摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一部分 文献综述 | 第14-31页 |
第一章 胰腺干细胞研究进展 | 第14-25页 |
1.1 糖尿病研究概况 | 第14-17页 |
1.2 胰腺干细胞研究进展 | 第17-23页 |
1.2.1 胰腺发育 | 第17-19页 |
1.2.2 胰腺干细胞的来源 | 第19-20页 |
1.2.3 胰腺干细胞的生物学特性 | 第20-23页 |
1.3 胰腺干细胞的临床应用前景 | 第23-25页 |
第二章WNT信号通路在胰腺干细胞的研究进展 | 第25-31页 |
2.1 Wnt信号通路 | 第25-27页 |
2.2 Wnt信号通路在线粒体与氧化应激中作用 | 第27-28页 |
2.3 Wnt信号通路在细胞凋亡和自噬的作用 | 第28-31页 |
第二部分:试验研究 | 第31-86页 |
第三章 稳定表达WNT3A对猪胰腺干细胞增殖和凋亡作用 | 第31-58页 |
3.1 材料与方法 | 第32-42页 |
3.1.1 材料 | 第32-34页 |
3.1.2 试验方法 | 第34-42页 |
3.2 结果 | 第42-54页 |
3.2.1 Wnt3a在胰腺组织中定位 | 第42页 |
3.2.2 构建稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞 | 第42-43页 |
3.2.3 鉴定稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞 | 第43-44页 |
3.2.4 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞免疫荧光蛋白定位 | 第44-45页 |
3.2.5 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞经典Wnt信号通路分析 | 第45-46页 |
3.2.6 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞GFP阳性率 | 第46-47页 |
3.2.7 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞细胞周期 | 第47页 |
3.2.8 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞BrdU标记试验 | 第47-48页 |
3.2.9 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞细胞群体倍增时间 | 第48-49页 |
3.2.10 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞细胞相关标记物核酸水平检测 | 第49-50页 |
3.2.11 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞细胞相关标记物的蛋白检测 | 第50-51页 |
3.2.12 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞细胞ROS检测 | 第51-53页 |
3.2.13 经典Wnt信号通路调节猪胰腺干细胞线粒体 | 第53-54页 |
3.2.14 稳定表达Wnt3a猪胰腺干细胞细胞凋亡检测 | 第54页 |
3.3 讨论 | 第54-56页 |
3.4 小结 | 第56-58页 |
第四章DOX诱导WNT3A表达调控猪胰腺干细胞增殖 | 第58-76页 |
4.1 材料和方法 | 第58-63页 |
4.1.1 材料 | 第58-59页 |
4.1.2 方法 | 第59-63页 |
4.2 结果与分析 | 第63-73页 |
4.2.1 构建诱导表达载体pCDNA4T/O-Wnt3a | 第63-64页 |
4.2.2 建立Dox诱导Wnt3a表达调控系统猪胰腺干细胞 | 第64-65页 |
4.2.3 Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞受时间和剂量调控 | 第65-67页 |
4.2.4 Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞上清中Wnt3a表达 | 第67-68页 |
4.2.5 Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞Wnt3a及 β-catenin定位 | 第68页 |
4.2.6 Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞相关标记的免疫荧光检测 | 第68-69页 |
4.2.7 流式细胞术分析Dox诱导Wnt3a表达的猪胰腺干细胞细胞周期 | 第69页 |
4.2.8 BrdU标记Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞 | 第69-70页 |
4.2.9 蛋白免疫印迹分析Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞 | 第70-71页 |
4.2.10 激光共聚焦检测Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞自噬相关标记 | 第71-72页 |
4.2.11 透射电镜观察Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞自噬 | 第72页 |
4.2.12 Dox诱导Wnt3a表达猪胰腺干细胞的凋亡检测 | 第72-73页 |
4.3 讨论 | 第73-74页 |
4.4 小结 | 第74-76页 |
第五章 自噬对猪胰腺干细胞增殖的作用 | 第76-86页 |
5.1 材料与方法 | 第76-78页 |
5.1.1 材料 | 第76-77页 |
5.1.2 试验方法 | 第77-78页 |
5.2 结果 | 第78-83页 |
5.2.1 慢病毒包装自噬标记基因LC3 病毒液 | 第78-79页 |
5.2.2 建立稳定表达LC3 猪胰腺干细胞 | 第79-80页 |
5.2.3 稳定表达LC3 猪胰腺干细胞的鉴定 | 第80-81页 |
5.2.4 免疫荧光染色分析稳定表达LC3 猪胰腺干细胞的生物学特性 | 第81页 |
5.2.5 激光共聚焦分析稳定表达LC3 猪胰腺干细胞的自噬活性 | 第81-82页 |
5.2.6 细胞周期分析自噬活性对猪胰腺干细胞的增殖作用 | 第82-83页 |
5.2.7 BrdU细胞标记分析自噬活性对猪胰腺干细胞增殖作用 | 第83页 |
5.3 讨论 | 第83-85页 |
5.4 小结 | 第85-86页 |
结论 | 第86页 |
本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-101页 |
缩略词 | 第101-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
作者简介 | 第103页 |