| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 缩略词 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-41页 |
| ·流感病毒的病原学 | 第15-20页 |
| ·形态结构 | 第15-16页 |
| ·基因组及其编码蛋白 | 第16-18页 |
| ·病毒的复制周期 | 第18页 |
| ·机体对流感病毒的免疫应答 | 第18-19页 |
| ·流感病毒疫苗 | 第19-20页 |
| ·流感病毒的宿主范围 | 第20-21页 |
| ·流感病毒实验动物模型进展 | 第21-29页 |
| ·小鼠(Mouse) | 第21-24页 |
| ·雪貂(Ferret) | 第24-25页 |
| ·豚鼠(Guinea Pig) | 第25-26页 |
| ·棉鼠(Cotton Rat) | 第26页 |
| ·叙利亚金黄地鼠(Hamster) | 第26-27页 |
| ·非人灵长类动物(Non-human Primates) | 第27-28页 |
| ·其他动物模型 | 第28-29页 |
| ·哮喘AHR研究进展及模型 | 第29-32页 |
| ·哮喘疾病的类型 | 第29-30页 |
| ·ILC2与哮喘的发生 | 第30-31页 |
| ·哮喘治疗进展 | 第31页 |
| ·哮喘动物模型及指标检测 | 第31-32页 |
| ·抗流感病毒药物研究进展 | 第32-40页 |
| ·神经氨酸酶抑制类药物 | 第32-34页 |
| ·M2粒子通道抑制类药物 | 第34-38页 |
| ·药物的毒副作用逐渐显现 | 第38页 |
| ·体外M2离子通道抑制剂验证模型 | 第38页 |
| ·新型抗病毒药物的开发 | 第38-40页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第40-41页 |
| 第二章 流感病毒诱导气道高反应(AHR)小鼠模型的建立 | 第41-51页 |
| 摘要 | 第41页 |
| 引言 | 第41-42页 |
| 1. 材料 | 第42页 |
| 2. 方法 | 第42-44页 |
| ·PR8流感病毒感染C57BL/6小鼠 | 第42-43页 |
| ·流感病毒诱导小鼠产生气道高反应 | 第43-44页 |
| 3. 结果 | 第44-49页 |
| ·流感病毒PR8株C57BL/6半数致死量(LD_(50))测定 | 第44-45页 |
| ·流感病毒PR8株诱导小鼠产生免疫应答 | 第45-46页 |
| ·小鼠感染流感病毒PR8株后支气管肺泡灌洗液细胞因子变化 | 第46页 |
| ·卵清蛋白诱导小鼠产生过敏型哮喘模型 | 第46-47页 |
| ·流感病毒诱导小鼠AHR最佳条件检测 | 第47-49页 |
| 4. 讨论 | 第49-51页 |
| 第三章 流感病毒小鼠感染模型在哮喘AHR治疗研究中应用 | 第51-66页 |
| 摘要 | 第51页 |
| 引言 | 第51-52页 |
| 1. 材料 | 第52页 |
| 2. 方法 | 第52-55页 |
| ·流感病毒及实验动物 | 第52页 |
| ·小鼠肺阻力(RL)的测定 | 第52页 |
| ·小鼠肺脏BALF的灌洗 | 第52-53页 |
| ·肺脏单细胞悬液的制备 | 第53-54页 |
| ·小鼠肺脏细胞流式荧光抗体染色 | 第54页 |
| ·流式细胞结果分析 | 第54页 |
| ·小鼠肺脏细胞因子的测定 | 第54-55页 |
| ·重组IL-33蛋白刺激小鼠呼吸道 | 第55页 |
| ·IL-33 mAb体内中和试验 | 第55页 |
| ·定量PCR的检测 | 第55页 |
| 3. 结果 | 第55-64页 |
| ·H1N1病毒诱导AHR与T、B淋巴细胞关系 | 第55-57页 |
| ·小鼠AHR症状与肺脏2型固有淋巴细胞变化 | 第57-59页 |
| ·2型固有淋巴细胞活化需要IL-33细胞因子的参与 | 第59-62页 |
| ·IL-33细胞因子单克隆抗体应用与气道高反应 | 第62-64页 |
| 4. 讨论 | 第64-66页 |
| 第四章 抗流感药物体外筛选-M2离子通道模型的应用 | 第66-80页 |
| 摘要 | 第66页 |
| 引言 | 第66页 |
| 1. 材料 | 第66-67页 |
| 2. 方法 | 第67-72页 |
| ·流感病毒RNA的提取 | 第67页 |
| ·RT-PCR | 第67-68页 |
| ·PCR产物的酶切与回收 | 第68页 |
| ·pGEX-4T-1载体质粒的提取、酶切及回收 | 第68-70页 |
| ·连接产物的转化及验证 | 第70页 |
| ·诱导表达及目的蛋白的鉴定 | 第70-72页 |
| ·M2离子通道模型的建立及验证方法 | 第72页 |
| ·M2离子通道模型在抗流感药物筛选中的应用 | 第72页 |
| 3. 结果 | 第72-78页 |
| ·PR8-M2基因的扩增、酶切回收 | 第72-73页 |
| ·pGEX-4T-1质粒的提取及酶切回收 | 第73-74页 |
| ·M2-pGEX-4T-1表达质粒的连接、转化 | 第74页 |
| ·M2-pGEX-4T-1表达质粒的连接、转化及验证 | 第74-75页 |
| ·M2离子通道模型的建立 | 第75-77页 |
| ·M2离子通道模型在药物筛选中的应用 | 第77-78页 |
| 4. 讨论 | 第78-80页 |
| 第五章 抗流感药物体内筛选模型应用 | 第80-88页 |
| 摘要 | 第80页 |
| 引言 | 第80-81页 |
| 1. 材料 | 第81页 |
| 2. 方法 | 第81-82页 |
| ·小鼠感染H3N2病毒及半数致死量(LD_(50))的测定 | 第81页 |
| ·药物敏感型毒株体内药物筛选模型建立 | 第81页 |
| ·体内筛选模型对候选药物的评价 | 第81-82页 |
| 3. 结果 | 第82-86页 |
| ·H3N2流感病毒感染小鼠及LD_(50)计算 | 第82页 |
| ·小鼠药物评价模型的建立 | 第82-83页 |
| ·M2抑制剂候选药物体内筛选验证 | 第83-85页 |
| ·耐药毒株PR8体内模型对药物筛选 | 第85-86页 |
| 4. 讨论 | 第86-88页 |
| 第六章 结论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 作者简介 | 第105页 |
