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鸭甲肝病毒1型和3型抗体间接ELISA检测方法的建立与应用

符号说明第1-9页
中文摘要第9-11页
英文摘要第11-14页
1 引言第14-27页
   ·鸭病毒性肝炎的简述第14-16页
     ·鸭病毒性肝炎的发病史第14-15页
     ·Ⅰ型鸭肝炎(DHAV)的变异株第15-16页
   ·DHAV基因组结构及功能第16-17页
   ·DHAV病原学特点第17-18页
     ·DHAV形态学第17页
     ·DHAV对理化因素的抵抗力第17-18页
     ·DHAV的培养特性第18页
     ·DHAV的致病力第18页
   ·DHAV的流行病学研究第18-19页
   ·DHAV的诊断方法第19-24页
     ·根据临床症状进行初步诊断第19页
     ·病理剖检第19-20页
     ·病理组织学诊断第20页
     ·病原学诊断第20-21页
     ·血清学检测第21-23页
     ·分子生物学检测第23-24页
   ·DHAV的防控措施第24-26页
     ·疫苗、抗血清和卵黄抗体的预防及治疗第24-25页
     ·药物预防第25页
     ·生物安全措施第25-26页
   ·VP1和VP3蛋白第26页
   ·本研究的目的及意义第26-27页
2. 材料与方法第27-41页
   ·材料第27-30页
     ·病毒、菌株、载体、阳性血清、实验动物第27页
     ·主要仪器第27页
     ·主要试剂第27-28页
     ·主要试剂的配制第28-30页
   ·方法第30-41页
     ·鸭甲肝病毒 1VP3和 3VP1基因的克隆及序列分析第30-35页
     ·含鸭甲肝病毒 1VP3和 3VP1基因的克隆表达第35-41页
3 结果与分析第41-54页
   ·鸭病毒性肝炎 1VP3和 3VP1基因扩增与基因序列分析第41-43页
     ·1VP3基因的克隆第41-42页
     ·3VP1基因的克隆第42页
     ·VP3和 3VP1基因的序列分析第42-43页
   ·含鸭甲肝病毒 1VP3和 3VP1重组载体的构建及诱导表达第43-47页
     ·含 1VP3和 3VP1基因的表达载体的构建第43页
     ·重组菌的诱导表达第43-45页
     ·重组蛋白的Western blot分析第45-47页
   ·检测DHAV-1 和DHAV-3 抗体的的间接ELISA方法的确立第47-54页
     ·抗原最适包被浓度与血清最佳稀释度的确定第47-48页
     ·抗原最佳包被条件的确定第48页
     ·间接ELISA最佳封闭液的确定第48页
     ·最佳封闭时间的确定第48-49页
     ·二抗工作浓度的确定第49页
     ·ELISA阴阳性临界值的确定第49-50页
     ·特异性试验第50-51页
     ·敏感性实验第51页
     ·重复性试验第51-52页
     ·血清样品单一稀释度计算ET直线方程的建立第52-53页
     ·间接ELISA方法与中和试验的对比第53页
     ·间接ELISA方法的应用第53-54页
4 讨论第54-57页
5 结论第57-58页
参考文献第58-65页
致谢第65-67页
攻读学位期间发表论文情况第67页

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