| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 铬、GTF与糖尿病 | 第11-13页 |
| 1.1.1 铬的理化性质及生物学作用 | 第11页 |
| 1.1.2 GTF的发现与国内外研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.3 GTF与铬、糖尿病 | 第12-13页 |
| 1.2 富铬酵母发酵制备GTF | 第13-14页 |
| 1.3 GTF的分离纯化研究 | 第14页 |
| 1.4 GTF生物活性分析方法 | 第14页 |
| 1.5 GTF作用机理 | 第14-15页 |
| 1.6 论文研究目的、意义及研究内容 | 第15-17页 |
| 1.6.1 论文研究目的、意义 | 第15页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-31页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第17-19页 |
| 2.1.1 主要原材料 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17-19页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-31页 |
| 2.2.1 逐级富铬驯化实验研究 | 第19-20页 |
| 2.2.2 发酵工艺的研究 | 第20-21页 |
| 2.2.3 GTF的分离纯化研究 | 第21-23页 |
| 2.2.4 GTF结构的研究 | 第23-26页 |
| 2.2.5 Hep-G2细胞培养 | 第26页 |
| 2.2.6 Hep-G2细胞胰岛素抵抗细胞模型的建立及鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.7 Western-Blot检测细胞模型中IRS-2蛋白表达及酪氨酸磷酸化水平 | 第27-28页 |
| 2.2.8 GTF对胰岛素抵抗型Hep-G2细胞葡萄糖代谢的作用 | 第28-29页 |
| 2.2.9 GTF对胰岛素抵抗型细胞脂肪代谢的作用 | 第29页 |
| 2.2.10 公式计算 | 第29-31页 |
| 3 结果与讨论 | 第31-51页 |
| 3.1 YSI-3.7啤酒酵母逐级富铬驯化实验研究 | 第31-33页 |
| 3.1.1 耐铬YSI-3.7啤酒酵母酵母平板初筛 | 第31页 |
| 3.1.2 含铬培养液摇瓶发酵复筛 | 第31-32页 |
| 3.1.3 逐级扩大发酵规模实验研究 | 第32-33页 |
| 3.2 葡萄糖耐量因子提取纯化的研究 | 第33-39页 |
| 3.2.1 乙醇提取方法的研究 | 第33-37页 |
| 3.2.2 Superdex~(TM)75凝胶层析 | 第37-38页 |
| 3.2.3 Sephadex G25凝胶层析 | 第38-39页 |
| 3.2.4 高效液相色谱分析 | 第39页 |
| 3.3 GTF结构解析 | 第39-45页 |
| 3.3.1 紫外全波长扫描 | 第39-40页 |
| 3.3.2 GTF氨基酸组成分析 | 第40-41页 |
| 3.3.3 HPLC-ICP-MS联用分析GTF中的铬价态 | 第41-44页 |
| 3.3.4 核磁共振对GTF结构的初步解析 | 第44-45页 |
| 3.4 Hep-G2细胞胰岛素抵抗模型的建立及评价 | 第45-48页 |
| 3.4.1 胰岛素对Hep-G2细胞活性的影响(MTT法) | 第45页 |
| 3.4.2 胰岛素作用浓度对胰岛素抵抗细胞模型的作用 | 第45-46页 |
| 3.4.3 胰岛素作用时间对胰岛素抵抗细胞模型的作用 | 第46页 |
| 3.4.4 胰岛素抵抗模型抵抗持续性的研究 | 第46-47页 |
| 3.4.5 Western-Blot检测模型细胞中IRS-2蛋白表达及其酪氨酸磷酸化程度 | 第47-48页 |
| 3.5 GTF对Hep-G2胰岛素抵抗型细胞葡萄糖代谢的影晌 | 第48-51页 |
| 3.5.1 GTF作用浓度对细胞葡萄糖代谢的影响 | 第48页 |
| 3.5.2 GTF作用时间对细胞葡萄糖代谢的影响 | 第48-49页 |
| 3.5.3 GTF及其他铬制剂对细胞葡萄糖代谢的影响 | 第49-50页 |
| 3.5.4 GTF及其他铬制剂对细胞脂肪代谢的作用 | 第50-51页 |
| 4 结论 | 第51-53页 |
| 5 展望 | 第53-54页 |
| 6 参考文献 | 第54-61页 |
| 7 攻读学位期间发表论文情况 | 第61-62页 |
| 8 致谢 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
