| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 中英文缩写词 | 第11-12页 |
| 文献综述 | 第12-19页 |
| 引言 | 第19-20页 |
| 1 材料与方法 | 第20-30页 |
| ·菌种与载体 | 第20页 |
| ·主要工具酶及试剂盒 | 第20页 |
| ·其他相关试剂与标准参照物 | 第20页 |
| ·仪器设备 | 第20-21页 |
| ·cSP-A基因的克隆 | 第21-23页 |
| ·鸡肺组织中总RNA提取 | 第21页 |
| ·RNA提取质量的检测 | 第21页 |
| ·反转录合成cDNA | 第21-22页 |
| ·cSP-A基因的克隆 | 第22页 |
| ·cSP-A基因的连接与转化 | 第22-23页 |
| ·阳性转化子筛选鉴定 | 第23页 |
| ·cSP-A序列的比对与分析 | 第23页 |
| ·cSP-A-CRD的原核表达 | 第23-25页 |
| ·cSP-A-CRD优化基因的合成 | 第23页 |
| ·表达载体pGEX-6P-1-cSP-A-CRD的构建 | 第23-24页 |
| ·阳性转化子的筛选鉴定 | 第24页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白的诱导表达 | 第24-25页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白的诱导最佳温度的筛选 | 第25页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白的诱导剂浓度的优化 | 第25页 |
| ·抗cSP-A-CRD融合蛋白多克隆抗体的制备 | 第25-27页 |
| ·重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第26页 |
| ·重组蛋白多克隆抗体的制备 | 第26页 |
| ·多抗效价的测定 | 第26-27页 |
| ·抗cSP-A-CRD多克隆抗体的Western blot法鉴定 | 第27页 |
| ·抗cSP-A-CRD融合蛋白多克隆抗体应用 | 第27页 |
| ·抗cSP-A-CRD多克隆抗体对cSP-A特异性检测 | 第27页 |
| ·鸡肺组织石蜡切片的制作 | 第27页 |
| ·间接免疫荧光法检测各组织cSP-A的分布 | 第27页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白部分生物学活性的检测 | 第27-30页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白切胶回收 | 第27-28页 |
| ·鸡cSP-A-CRD融合蛋白凝集活性的检测 | 第28页 |
| ·鸡cSP-A-CRD融合蛋白抑菌活性的检测 | 第28-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-42页 |
| ·cSP-A基因的克隆结果 | 第30页 |
| ·试验样品RNA质量的检测结果 | 第30页 |
| ·cSP-A基因的克隆结果 | 第30页 |
| ·cSP-A基因阳性转化子测序结果 | 第30页 |
| ·cSP-A的序列分析及结构预测 | 第30-34页 |
| ·cSP-ADNA序列分析 | 第31页 |
| ·cSP-A氨基酸序列分析 | 第31-32页 |
| ·cSP-A蛋白特性预测分析 | 第32-33页 |
| ·cSP-A高级结构分析 | 第33-34页 |
| ·cSP-A-CRD的原核表达 | 第34-36页 |
| ·表达载体pGEX-6P-1-cSP-A-CRD的构建 | 第35页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白的诱导表达 | 第35页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白IPTG诱导浓度的优化 | 第35-36页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白诱导温度的优化 | 第36页 |
| ·抗cSP-A-CRD多抗的制备及效价测定 | 第36-37页 |
| ·抗cSP-A-CRD多抗的制备 | 第36-37页 |
| ·抗cSP-A-CRD多抗效价的测定 | 第37页 |
| ·重组蛋白多克隆抗体的特异性分析 | 第37页 |
| ·健康鸡只呼吸系统SP-A分布 | 第37-38页 |
| ·抗cSP-A-CRD多抗对cSP-A的特异性分析 | 第37-38页 |
| ·间接免疫荧光检测cSP-A分布 | 第38页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白部分生物学活性检测 | 第38-42页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白切胶回收 | 第38-39页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白凝集活性检测 | 第39-40页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白抑菌活性的检测 | 第40-42页 |
| 3 讨论 | 第42-45页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第42-43页 |
| ·cSP-A-CRD原核表达系统的构建与密码子优化 | 第43页 |
| ·cSP-A-CRD融合蛋白的表达及纯化 | 第43-44页 |
| ·cSP-A-CRD的生物学活性 | 第44-45页 |
| 4 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |
