摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩写词汇表 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-25页 |
1.1 植物雄性不育研究概况 | 第12-15页 |
1.1.1 植物雄性不育分类 | 第12-14页 |
1.1.2 玉米雄性不育的应用 | 第14-15页 |
1.2 植物雄性不育的细胞学基础 | 第15-17页 |
1.2.1 花药的发育过程 | 第15-16页 |
1.2.2 花粉败育的细胞学研究 | 第16-17页 |
1.3 植物雄性不育的机理研究 | 第17-21页 |
1.3.1 细胞质雄性不育机理研究 | 第18-19页 |
1.3.2 细胞核雄性不育机理研究 | 第19-21页 |
1.4 植物蛋白质组学研究概况 | 第21-24页 |
1.4.1 蛋白质组学 | 第21-22页 |
1.4.2 蛋白质组学研究方法 | 第22页 |
1.4.3 蛋白质组学在植物雄性不育研究中的应用 | 第22-24页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
2 材料和方法 | 第25-33页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.2 蛋白质提取及定量分析 | 第26-29页 |
2.2.1 蛋白质提取 | 第26页 |
2.2.2 蛋白质Bradford法定量 | 第26页 |
2.2.3 蛋白质酶解 | 第26-27页 |
2.2.4 iTRAQ标记 | 第27页 |
2.2.5 SCX分离 | 第27页 |
2.2.6 基于Triple TOF 5600的LC-ESI-MSMS分析 | 第27-28页 |
2.2.7 蛋白质定性及定量分析 | 第28页 |
2.2.8 数据分析及生物信息分析 | 第28-29页 |
2.3 Western blot方法验证差异表达蛋白 | 第29-30页 |
2.3.1 提取花药总蛋白 | 第29页 |
2.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29页 |
2.3.3 转膜 | 第29页 |
2.3.4 杂交和显色 | 第29-30页 |
2.4 荧光定量PCR | 第30-32页 |
2.4.1 RNA提取及定量 | 第30-31页 |
2.4.2 反转录合成cDNA第一条链 | 第31页 |
2.4.3 荧光定量PCR反应 | 第31-32页 |
2.5 蜡质和角质的含量测定 | 第32-33页 |
2.5.1 花药蜡质的萃取及含量 | 第32页 |
2.5.2 花药角质的萃取及含量 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-48页 |
3.1 蛋白质鉴定结果 | 第33-40页 |
3.1.1 蛋白质鉴定质量评估 | 第33页 |
3.1.2 蛋白质鉴定结果统计 | 第33-34页 |
3.1.3 蛋白质相对分子量、肽段长度、数量及序列覆盖度分布 | 第34-35页 |
3.1.4 GO分析 | 第35-36页 |
3.1.5 COG注释 | 第36-37页 |
3.1.6 Pathway代谢通路注释 | 第37-38页 |
3.1.7 不同时期育性鉴定蛋白表达模式聚类 | 第38-40页 |
3.2 育性差异表达蛋白鉴定分析 | 第40-44页 |
3.2.1 差异表达蛋白数量统计 | 第40页 |
3.2.2 差异表达蛋白GO富集分析 | 第40-41页 |
3.2.3 差异表达蛋白COG分类分析 | 第41-43页 |
3.2.4 差异表达蛋白Pathway富集分析 | 第43-44页 |
3.3 Western blot验证结果 | 第44-45页 |
3.4 实时荧光定量结果 | 第45-47页 |
3.5 蜡质和角质含量 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-54页 |
4.1 蛋白质表达谱及差异表达蛋白分析 | 第48-49页 |
4.2 碳水化合物和能量代谢与育性的关系 | 第49-51页 |
4.3 蛋白质和核糖体合成与育性的关系 | 第51-52页 |
4.4 脂肪酸链延长和脂质代谢与育性的关系 | 第52-54页 |
5 结论 | 第54-56页 |
附录 | 第56-66页 |
参考文献 | 第66-77页 |
致谢 | 第77页 |