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新型光学生物传感方法的构建及其在环境检测中的应用

致谢第1-5页
摘要第5-8页
Abstract第8-22页
1 绪论第22-40页
   ·光学生物传感方法的简介第22-23页
   ·光学生物传感方法的分类第23-30页
     ·基于响应过程的光学生物传感方法的分类第23页
       ·催化型光学生物传感方法第23页
       ·亲和型光学生物传感方法第23页
     ·基于生物识别元件的光学生物传感方法的分类第23-30页
       ·基于生物酶的光学生物传感方法第24-25页
       ·基于抗原抗体反应的光学生物传感方法第25-27页
       ·基于核酸适配体的光学生物传感方法第27-29页
       ·基于活细胞的光学生物传感方法第29-30页
   ·光学生物传感方法在环境分析领域的应用第30-36页
     ·重金属的光学生物传感方法第30-31页
     ·持久性有机污染物的光学生物传感方法第31-32页
     ·农药的光学生物传感方法第32-34页
     ·环境激素的光学生物传感方法第34-36页
   ·本文的研究思路及研究内容第36-40页
2 基于生物元件荧光铁载体检测痕量二价铜离子第40-54页
   ·引言第40-41页
   ·实验部分第41-44页
     ·试剂与材料第41页
     ·仪器第41页
     ·铜绿假单胞菌PA1的分离与鉴定第41-42页
     ·荧光铁载体的纯化第42-43页
     ·分析检测过程第43-44页
   ·结果与讨论第44-53页
     ·荧光铁载体对铜离子的检测原理第44-46页
     ·铜绿假单胞菌PA1的分离与鉴定第46-47页
     ·荧光铁载体作为生物传感器检测铜离子第47-48页
     ·荧光铁载体检测铜离子条件的优化第48-49页
     ·荧光铁载体对铜离子检测的特异性及灵敏度第49-51页
     ·荧光铁载体生物传感器的重复利用第51-52页
     ·荧光铁载体对实际加标样品中铜离子的检测第52-53页
   ·小结第53-54页
3 基于生物元件荧光铁载体检测渔药呋喃唑酮第54-64页
   ·引言第54-55页
   ·实验部分第55-57页
     ·试剂与材料第55页
     ·仪器第55页
     ·荧光铁载体检测呋喃唑酮的特异性和抗干扰能力第55-56页
     ·荧光铁载体检测呋喃唑酮的灵敏度第56页
     ·荧光铁载体检测实际加标水样中的呋喃唑酮第56-57页
   ·结果与讨论第57-63页
     ·荧光铁载体对呋喃唑酮的检测原理第57-58页
     ·荧光铁载体作为生物传感器检测呋喃唑酮第58-59页
     ·荧光铁载体检测呋喃唑酮条件的优化第59-60页
     ·荧光铁载体对呋喃唑酮检测的特异性及抗干扰能力第60-61页
     ·荧光铁载体对呋喃唑酮检测的灵敏度第61-62页
     ·荧光铁载体对实际样品中加标呋喃唑酮的检测第62-63页
   ·小结第63-64页
4 基于半胱氨酸催化氧化超灵敏检测二价铜离子第64-86页
   ·引言第64-65页
   ·实验部分第65-67页
     ·试剂与材料第65页
     ·仪器第65页
     ·半胱氨酸和 2,4-二硝基氯苯的颜色反应第65-66页
     ·基于半胱氨酸催化氧化检测铜离子第66页
     ·检测机理第66页
     ·检测铜离子的特异性与抗干扰能力第66页
     ·检测铜离子的灵敏度第66-67页
     ·检测实际样品中的铜离子第67页
   ·结果与讨论第67-84页
     ·基于半胱氨酸催化氧化超灵敏检测二价铜离子的检测原理第67-74页
     ·半胱氨酸和CDNB的颜色反应第74-76页
     ·检测二价铜离子的条件优化第76-79页
     ·比色生物传感器对二价铜离子检测的特异性及抗干扰能力第79-81页
     ·比色生物传感器对二价铜离子检测的灵敏度第81-82页
     ·比色生物传感器对实际样品中二价铜离子的检测第82页
     ·二价铜离子检测方法比较第82-84页
   ·小结第84-86页
5 基于羧酸酯酶E2的表面展示体系吸附和检测汞离子第86-114页
   ·引言第86-87页
   ·实验部分第87-98页
     ·试剂与材料第87页
     ·仪器第87页
     ·铜绿假单胞菌PA1的染色体DNA的抽提第87-88页
     ·羧酸酯酶E2基因序列的获取第88-90页
     ·pBTA2质粒的准备第90页
     ·表面展示体系的构建第90-91页
     ·羧酸酯酶E2蛋白的获取第91-93页
       ·pETE2表达载体的构建第91页
       ·pETE2表达载体的转化第91-92页
       ·羧酸酯酶E2的诱导表达第92页
       ·羧酸酯酶E2的纯化第92-93页
       ·羧酸酯酶E2纯化后的蛋白凝胶电泳分析第93页
     ·羧酸酯酶E2抗体的获取第93页
     ·表面展示工程菌不同区域蛋白的提取第93-94页
       ·表面展示工程菌全蛋白的提取第93-94页
