取及文库构建 | 第39-41页 |
| 3.3.2 测序结果质量评估及数据处理 | 第41-42页 |
| 3.3.3 差异表达转录本数量分析 | 第42-44页 |
| 3.3.4 差异表达转录本的GO功能注释分析 | 第44-47页 |
| 3.3.5 差异基因的筛选及分析 | 第47-50页 |
| 3.3.6 Actin被BmCPV诱导上调 | 第50页 |
| 3.3.7 BmCPV基因表达模式分析 | 第50-51页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 抗BmCPV相关基因的初步鉴定 | 第53-65页 |
| 4.1 实验材料 | 第53-55页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第53页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第53-54页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第54页 |
| 4.1.4 主要溶液配制 | 第54-55页 |
| 4.2 实验方法与步骤 | 第55-56页 |
| 4.2.1 候选基因的RT-PCR验证 | 第55-56页 |
| 4.2.2 候选基因的荧光定量PCR验证 | 第56页 |
| 4.2.3 候选基因的信息分析 | 第56页 |
| 4.3 结果与分析 | 第56-61页 |
| 4.3.1 抗氧化相关基因的检测 | 第56-57页 |
| 4.3.2 具有转运功能的中肠特异基因的检测 | 第57-59页 |
| 4.3.3 中肠特异免疫相关基因的检测 | 第59-60页 |
| 4.3.4 中肠特异BmAPNs基因的检测 | 第60-61页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第61-65页 |
| 第五章 干涉BmCPV基因提高转基因家蚕的抗性 | 第65-79页 |
| 5.1 实验材料与方法 | 第65-66页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第65页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第65-66页 |
| 5.1.3 主要仪器和主要溶液配制 | 第66页 |
| 5.2 实验方法与步骤 | 第66-71页 |
| 5.2.1 转基因干涉载体的构建 | 第66-67页 |
| 5.2.2 注射蚕卵的制备 | 第67-68页 |
| 5.2.3 显微注射及转基因阳性个体的筛选 | 第68页 |
| 5.2.4 转基因个体的分子水平检测 | 第68-70页 |
| 5.2.5 转基因个体的抗性检测 | 第70页 |
| 5.2.6 转基因家蚕感染BmCPV后病毒基因拷贝数的检测 | 第70页 |
| 5.2.7 转基因家蚕的经济性状调查 | 第70-71页 |
| 5.3 结果与分析 | 第71-77页 |
| 5.3.1 家蚕转基因干涉品系的制备 | 第71-74页 |
| 5.3.2 转基因家蚕外源片段插入位点检测 | 第74页 |
| 5.3.3 转基因家蚕的抗性检测 | 第74-75页 |
| 5.3.4 转基因家蚕感染BmCPV后病毒基因表达量检测 | 第75-76页 |
| 5.3.5 转基因家蚕的经济性状调查 | 第76-77页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第77-79页 |
| 第六章 综合与讨论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 硕士期间发表的论文及参研课题 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
