| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 论文缩写词中英文对照 | 第6-9页 |
| 1 前言 | 第9-17页 |
| 1.1 无脊椎动物与Toll样受体 | 第9-11页 |
| 1.2 脊椎动物与TLR | 第11-13页 |
| 1.3 TLRs的结构 | 第13-15页 |
| 1.4 哺乳动物TLR4 | 第15-16页 |
| 1.5 本文研究的目的、意义和内容 | 第16-17页 |
| 2 实验方法 | 第17-38页 |
| 2.1 实验材料及试剂 | 第17-21页 |
| 2.1.1 分子克隆所用材料及试剂 | 第17页 |
| 2.1.2 昆虫细胞培养及处理所用材料及试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 蛋白表达所用试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.4 蛋白纯化透析试剂 | 第18页 |
| 2.1.5 ELISA所用试剂和材料 | 第18-19页 |
| 2.1.6 免疫共沉淀及Western-blot材料和试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.7 主要仪器和设备 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-38页 |
| 2.2.1 TLRs（Toll-Like-Receptors）的进化树分析 | 第21页 |
| 2.2.2 BmMLs的序列比对分析 | 第21页 |
| 2.2.3 BmMLs原核表达载体的构建 | 第21-26页 |
| 2.2.4 蛋白的原核表达纯化与复性 | 第26-29页 |
| 2.2.5 ELISA检测微生物不同组分与Bm MLs蛋白的结合 | 第29-30页 |
| 2.2.6 BmToll9以及BmMLs细胞系的构建 | 第30-32页 |
| 2.2.7 免疫共沉淀检测BmMLs蛋白与Bm Toll9的结合 | 第32-33页 |
| 2.2.8 BmToll9以及BmMLs的细胞瞬时转染 | 第33-34页 |
| 2.2.9 相关基因mRNA水平检测 | 第34-38页 |
| 3 实验结果 | 第38-51页 |
| 3.1 TLRs受体蛋白的进化树分析 | 第38-39页 |
| 3.2 BmMLs蛋白的结构分析 | 第39-40页 |
| 3.3 BmMLs与Bm Toll9的扩增 | 第40-41页 |
| 3.4 BmMLs与不同微生物组分的结合实验 | 第41-45页 |
| 3.4.1 BmMLs蛋白的表达 | 第41-42页 |
| 3.4.2 BmMLs蛋白的可溶性分析 | 第42页 |
| 3.4.3 BmMLs重组蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| 3.4.4 ELISA检测Bm MLs与微生物组分的结合 | 第43-45页 |
| 3.5 BmMLs与Bm Toll9的结合试验 | 第45-47页 |
| 3.5.1 BmMLs与Bm Toll9细胞系的建立 | 第45页 |
| 3.5.2 Co-IP检测BmMLs与BmToll9的结合 | 第45-47页 |
| 3.6 家蚕细胞经LPS诱导后下游抗菌肽的检测 | 第47-51页 |
| 3.6.1 BmToll9在家蚕Bm12细胞中的表达 | 第47-48页 |
| 3.6.2 下游抗菌肽的检测 | 第48-51页 |
| 4 讨论与全文总结 | 第51-55页 |
| 4.1 家蚕BmToll9与哺乳动物TLR4的高度同源性 | 第51页 |
| 4.2 家蚕BmMLs蛋白的结构及活性分析 | 第51-52页 |
| 4.3 BmMLs与Bm Toll9的结合 | 第52-53页 |
| 4.4 转染BmToll9家蚕细胞经LPS诱导后下游抗菌肽的检测 | 第53页 |
| 4.5 全文总结 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录 | 第61-68页 |
