| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·海岛棉育种现状 | 第13页 |
| ·棉花枯萎病的危害 | 第13-16页 |
| ·棉花枯萎病的分类 | 第13-14页 |
| ·棉花枯萎病致病机制 | 第14页 |
| ·植物抗病机制 | 第14-16页 |
| ·转录因子 | 第16-19页 |
| ·植物中与抗病相关的转录因子 | 第17-18页 |
| ·WRKY家族转录因子的研究现状及分析 | 第18-19页 |
| ·电子克隆技术 | 第19-20页 |
| ·表达序列标签 | 第20页 |
| ·电子克隆的基本原理与流程 | 第20页 |
| ·棉花转基因的主要方法 | 第20-22页 |
| ·花粉管通道法 | 第21页 |
| ·基因枪法 | 第21页 |
| ·农杆菌介导法 | 第21-22页 |
| ·研究目的及意义 | 第22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 棉花WRKY转录因子基因的克隆与表达特性分析 | 第23-42页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·植物材料与菌株 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-29页 |
| ·材料种植 | 第25页 |
| ·枯萎病菌和激素的处理 | 第25页 |
| ·棉花根部总RNA的提取 | 第25-26页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第26页 |
| ·GhWRKY1和Gh WRKY2基因的克隆与生物信息学分析 | 第26-28页 |
| ·生物信息学分析 | 第28-29页 |
| ·基因的表达特性分析 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-42页 |
| ·基因的克隆及序列分析 | 第29-38页 |
| ·基因的实时荧光定量分析 | 第38-42页 |
| 第三章 GhWRKY44和GhWRKY22基因的烟草转化 | 第42-57页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·材料与菌株 | 第42页 |
| ·培养基配方 | 第42页 |
| ·引物 | 第42页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·农杆菌感受态细胞制备 | 第43页 |
| ·植物过表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第44-45页 |
| ·T1转基因阳性植株卡那筛选及RT-PCR鉴定 | 第45页 |
| ·转基因烟草枯萎病菌的处理 | 第45页 |
| ·转基因烟草中抗性基因的表达特性分析 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-57页 |
| ·植物表达载体的构建与鉴定 | 第46-47页 |
| ·植物表达载体的农杆菌转化 | 第47页 |
| ·烟草遗传转化与阳性植株检测 | 第47-50页 |
| ·抗病相关基因的表达分析 | 第50-57页 |
| 第四章 利用农杆菌侵染花柱头法进行海岛棉遗传转化 | 第57-61页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·植物材料与菌株 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-58页 |
| ·菌液的制备 | 第57页 |
| ·菌液的活化 | 第57页 |
| ·农杆菌侵染花柱头法转化目的基因 | 第57-58页 |
| ·T_1代转基因植株的室内卡那霉素检测 | 第58页 |
| ·抗性植株的PCR检测 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-61页 |
| ·T_0代植株成铃率统计 | 第58-59页 |
| ·转基因后代的检测 | 第59-61页 |
| 第五章 讨论 | 第61-65页 |
| ·GhWRKY44和GhWRKY22的表达模式分析 | 第61-62页 |
| ·GhWRKY44和GhWRKY22的功能分析 | 第62-63页 |
| ·GhWRKY44基因、GhWRKY22基因的田间棉花遗传转化 | 第63-65页 |
| 第六章 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72-73页 |
| 附件 | 第73页 |
