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基于PCR技术的木材腐朽菌快速鉴定方法的研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
1 绪论第7-12页
    1.1 研究的背景和意义第7-8页
        1.1.1 木材腐朽的研究背景和意义第7页
        1.1.2 木材腐朽菌菌种鉴定的研究背景和意义第7-8页
    1.2 常见木材腐朽菌的分类第8-9页
        1.2.1 白腐菌第8-9页
        1.2.2 褐腐菌第9页
    1.3 木材腐朽菌的菌种鉴定方法第9-10页
        1.3.1 木材腐朽菌的形态学鉴定方法概述第9页
        1.3.2 基于PCR技术的木材腐朽菌分子生物学鉴定方法概述第9-10页
    1.4 国内外研究现状第10-11页
    1.5 本文的主要研究内容第11-12页
2 木材腐朽菌培养条件的优化第12-17页
    2.1 两种木材腐朽菌菌种的分离第12页
    2.2 两种木材腐朽菌培养条件的优化第12-16页
        2.2.1 固体培养时培养条件的优化第12-15页
        2.2.2 液体培养时培养条件的优化第15-16页
    2.3 本章小结第16-17页
3 木材腐朽菌的形态学鉴定第17-21页
    3.1 真菌常用形态学鉴定方法第17页
    3.2 两种木材腐朽菌培养特性的研究第17-20页
        3.2.1 菌落培养特性的研究第18-19页
        3.2.2 菌丝培养特性的研究第19-20页
        3.2.3 通过传统方法鉴定两种木材腐朽菌第20页
    3.3 本章小结第20-21页
4 PCR技术进行木材腐朽菌鉴定时引物的设计第21-28页
    4.1 PCR技术的原理第21-22页
    4.2 PCR技术的分类及研究现状第22-24页
        4.2.1 巢式PCR第22-23页
        4.2.2 实时荧光定量PCR第23-24页
        4.2.3 多重PCR技术第24页
    4.3 PCR反应在木材腐朽菌鉴定中的应用第24页
    4.4 ITS序列分析在木材腐朽菌菌种鉴定上的应用方法第24-26页
        4.4.1 以ITS区段的分子量为参考进行分子鉴定第24-25页
        4.4.2 以ITS区段的RFLP图谱作为标记特征进行分子鉴定第25页
        4.4.3 设计专一性探针进行分子杂交的鉴定方法第25页
        4.4.4 用特异性引物扩增ITS区段第25-26页
    4.5 木材腐朽菌PCR鉴定的引物选取第26页
    4.6 本章小结第26-28页
5 基于PCR技术的木材腐朽菌快速鉴定第28-35页
    5.1 两种木材腐朽菌DNA的提取与纯化第28页
    5.2 两种木材腐朽菌DNA纯度的检测第28-29页
    5.3 PCR扩增第29-31页
        5.3.1 PCR反应参数的优化第29-30页
            5.3.1.1 最适反应循环数的选择第29页
            5.3.1.2 热启动与冷启动的选择第29-30页
        5.3.2 两种木材腐朽菌的PCR扩增第30页
        5.3.3 琼脂糖凝胶电泳反应第30-31页
    5.4 PCR扩增产物的回收与测序第31-32页
        5.4.1 扩增产物的回收与纯化第31-32页
        5.4.2 DNA测序第32页
    5.5 BLAST比对第32-34页
        5.5.1 木材腐朽菌A的分子鉴定第32-33页
        5.5.2 木材腐朽菌B的分子鉴定第33-34页
    5.6 本章小结第34-35页
结论第35-36页
参考文献第36-40页
攻读学位期间发表的学术论文第40-41页
致谢第41-42页

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