摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1 绪论 | 第7-12页 |
1.1 研究的背景和意义 | 第7-8页 |
1.1.1 木材腐朽的研究背景和意义 | 第7页 |
1.1.2 木材腐朽菌菌种鉴定的研究背景和意义 | 第7-8页 |
1.2 常见木材腐朽菌的分类 | 第8-9页 |
1.2.1 白腐菌 | 第8-9页 |
1.2.2 褐腐菌 | 第9页 |
1.3 木材腐朽菌的菌种鉴定方法 | 第9-10页 |
1.3.1 木材腐朽菌的形态学鉴定方法概述 | 第9页 |
1.3.2 基于PCR技术的木材腐朽菌分子生物学鉴定方法概述 | 第9-10页 |
1.4 国内外研究现状 | 第10-11页 |
1.5 本文的主要研究内容 | 第11-12页 |
2 木材腐朽菌培养条件的优化 | 第12-17页 |
2.1 两种木材腐朽菌菌种的分离 | 第12页 |
2.2 两种木材腐朽菌培养条件的优化 | 第12-16页 |
2.2.1 固体培养时培养条件的优化 | 第12-15页 |
2.2.2 液体培养时培养条件的优化 | 第15-16页 |
2.3 本章小结 | 第16-17页 |
3 木材腐朽菌的形态学鉴定 | 第17-21页 |
3.1 真菌常用形态学鉴定方法 | 第17页 |
3.2 两种木材腐朽菌培养特性的研究 | 第17-20页 |
3.2.1 菌落培养特性的研究 | 第18-19页 |
3.2.2 菌丝培养特性的研究 | 第19-20页 |
3.2.3 通过传统方法鉴定两种木材腐朽菌 | 第20页 |
3.3 本章小结 | 第20-21页 |
4 PCR技术进行木材腐朽菌鉴定时引物的设计 | 第21-28页 |
4.1 PCR技术的原理 | 第21-22页 |
4.2 PCR技术的分类及研究现状 | 第22-24页 |
4.2.1 巢式PCR | 第22-23页 |
4.2.2 实时荧光定量PCR | 第23-24页 |
4.2.3 多重PCR技术 | 第24页 |
4.3 PCR反应在木材腐朽菌鉴定中的应用 | 第24页 |
4.4 ITS序列分析在木材腐朽菌菌种鉴定上的应用方法 | 第24-26页 |
4.4.1 以ITS区段的分子量为参考进行分子鉴定 | 第24-25页 |
4.4.2 以ITS区段的RFLP图谱作为标记特征进行分子鉴定 | 第25页 |
4.4.3 设计专一性探针进行分子杂交的鉴定方法 | 第25页 |
4.4.4 用特异性引物扩增ITS区段 | 第25-26页 |
4.5 木材腐朽菌PCR鉴定的引物选取 | 第26页 |
4.6 本章小结 | 第26-28页 |
5 基于PCR技术的木材腐朽菌快速鉴定 | 第28-35页 |
5.1 两种木材腐朽菌DNA的提取与纯化 | 第28页 |
5.2 两种木材腐朽菌DNA纯度的检测 | 第28-29页 |
5.3 PCR扩增 | 第29-31页 |
5.3.1 PCR反应参数的优化 | 第29-30页 |
5.3.1.1 最适反应循环数的选择 | 第29页 |
5.3.1.2 热启动与冷启动的选择 | 第29-30页 |
5.3.2 两种木材腐朽菌的PCR扩增 | 第30页 |
5.3.3 琼脂糖凝胶电泳反应 | 第30-31页 |
5.4 PCR扩增产物的回收与测序 | 第31-32页 |
5.4.1 扩增产物的回收与纯化 | 第31-32页 |
5.4.2 DNA测序 | 第32页 |
5.5 BLAST比对 | 第32-34页 |
5.5.1 木材腐朽菌A的分子鉴定 | 第32-33页 |
5.5.2 木材腐朽菌B的分子鉴定 | 第33-34页 |
5.6 本章小结 | 第34-35页 |
结论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-40页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |