摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
第一章 引言 | 第12-18页 |
·单细胞研究的意义 | 第13-15页 |
·目前已有的单细胞分选技术及相应的优势与缺陷 | 第15-16页 |
·目前已有的全基因组扩增技术及相应的优势与缺陷 | 第16-17页 |
·本章小节 | 第17-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-27页 |
·材料 | 第18-19页 |
·主要仪器 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·主要实验方法 | 第19-26页 |
·HT1080 细胞培养 | 第19页 |
·DNA 提取 | 第19页 |
·组织冰冻切片 | 第19-20页 |
·冰冻切片的苏木精染色 | 第20页 |
·HT1080 细胞涂片的制备及cresyl violet 染色 | 第20页 |
·LCM 分选单个完整细胞核 | 第20-22页 |
·分选细胞的全基因组扩增(WGA) | 第22页 |
·全基因组扩增产物随机克隆测序验证 | 第22-23页 |
·利用胃癌相关 SNP 位点检验全基因组扩增的保真性 | 第23-24页 |
·全基因组扩增线性的验证 | 第24-26页 |
·本章小节 | 第26-27页 |
第三章 实验结果 | 第27-39页 |
·单个或少量细胞分选及全基因组扩增 | 第27-32页 |
·冰冻切片中单个完整细胞核的确定 | 第27页 |
·单个完整细胞核分选时切片厚度的确定 | 第27-28页 |
·通过激光显微切割分选完整单个细胞核 | 第28-30页 |
·通过GenomePlex library 技术进行单细胞全基因组扩增 | 第30-31页 |
·临床胃癌组织的冰冻切片、苏木精染色及少量细胞分选 | 第31-32页 |
·少量胃癌细胞全基因组放大 | 第32页 |
·全基因组扩增产物的验证 | 第32-38页 |
·全基因组扩增效率及重复性 | 第32页 |
·全基因组克隆产物随机克隆验证 | 第32-34页 |
·利用PCR-RFLP方法进行PSCA基因单核苷酸多态性的基因型分析 | 第34-35页 |
·利用直接测序方法进行PSCA基因多态性的基因型分析 | 第35-36页 |
·全基因组扩增线性的验证 | 第36-38页 |
·本章小节 | 第38-39页 |
第四章 总结与展望 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第46页 |