| 致谢 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 木聚糖酶的应用 | 第11-12页 |
| 1.1.1 在饲料行业的应用 | 第11页 |
| 1.1.2 在食品工业中的应用 | 第11-12页 |
| 1.1.3 在造纸工业的应用 | 第12页 |
| 1.1.4 在能源产业的应用 | 第12页 |
| 1.2 木聚糖酶的分类和结构 | 第12-13页 |
| 1.3 碳水化合物结合结构域（CBM） | 第13-14页 |
| 1.4 木聚糖酶分子改造 | 第14-18页 |
| 1.4.1 酶分子的定向进化 | 第14-15页 |
| 1.4.2 酶分子的理性设计 | 第15-16页 |
| 1.4.3 融合CBM改造酶的研究 | 第16-18页 |
| 2 引言 | 第18-19页 |
| 3 材料与方法 | 第19-26页 |
| 3.1 材料 | 第19-20页 |
| 3.1.1 实验菌株和载体 | 第19页 |
| 3.1.2 试剂及药品 | 第19-20页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第20页 |
| 3.2 重组质粒的构建方法 | 第20-23页 |
| 3.2.1 质粒提取 | 第20页 |
| 3.2.2 PCR反应体系 | 第20-22页 |
| 3.2.3 酶连转化体系 | 第22-23页 |
| 3.3 重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第23-24页 |
| 3.3.1 融合酶诱导 | 第23页 |
| 3.3.2 粗酶收集 | 第23页 |
| 3.3.3 融合酶蛋白的纯化 | 第23-24页 |
| 3.4 酶学性质的测定 | 第24-26页 |
| 3.4.1 最适p H测定 | 第24页 |
| 3.4.2 最适温度测定 | 第24页 |
| 3.4.3 半衰期测定 | 第24页 |
| 3.4.4 酶促动力学 | 第24-26页 |
| 4 重组质粒的构建 | 第26-32页 |
| 4.1 反向PCR修复出发质粒 | 第26-27页 |
| 4.1.1 X-C2质粒的修复 | 第26页 |
| 4.1.2 X-C1质粒的修复 | 第26-27页 |
| 4.1.3 C1-X质粒的修复 | 第27页 |
| 4.2 重组质粒C2-X-C1和C1-X-C2的构建 | 第27-29页 |
| 4.2.1 C2-X-C1的构建 | 第27-28页 |
| 4.2.2 C1-X-C2的构建 | 第28-29页 |
| 4.3 重组质粒C2-X-C2和C1-X-C1的构建 | 第29-31页 |
| 4.3.1 优化反向PCR构建C2-X-C2重复序列质粒 | 第29-30页 |
| 4.3.2 优化反向PCR构建C1-X-C1重复序列质粒 | 第30-31页 |
| 4.4 重组质粒的测序 | 第31页 |
| 4.5 小结 | 第31-32页 |
| 5 融合酶性质的研究 | 第32-45页 |
| 5.1 诱导蛋白SDS-PAGE检测 | 第32-34页 |
| 5.1.1 SDS-PAGE检测粗酶 | 第32页 |
| 5.1.2 SDS-PAGE检测粗酶纯化后蛋白 | 第32-33页 |
| 5.1.3 包涵体复性 | 第33页 |
| 5.1.4 SDS-PAGE检测复性蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| 5.2 酶学性质的测定 | 第34-42页 |
| 5.2.1 粗酶性质的测定 | 第34-36页 |
| 5.2.2 复性酶与粗酶性质的比较 | 第36-38页 |
| 5.2.3 纯酶性质的测定 | 第38-40页 |
| 5.2.4 还原糖标准曲线 | 第40-41页 |
| 5.2.5 蛋白浓度标准曲线 | 第41页 |
| 5.2.6 酶促动力学分析 | 第41-42页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第42-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录 | 第49-56页 |
