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Wnt3a调控猪胰腺干细胞增殖的分子机理

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一部分 文献综述第14-31页
    第一章 胰腺干细胞研究进展第14-25页
        1.1 糖尿病研究概况第14-17页
        1.2 胰腺干细胞研究进展第17-23页
            1.2.1 胰腺发育第17-19页
            1.2.2 胰腺干细胞的来源第19-20页
            1.2.3 胰腺干细胞的生物学特性第20-23页
        1.3 胰腺干细胞的临床应用前景第23-25页
    第二章WNT信号通路在胰腺干细胞的研究进展第25-31页
        2.1 Wnt信号通路第25-27页
        2.2 Wnt信号通路在线粒体与氧化应激中作用第27-28页
        2.3 Wnt信号通路在细胞凋亡和自噬的作用第28-31页
第二部分:试验研究第31-86页
    第三章 稳定表达WNT3A对猪胰腺干细胞增殖和凋亡作用第31-58页
        3.1 材料与方法第32-42页
            3.1.1 材料第32-34页
            3.1.2 试验方法第34-42页
        3.2 结果第42-54页
            3.2.1 Wnt3a在胰腺组织中定位第42页
            3.2.2 构建稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞第42-43页
            3.2.3 鉴定稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞第43-44页
            3.2.4 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞免疫荧光蛋白定位第44-45页
            3.2.5 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞经典Wnt信号通路分析第45-46页
            3.2.6 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞GFP阳性率第46-47页
            3.2.7 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞细胞周期第47页
            3.2.8 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞BrdU标记试验第47-48页
            3.2.9 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞细胞群体倍增时间第48-49页
            3.2.10 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞细胞相关标记物核酸水平检测第49-50页
            3.2.11 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞细胞相关标记物的蛋白检测第50-51页
            3.2.12 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞细胞ROS检测第51-53页
            3.2.13 经典Wnt信号通路调节猪胰腺干细胞线粒体第53-54页
            3.2.14 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞细胞凋亡检测第54页
        3.3 讨论第54-56页
        3.4 小结第56-58页
    第四章DOX诱导WNT3A表达调控猪胰腺干细胞增殖第58-76页
        4.1 材料和方法第58-63页
            4.1.1 材料第58-59页
            4.1.2 方法第59-63页
        4.2 结果与分析第63-73页
            4.2.1 构建诱导表达载体pCDNA4T/O-Wnt3a第63-64页
            4.2.2 建立Dox诱导Wnt3a表达调控系统猪胰腺干细胞第64-65页
            4.2.3 Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞受时间和剂量调控第65-67页
            4.2.4 Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞上清中Wnt3a表达第67-68页
            4.2.5 Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞Wnt3a及 β-catenin定位第68页
            4.2.6 Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞相关标记的免疫荧光检测第68-69页
            4.2.7 流式细胞术分析Dox诱导Wnt3a表达的猪胰腺干细胞细胞周期第69页
            4.2.8 BrdU标记Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞第69-70页
            4.2.9 蛋白免疫印迹分析Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞第70-71页
            4.2.10 激光共聚焦检测Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞自噬相关标记第71-72页
            4.2.11 透射电镜观察Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞自噬第72页
            4.2.12 Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞的凋亡检测第72-73页
        4.3 讨论第73-74页
        4.4 小结第74-76页
    第五章 自噬对猪胰腺干细胞增殖的作用第76-86页
        5.1 材料与方法第76-78页
            5.1.1 材料第76-77页
            5.1.2 试验方法第77-78页
        5.2 结果第78-83页
            5.2.1 慢病毒包装自噬标记基因LC3 病毒液第78-79页
            5.2.2 建立稳定表达LC3 猪胰腺干细胞第79-80页
            5.2.3 稳定表达LC3 猪胰腺干细胞的鉴定第80-81页
            5.2.4 免疫荧光染色分析稳定表达LC3 猪胰腺干细胞的生物学特性第81页
            5.2.5 激光共聚焦分析稳定表达LC3 猪胰腺干细胞的自噬活性第81-82页
            5.2.6 细胞周期分析自噬活性对猪胰腺干细胞的增殖作用第82-83页
            5.2.7 BrdU细胞标记分析自噬活性对猪胰腺干细胞增殖作用第83页
        5.3 讨论第83-85页
        5.4 小结第85-86页
结论第86页
本研究的创新点与进一步研究的课题第86-87页
参考文献第87-101页
缩略词第101-102页
致谢第102-103页
作者简介第103页

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