| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪言 | 第15-25页 |
| 1.1 异硫氰酸酯与癌症预防 | 第15页 |
| 1.2 莱菔硫烷研究进展 | 第15-21页 |
| 1.2.1 莱菔硫烷概述 | 第15-16页 |
| 1.2.2 莱菔硫烷体内抗癌机制研究 | 第16页 |
| 1.2.3 莱菔硫烷体外抑癌机制研究 | 第16-19页 |
| 1.2.3.1 化学预防机制 | 第17页 |
| 1.2.3.2 阻滞细胞周期 | 第17页 |
| 1.2.3.3 诱导细胞凋亡 | 第17-18页 |
| 1.2.3.4 降低组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性 | 第18-19页 |
| 1.2.3.5 活性氧(ROS)的生成 | 第19页 |
| 1.2.4 药代动力学研究 | 第19-20页 |
| 1.2.5 莱菔硫烷临床研究 | 第20-21页 |
| 1.3 莱菔素研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3.1 莱菔素概述及体内外抗癌机制研究 | 第21-22页 |
| 1.3.2 莱菔素与巯基类物质联合用药 | 第22页 |
| 1.4 立题背景与研究意义 | 第22-25页 |
| 第二章 莱菔素抗乳腺癌分子机制研究 | 第25-43页 |
| 2.1 前言 | 第25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第25-27页 |
| 2.2.1.1 细胞系 | 第25页 |
| 2.2.1.2 药物 | 第25页 |
| 2.2.1.3 实验试剂与耗材 | 第25-26页 |
| 2.2.1.4 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-33页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第27页 |
| 2.3.2 流式细胞检测细胞凋亡 | 第27-28页 |
| 2.3.3 流式细胞验证细胞周期 | 第28页 |
| 2.3.4 RT-PCR检测mRNA表达水平 | 第28-29页 |
| 2.3.4.1 细胞RNA的提取 | 第28页 |
| 2.3.4.2 反转录PCR | 第28-29页 |
| 2.3.4.3 RT-PCR | 第29页 |
| 2.3.5 转染质粒与siRNA | 第29-30页 |
| 2.3.5.1 构建pcDNA3.1-Egr1 | 第29页 |
| 2.3.5.2 设计并合成Egr1-siRNA | 第29-30页 |
| 2.3.6 蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测蛋白表达水平 | 第30-33页 |
| 2.3.6.1 相关溶液配制 | 第30页 |
| 2.3.6.2 总蛋白提取 | 第30页 |
| 2.3.6.3 BCA法定量蛋白质浓度 | 第30-31页 |
| 2.3.6.4 分离胶、浓缩胶的配置 | 第31-32页 |
| 2.3.6.5 电泳 | 第32页 |
| 2.3.6.6 转膜 | 第32页 |
| 2.3.6.7 封闭 | 第32页 |
| 2.3.6.8 一抗、二抗孵育 | 第32页 |
| 2.3.6.9 曙光 | 第32-33页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第33-43页 |
| 2.4.1 莱菔素诱导三阴性乳腺癌细胞凋亡并阻滞细胞周期 | 第33-35页 |
| 2.4.2 Egr1作为SFE抑制三阴性乳腺癌细胞的一个分子靶标影响细胞增殖 | 第35-38页 |
| 2.4.3 Egr1作为分子靶标诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期 | 第38-40页 |
| 2.4.4 SFE通过Egr1-cyclinB1-Cdc2通路阻滞三阴性乳腺癌细胞周期 | 第40-41页 |
| 2.4.5 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 莱菔素-谷胱甘肽结合物体内外抗癌细胞活性评价 | 第43-49页 |
| 3.1 前言 | 第43页 |
| 3.2 材料与方法 | 第43-44页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 3.2.1.1 细胞系 | 第43页 |
| 3.2.1.2 药物 | 第43-44页 |
| 3.3 实验方法 | 第44-45页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第44页 |
| 3.3.2 CCK8法检测乳腺癌细胞生长 | 第44页 |
| 3.3.3 统计学分析 | 第44页 |
| 3.3.4 体内肿瘤移植模型 | 第44-45页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第45-49页 |
| 3.4.1 SFE-GSH有效抑制多种肿瘤细胞生长 | 第45-47页 |
| 3.4.2 SFE-GSH影响三阴性乳腺癌裸鼠移植瘤生长 | 第47页 |
| 3.4.3 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 莱菔素-谷胱甘肽结合物抗乳腺癌分子机制研究 | 第49-59页 |
| 4.1 前言 | 第49页 |
| 4.2 材料与方法 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-51页 |
| 4.3.1 细胞凋亡检测 | 第49-50页 |
| 4.3.2 mRNA微阵列分析SFE-GSH结合物对MDA-MB-453细胞基因表达的影响 | 第50页 |
| 4.3.3 RT-PCR检测mRNA表达水平 | 第50-51页 |
| 4.3.4 设计并合成SCD1-siRNA | 第51页 |
| 4.3.5 Western Blot法检测目的蛋白表达水平 | 第51页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第51-59页 |
| 4.4.1 SFE-GSH结合物引起乳腺癌细胞凋亡 | 第51-52页 |
| 4.4.2 SFE-GSH结合物引起MDA-MB-453基因差异表达 | 第52-54页 |
| 4.4.3 SCD1是SFE-GSH结合物抑制乳腺癌细胞的一个分子靶标 | 第54-56页 |
| 4.4.4 讨论 | 第56-59页 |
| 第五章 结论、创新点及展望 | 第59-61页 |
| 5.1 结论 | 第59-60页 |
| 5.2 创新点 | 第60页 |
| 5.3 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 研究成果和发表的学术论文 | 第69-71页 |
| 作者和导师简介 | 第71-72页 |
| 附件 | 第72-73页 |
