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侧柏古树端粒相关基因克隆及其抗逆功能研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第一章 绪论第19-32页
    1.1 研究目的与意义第19-20页
    1.2 端粒研究进展第20-27页
        1.2.1 端粒相关蛋白第21-26页
        1.2.2 端粒与年龄第26-27页
    1.3 端粒与衰老其它方面的关系第27-29页
        1.3.1 端粒与活性氧第27-28页
        1.3.2 端粒与激素第28-29页
    1.4 古树研究进展第29-30页
    1.5 研究内容第30-31页
    1.6 研究技术路线第31-32页
第二章 不同年龄侧柏叶片转录组分析第32-52页
    2.1 实验材料第32-33页
    2.2 实验方法第33-35页
        2.2.1 总RNA提取第33页
        2.2.2 cDNA文库建立和高通量测序第33-34页
        2.2.3 转录组组装和功能注释第34页
        2.2.4 侧柏转录组SSR位点分析第34页
        2.2.5 端粒相关基因qRT-PCR分析第34-35页
    2.3 结果与分析第35-50页
        2.3.1 侧柏转录组de novo组装第35-39页
        2.3.2 侧柏转录组功能注释比较第39-40页
        2.3.3 侧柏转录组Unigene的GO功能注释第40-41页
        2.3.4 Unigene的COG功能注释第41-43页
        2.3.5 Unigene的KEGG功能注释第43-44页
        2.3.6 侧柏转录组中SSR位点的频率和分布第44-47页
        2.3.7 侧柏转录组SSR位点的基序重复数及其分布第47-49页
        2.3.8 端粒相关基因在不同年龄侧柏中的表达模式第49-50页
    2.4 讨论第50-52页
第三章 NaCl和H_2O_2胁迫及外源ABA对侧柏活性氧代谢和端粒相关基因的影响第52-67页
    3.1 实验材料第53页
    3.2 实验方法第53-56页
        3.2.1 材料培养及处理第53页
        3.2.2 生理指标测定第53-55页
        3.2.3 基因定量表达分析第55页
        3.2.4 数据处理第55-56页
    3.3 结果与分析第56-63页
        3.3.1 ABA对NaCl胁迫下侧柏活性氧代谢及相关基因的影响第56-59页
        3.3.2 ABA对NaCl胁迫下侧柏端粒相关基因表达的影响第59页
        3.3.3 ABA对H_2O_2胁迫下侧柏活性氧代谢及相关基因的影响第59-63页
        3.3.4 ABA对H_2O_2胁迫下侧柏端粒相关基因表达的影响第63页
    3.4 讨论第63-67页
第四章 PoWHY1基因克隆及抗逆功能鉴定第67-93页
    4.1 实验材料第67-68页
        4.1.1 植物材料、菌株及质粒载体第67-68页
        4.1.2 酶和化学试剂第68页
        4.1.3 培养基配制第68页
    4.2 实验方法第68-77页
        4.2.1 侧柏PoWHY1基因克隆第68-71页
        4.2.2 侧柏PoWHY1生物信息学分析第71-72页
        4.2.3 侧柏PoWHY1基因表达分析第72-73页
        4.2.4 PoWHY1过表达载体构建第73页
        4.2.5 农杆菌电击转化第73-74页
        4.2.6 农杆菌介导转化拟南芥及转基因阳性植株筛选第74-75页
        4.2.7 转PoWHY1基因拟南芥基因表达水平检测第75页
        4.2.8 转PoWHY1基因拟南芥对非生物胁迫耐受性分析第75-77页
        4.2.9 数据处理第77页
    4.3 结果与分析第77-90页
        4.3.1 PoWHY1基因克隆第77-79页
        4.3.2 PoWHY1生物信息学分析第79-81页
        4.3.3 PoWHY1基因在不同组织中的表达模式第81-82页
        4.3.4 PoWHY1基因的非生物胁迫响应第82-83页
        4.3.5 ABA调控侧柏PoWHY1表达第83页
        4.3.6 转PoWHY1基因拟南芥阳性植株的筛选第83-84页
        4.3.7 转PoWHY1基因拟南芥株系的分子鉴定第84页
        4.3.8 转基因纯合株系中PoWHY1的表达水平第84-85页
        4.3.9 PoWHY1基因过表达对拟南芥盐和干旱胁迫的影响第85-90页
    4.4 讨论第90-93页
第五章 PoKub3基因抗逆功能鉴定第93-111页
    5.1 实验材料第93-94页
    5.2 实验方法第94-96页
        5.2.1 侧柏PoKub3生物信息学分析第94页
        5.2.2 侧柏PoKub3基因表达分析第94页
        5.2.3 PoKub3基因过表达载体构建及农杆菌转化拟南芥第94页
        5.2.4 转PoKub3基因拟南芥基因表达水平检测第94-95页
        5.2.5 转PoKub3基因拟南芥对非生物胁迫耐受性分析第95-96页
        5.2.6 数据处理第96页
    5.3 结果与分析第96-107页
        5.3.1 PoKub3生物信息学分析第96-98页
        5.3.2 PoKub3基因在不同组织中的表达模式第98页
        5.3.3 PoKub3基因的非生物胁迫响应第98-99页
        5.3.4 ABA调控侧柏PoKub3表达第99页
        5.3.5 转PoKub3基因拟南芥株系的分子鉴定第99-100页
        5.3.6 转基因纯合株系中PoKub3的表达水平第100-101页
        5.3.7 PoKub3基因过表达对拟南芥盐和干旱胁迫的影响第101-107页
    5.4 讨论第107-111页
第六章 PoTRF1基因抗逆功能鉴定第111-121页
    6.1 实验材料第111页
    6.2 实验方法第111-113页
        6.2.1 侧柏PoTRF1生物信息学分析第111-112页
        6.2.2 侧柏PoTRF1基因表达分析第112页
        6.2.3 PoTRF1基因过表达载体构建及农杆菌转化拟南芥第112页
        6.2.4 PoTRF1转基因拟南芥基因表达水平检测第112页
        6.2.5 PoTRF1转基因拟南芥对盐胁迫耐受性分析第112-113页
        6.2.6 数据处理第113页
    6.3 结果与分析第113-119页
        6.3.1 PoTRF1生物信息学分析第113-115页
        6.3.2 PoTRF1基因在不同组织中的表达模式第115-116页
        6.3.3 PoTRF1基因的非生物胁迫响应第116-117页
        6.3.4 ABA调控侧柏PoTRF1表达第117页
        6.3.5 转PoTRF1基因拟南芥株系的分子鉴定第117页
        6.3.6 转基因纯合株系中PoTRF1的表达水平第117-118页
        6.3.7 PoTRF1基因过表达对拟南芥盐胁迫的影响第118-119页
    6.4 讨论第119-121页
第七章 结论与展望第121-123页
    7.1 结论第121-122页
    7.2 展望第122-123页
参考文献第123-144页
附录第144-145页
在读期间的学术研究第145-146页
致谢第146页

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