       ·表面展示工程菌细菌膜蛋白的提取第94页
       ·表面展示工程菌细菌细胞质蛋白的方法第94页
     ·表面展示工程菌表面表达羧酸酯酶E2的免疫组化验证第94-95页
     ·构建的表面表达载体质粒的稳定性和存活率第95页
     ·表面展示体系对汞离子的吸附第95-96页
     ·表面展示体系对汞离子吸附的透射电镜分析第96页
     ·用豆芽检测表面展示体系对汞离子的吸附效果第96-97页
     ·表面展示体系的再生重复利用第97页
     ·表面展示体系对汞离子的检测第97-98页
   ·结果与讨论第98-112页
     ·表面展示体系的设计第98-99页
     ·表面展示体系的构建第99-101页
     ·表面展示体系对汞离子的吸附第101-107页
       ·表面展示体系对汞离子的吸附容量第101页
       ·表面展示体系对汞离子的吸附选择性与抗干扰能力第101-102页
       ·表面展示体系对汞离子的吸附模型第102-103页
       ·表面展示体系对汞离子吸附的透射电镜分析第103-105页
       ·pH对表面展示体系汞离子吸附的影响及体系的再生第105-106页
       ·表面展示体系吸附汞离子后对豆芽的保护作用第106-107页
     ·表面展示体系对汞离子的检测第107-112页
       ·表面展示体系对汞离子的识别第107-108页
       ·表面展示体系对汞离子检测条件的优化第108-109页
       ·表面展示体系对汞离子检测的特异性与抗干扰能力第109-110页
       ·表面展示体系对汞离子检测的灵敏度第110-111页
       ·表面展示体系对实际样品中汞离子的检测第111-112页
   ·小结第112-114页
6 基于近红外荧光探针检测环境毒素胁迫下线粒体半胱氨酸变化第114-142页
   ·引言第114-115页
   ·实验部分第115-121页
     ·试剂与材料第115-116页
     ·仪器第116页
     ·探针Cy-NB的合成第116-119页
       ·化合物一的合成第116页
       ·化合物二的合成第116-117页
       ·化合物三的合成第117页
       ·化合物四的合成第117-118页
       ·探针Cy-NB的合成第118页
       ·对照探针Cy-B的合成第118-119页
     ·探针Cy-NB对半胱氨酸的体外波谱检测第119页
     ·细胞培养和激光共聚焦实验第119-120页
     ·探针Cy-NB的细胞毒性实验第120页
     ·小鼠的饲养及活体成像第120页
     ·高效液相色谱实验第120-121页
     ·高效液相色谱-质谱联用实验第121页
   ·结果与讨论第121-139页
     ·荧光探针Cy-NB的设计第121-122页
     ·荧光探针Cy-NB对半胱氨酸的识别机理第122-125页
     ·荧光探针Cy-NB对半胱氨酸检测条件的优化第125-127页
     ·荧光探针Cy-NB对半胱氨酸的检测波谱第127-129页
       ·荧光探针Cy-NB对半胱氨酸的紫外波谱检测第127-128页
       ·荧光探针Cy-NB对半胱氨酸的荧光波谱检测第128-129页
     ·荧光探针Cy-NB对半胱氨酸检测的特异性第129-132页
     ·荧光探针Cy-NB对活细胞内半胱氨酸检测的特异性第132-133页
     ·荧光探针Cy-NB的细胞毒性第133-134页
     ·荧光探针Cy-NB的线粒体定位第134-136页
     ·荧光探针Cy-NB对线粒体内氧化胁迫状态的评估第136-137页
     ·荧光探针Cy-NB对活体水平氧化胁迫状态的评估第137-139页
   ·小结第139-142页
7 基于荧光探针检测雌激素己烯雌酚第142-156页
   ·引言第142-143页
   ·实验部分第143-145页
     ·试剂与材料第143页
     ·仪器第143页
     ·探针Cy-DES的合成第143-144页
     ·探针Cy-DES检测己烯雌酚第144页
     ·探针Cy-DES对实际加标样品中己烯雌酚的检测第144-145页
   ·结果与讨论第145-154页
     ·探针Cy-DES对己烯雌酚的检测原理第145-148页
     ·探针Cy-DES的稳定性第148-149页
     ·探针Cy-DES对己烯雌酚检测的条件优化第149-150页
     ·探针Cy-DES对己烯雌酚检测的灵敏度第150-152页
     ·探针Cy-DES对己烯雌酚检测的特异性第152-153页
     ·探针Cy-DES对实际加标样品中己烯雌酚的检测第153-154页
   ·小结第154-156页
8 全文总结与展望第156-160页
   ·全文总结第156-158页
   ·展望第158-160页
参考文献第160-184页
个人简介第184-186页
攻读博士学位期间发表的论文与研究成果第186-188页

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